Бактериологическое исследование мокроты при туберкулезе

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РЕСПУБЛИКИ БЕЛАРУСЬ

БЕЛОРУССКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ

СОВРЕМЕННАЯ БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА ТУБЕРКУЛЕЗА

УДК 616.24-002.5-078 (075.8) ББК 55.4 я73 С 56

Авторы: канд. мед. наук, асе. Г.С. Авдеев; ст. науч. сотр. НИИ пульмонологии и фтизиатрии О.М. Залуцкая; канд. мед. наук, доц. П.С. Кривонос; д-р мед. наук, рук. отдела иммуноморфологических исследований Л.К. Суркова; канд. мед. наук, асе. В.В. Пылишев

Рецензент д-р мед. наук, доц. каф. фтизиопульмонологии Белорусской ме­дицинской академии последипломного образования А.Н. Лаптев

Утверждено Научно-методическим советом университета в качестве методических рекомендаций 28.05.2003 г., протоколе» 7

Современная бактериологическая диагностика туберкулеза: Метод, рекомен-С 56 дации / Г.С. Авдеев, О.М. Залуцкая, П.С. Кривонос и др. — Мн.: БГМУ, 2003. — 22 с.

Рассматриваются современные методы бактериологической диагностики туберкулеза. В частно­сти подробно излагаются методики забора материала для исследования, бактериоскопическое исследо­вание, люминисцентная микроскопия, культуральное исследование, биологические методы и основные молекулярно-генетические методы диагностики туберкулеза.

Предназначаются для студентов 4-6 курсов медицинского факультета иностранных учащихся, лечебного, педиатрического, медико-профилактического факультетов, для клинических ординаторов, стажеров и врачей-фтизиатров.

УДК 616.24-002.5-078 (075.8) ББК 55.4 я73

© Белорусский государственный медицинский университет, 2003

9. Молекулярно-генетические методы диагностики инфекционных заболеваний.

Контрольные вопросы по теме занятия:

Возбудитель туберкулеза: история открытия, основные свойства, так­сономическое положение.

Правила сбора мокроты для исследования на туберкулез.

Бактериоскопическое исследование мокроты с окраской мазка по Цилю-Нильсену: методика, интерпретация результатов.

Культуральное исследование на туберкулез: методика, интерпретация результатов.

Основные методы определения лекарственной устойчивости микобак­терии.

Автоматические системы для детекции микобактерии и определения лекарственной устойчивости.

Биологические методы диагностики туберкулеза.

Амплификационные методы, используемые для детекции микобакте­рии. ПЦР.

Генотипирование микобактерии туберкулеза.

УЧЕБНЫЙ МАТЕРИАЛ Возбудитель туберкулеза

Род Mycobacterium — единственный представитель группы 21 «Микобак­терии». Согласно девятому изданию «Определителя бактерий Берджи» этот род объединяет свыше 100 видов микобактерии; в клиническом диагностическом материале обычно определяется 10-12 видов микобактерии, 6 из которых пато­генны для человека. Это М. tuberculosis, M. bovis, M. qfricanum, M. avium, М. хепор и М. fortuitum. Хотя клеточная стенка микобактерии сходна с клеточ­ной стенкой грамположительных бактерий и представляет собой многослойный пептидогликановый комплекс, с ней связаны преимущественно липиды (мико-ловые кислоты, воски, фосфолипиды и ацетилированные трегалозы), а не белки и полисахариды, как у других бактерий. Это придает клеточной стенке мико­бактерии сильные гидрофобные свойства. В дополнение к липидам, которые могут составлять до 60% клеточной стенки, клетки микобактерии содержат уг­леводы и растворимые белки. Клеточная стенка микобактерии создает гидро­фобный барьер, затрудняющий проникновение в клетку водорастворимых со­единений. Вследствие этого микобактерии демонстрируют весьма медленную скорость роста и являются естественно устойчивыми к химическим воздействи­ям, в том числе к кислотам, спиртам и к большинству используемых в настоящее время антибиотиков. Поэтому выбор препаратов для лечения больных туберку­лезом и другими заболеваниями, вызываемыми микобактериями, ограничен.

Клетки микобактерии прямые или слегка изогнутые, имеют размеры 0,2-0,7 х 1,0-10 мкм. Микобактерии не образуют спор, жгутиков, мицелия и

капсул, одцако имеют микрокапсулу, отделенную от клеточной стенки осмие-фобной зоной. Типовой вид рода Mycobacterium — М. tuberculosis (МБТ). Ми­кобактерии характеризуются плеоморфизмом: клетки в молодых культурах имеют палочковидную форму, в старых — чаще кокковидную. Микобактерии иногда образуют L-формы, сохраняющие инфекционность_г а также фильтрую­щиеся формы (их патогенетическая роль изучена недостаточно). Вирулентные штаммы М. tuberculosis обладают так называемым*корд-фактором (трегалоза-6,6′-димиколат), обусловливающим слипание бактериальных клеток в микро­колониях. Микобактерии являются аэробами, но способны расти в факульта­тивно анаэробных условиях; концентрация С0₂ 5-10% способствует более бы­строму росту. Размножаются делением, время генерации составляет 14-18 ча­сов (для сравнения у E.coli — 20 минут). У микобактерии направления репликативной вилки и транскрипции совпадают только у 56% генов (для сравнения, у Bacillus subtilis этот показатель составляет 78%), что является еще одной причиной медленного роста. Для роста in vitro микобактерии нуждаются в белковом субстрате и глицерине, а также в углероде, хлоре, сере, фосфоре, азоте, факторах роста (биотине, никотиновой кислоте, рибофлавине и др.), в ионах (Mg 2+ , K + , Na + , Fe 2+ ). Температурный оптимум составляет 37-3 8°С, опти­мум рН 7,0-7,2.

Диагностический материал для исследования на туберкулез

При исследовании с целью выявления МБТ можно использовать любой патологический материал: мокроту, которую выделяет больной, или получен­ную после раздражающей ингаляции; бронхиальный секрет; бронхоальвеоляр-‘ный смыв (БАС); материал катетер- и аспирационной биопсии, полученный при бронхоскопии; аспираты из трахеи; экссудат; транссудат из плевральной и брюшной полостей; гной из натечников и свищей; мочу; спинномозговую жид­кость; содержимое открытых ран; менструальную кровь; соскобы эндометрия; сперму; секрет предстательной железы; пунктаты яичек; биопсийный, аутоп-сийный материал; органы экспериментальных животных; смывы с предметов больничной среды и др. Использование бронхоскопии для взятия микробиоло­гических образцов оправдано только при многократных неудачных попытках получения материала более простыми способами у больных с неясным диагно­зом. В ряде случаев, когда больному трудно откашлять мокроту, прибегают к специальным методам, например, стимуляции выделения мокроты. Мокрота, собранная после стимуляции, по внешнему виду напоминает слюну, поэтому такой материал перед направлением в лабораторию снабжают специальной маркировкой («индуцированная мокрота»).

Все клинические образцы, предназначенные для бактериологического ис­следования, должны быть собраны до или в течение первых нескольких дней химиотерапии, поскольку в некоторых случаях нескольких дней специфиче­ской терапии достаточно для того, чтобы прекратить бактериовыделение, и то­гда бактериологическое исследование бесполезно.

Эффективность микробиологической диагностики туберкулеза в значи­тельной степени зависит от правильности сбора диагностического материала. От соблюдения правил сбора, хранения и транспортировки диагностического материала зависит также эпидемиологическая безопасность окружающих.

Мокроту (основной диагностический материал для исследования на ту­беркулез) собирают в специальные стеклянные баночки емкостью около 50 мл с герметически закрывающимися крышками. Необходимо использовать баночки с широким горлышком (диаметр не менее 35 мм), чтобы пациент мог легко со­брать мокроту без контаминации наружной поверхности баночки. Мокроту можно собирать также в одноразовые плевательницы, которые после использо­вания подлежат уничтожению. Посуда для сбора мокроты должна быть сделана из прозрачного материала, чтобы можно было определить количество и состоя­ние собранного материала, не снимая крышку с баночки.

Мокрота для исследования должна собираться под контролем медицин­ского персонала с обязательным проведением инструктажа о правилах сбора мокроты, которые сводятся к следующему:

Добейтесь взаимопонимания с больным и объясните ему, для чего не­обходимо провести исследование мокроты, как нужно откашливать мокроту из глубоких отделов легких. Объясните больному, что он не должен собирать слюну или носоглоточную слизь.

Проинструктируйте больного, чтобы он прополоскал рот перед сдачей мокроты. При этом из полости рта удаляются остатки пищи и контаминирую-щие бактерии.

Пациент должен сделать два глубоких вдоха и задержать дыхание на несколько секунд после каждого из них, а затем медленно выдохнуть. Затем вдохнуть в третий раз и с силой выдохнуть воздух. Потом вдохнуть еще раз и затем покашлять. Это способствует получению мокроты из глубоких отделов легких.

После появления продуктивного кашля пациент должен поднести к губам контейнер и аккуратно сплюнуть в него мокроту. Нередко мокрота быва­ет густой и слизистой, хотя может быть и жидкой, с частицами некротических тканей из пораженных участков легких. Цвет мокроты может быть грязно-белым или грязновато-светло-зеленым. Мокрота с примесью крови имеет крас­ный или коричневый цвет.

Жидкая прозрачная слюна или выделения из носоглотки не являются мокротой и имеют небольшую ценность при диагностике туберкулеза.

Для исследования необходимо получить достаточное количество мок­роты (3-5 мл), содержащей плотные гнойные частицы, а не слюну.

Во время продуктивного кашля пациента образуется аэрозоль, содержа-щий МБТ. В целях обеспечения мер безопасности при откашливании мокроты пациентом и предупреждения инфицирования медицинского персонала потен­циально заразными аэрозолями сбор мокроты должен осуществляться в специ­ально оборудованном помещении, оснащенном бактерицидными лампами, ло­кальной вытяжной вентиляцией, в присутствии медицинского персонала с обя­зательным проведением инструктажа о правилах сбора мокроты. Если условия

этого не позволяют, то сбор мокроты проводят вне помещения (на открытом воздухе) или в помещении, где нет других людей, под контролем медицинского работника. В любом случае нельзя собирать мокроту в замкнутых помещениях. Образцы мокроты от одного пациента не объединяют в одном сосуде, а направ­ляют в лабораторию с указанием сведений о пациенте для каждой пробы. Дос­тавку мокроты в лабораторию осуществляют сразу после взятия в плотно за­крытом промаркированном контейнере, помещенном в бикс для транспорти­ровки. Если транспортировка откладывается, собранную мокроту следует хра­нить в холодильнике при 4°С не более одних суток или в консерванте не более трех суток.

Методы бактериологической диагностики туберкулеза

Бактериологическая лаборатория играет существенную роль в выявлении, диагностике туберкулеза, выборе рациональных схем химиотерапии и оценке их эффективности. Бактериологическая диагностика включает обработку кли­нического материала, микроскопическое исследование, выделение микроорга­низма с применением культуральных методов, идентификацию микобактерий с использованием бактериологических и биохимических тестов, а также опреде­ление лекарственной чувствительности микобактерий.

Существует несколько групп методов, используемых для выявления МБТ в различном диагностическом материале: рутинные (микроскопия, культураль-ное исследование), биологические (биопроба, определение вирулентности штаммов МБТ), автоматические системы (MGIT, BACTEC, MB/BacT, ESP Cul­ture System и др.), молекулярно-генетические методики (PCR, LCR, NASBA, Q—Beta и др.). Каждый из этих методов обладает определенной чувствительно­стью и специфичностью, что необходимо учитывать при клинической интер­претации полученных результатов.

Таблица 1 Чувствительность различных методов бактериологической диагностики туберкулеза

источник

Туберкулез – это микробная, специфическая и хронически протекающая инфекция.

Вопреки распространенному мнению, что туберкулез поражает только легкие, он опасен для всех тканей тела, за исключением волос и ногтей. Но легочные формы инфекции наиболее распространены, поэтому для диагностики этой формы применяют посевы мокроты.

Но это не единственная методика определения болезни. Нередко туберкулез протекает скрыто, его принимают за ОРВИ, бронхиты, пневмонии и другие проблемы здоровья, важно вовремя его определить, так как лечение длительное, сложное и многоэтапное, подавить бактерии непросто.

Чтобы определить наличие патогенных бактерий в организме больного, можно использовать несколько методов исследования. К ним относят микроскопию мокроты (метод Циля-Нильсена), люминисцентное исследование, посев мокроты (или бактериоскопия) и метод ПЦР-реакции.

Все эти тесты обнаруживают наличие микобактерий туберкулеза в образцах мокроты, собранной по всем правилам и немедленно доставленной в лабораторию.

Чтобы результаты были достоверными, берется не одна, а три пробы мокроты, из каждой берется необходимый объем материала для исследования.

Результаты считают положительными, если хотя бы в одной из трех проб обнаруживаются микобактерии туберкулеза – кислотоустойчивые микробы. Для всех этих исследований берут мокроту, которую получают при откашливании или за счет отсасывания из бронхов или бронхоскопии.

Данный метод на сегодняшний день, наряду со всеми другими, относится к ведущему методу диагностики туберкулеза. Он помогает визуально определить микобактерии, и сделать выводы о том – есть он в образцах или нет. Этот метод, хотя он простой и примитивный, не уступает многим другим более сложным и дорогим методикам в точности. Исследование проводится после получения образца мокроты при откашливании:

• Мазок окрашивается специальными красителями;
• Просматриваются на предметном стекле под микроскопом, используя иммерсионную систему.
• В приготовленном мазке микобактерии, устойчивые к кислоте, приобретают красное окрашивание.
• Результаты определяются на протяжении часа, но иногда для подготовки и исследования нужно около суток.

Методика доступная и простая, экономичная и может применяться в любой клинике. Однако, нет строгой специфичности исследования, она выявляет любые микобактерии, даже те, что не приводят к воспалению легких и поражениям.

Для этого исследования мокрота готовится так же, как для обычной микроскопии, но используется особый микроскоп, который выявляет свечение микобактерий желтым цветом, когда весь фон при этом окрашен в синий цвет. При помощи этой методики определяется еще и количество возбудителей, и по нему можно говорить о тяжести состояния и длительности туберкулеза.

Это современный высокоинформативный метод выявления бактерий. Он определяет ДНК микобактерий, которая специфична для каждого типа возбудителей. В лаборатории воспроизводят копирование участка ДНК бактерий, что позволяет определить его затем за счет определенных реактивов и методов идентификации. Метод точно выявляет туберкулез.

Это один из стандартов исследования на туберкулез, он проводится всем пациентам после забора материала. Посевы проводят на специальные питательные среды, и достаточно даже небольшого количества живых туберкулезных палочек для их идентификации. Рост бактерий длительный, посевы готовят долго, могут быть сроки от 3 до 12 недель.

Колонии туберкулезных бактерий имеют специфичный вид, по которому их можно распознать. При помощи данной методики можно определить еще и бактериовыделение (когда пациент особенно опасен).

Оценка результатов проводится в баллах. Нормативом будет отрицательный посев, не обнаруживающий роста бактерий. Положительные результаты трактуют как:

• 1 балл – скудная картина туберкулезной инфекции;
• 2 балла – умеренное выделение бактерий;
• 3 балла – обильное бактериовыделение.

При результате 3 балла пациент опасен для окружающих, у него туберкулез имеет активное течение, микробы вредят его здоровью.

Также в результате исследования определяют еще и чувствительность посеянных бактерий к антибиотикам и химиотерапевтическим препаратами. После выращивания колоний на питательных средах проводят тест на препараты и по его результатам вносят коррективы в лечение.

Мокрота выделяется легкими при различных патологиях, в том числе и при туберкулезе. Она может иметь различный характер – слизистая, кровянистая, гнойная. Отделение мокроты происходит при кашле, поэтому можно собрать ее как при откашливании, так и за счет аспирации из бронхов. Чтобы результаты были максимально достоверными, важна правильная методика забора материала:

• Мокрота сдается утром после сна, строго натощак;
• Перед сдачей анализа не нужно чистить зубы;
• Важно заранее прополоскать полость рта теплой водой;
• Мокроту стимулируют к отделению за счет серии из трех глубоких вдохов;
• За счет кашлевых толчков откашливается комочек мокроты, который собирается в стерильную емкость, которую сразу же закрывают и доставляют в лабораторию. При сборе мокроты краев емкости не касаются, это может привести к искаженным результатам.

Особенностями сбора именно на туберкулез являются некоторые дополнительные пункты в сборе. Так, процедуру проводят в отдельном помещении, где активно вентилируются комнаты, либо есть открытое окно, в отсутствии посторонних или членов семьи, чтобы не распространять бактерии. Затем комната, где был больной и собирал мокроту, тщательно проветривается.

Материал собирают трижды, каждое утро, используя новый контейнер. Если мокрота плохо откашливается, проводят ингаляцию с физраствором для стимуляции и откашливания.

Хотя сегодня туберкулез можно выявлять различными методами – флюорография, пробы Манту и Диаскинтест, для подтверждения инфекции необходимо обнаружение бактерий. Учитывая, что данные посева оценивают в совокупности с ПЦР, бактерископией, это дает максимально точный результат. Помимо этого, определяется еще и наличие бактериовыделения – то есть заразной стадии инфекции. Помимо прочего, посевы дают возможности определить необходимые лекарства, к которым чувствительны бактерии, что помогает в лечении туберкулеза. При закрытой форме туберкулеза мокрота не будет обнаруживать наличие бактерий.

Парецкая Алена, врач, медицинский обозреватель

2,732 просмотров всего, 2 просмотров сегодня

источник

Д.В. Шевчук, О.Е.Кузнецов

Бактериологический (культуральный) метод имеет ряд преимуществ перед микроскопическим и другими методами. Основное преимущество состоит в возможности обнаружения скудного количества жизнеспособных МБТ в клиническом материале: положительные результаты получают при наличии в исследуемом материале от 20 до 100 жизнеспособных микробных клеток в 1 мл. Однако ему свойственны и недостатки, обусловленные длительностью сроков появления видимых колоний микобактерий туберкулеза. В тоже время возможность получения чистой культуры возбудителя, которая может быть подробно исследована, позволяет решать вопросы изучения ее лекарственной чувствительности, вирулентности и других биологических свойств (типовой принадлежности).

Для нормального развития МБТ требуются специальные питательные среды, содержащие углерод, азот, водород, кислород, фосфор, магний, калий, а также железо, хлор, натрий, серу. Кроме того, для полноценного развития МБТ, как и других микроорганизмов, необходимо наличие факторов роста, которые в минимальных количествах улучшает рост бактерий на средах. Факторы роста не входят в состав ферментных систем клетки, но используются для их построения. Известны факторы роста, родственные по своей природе витаминам группы В, ряд аминокислот, органических кислот и липидов. Все эти факторы содержаться в разных количествах в питательных средах – яичных, кровяных, картофельных. Следует отметить, что потребности микробов в ростовых веществах весьма вариабельны и существенно зависят от условий культивирования. Имеющиеся в литературе сведения по этому вопросу немногочисленны и зачастую противоречивы.

В популяции МБТ обычно встречаются быстро и медленно растущие, персистирующие и лекарственно-устойчивые штаммы микобактерий. В зависимости от преобладания тех или иных штаммов МБТ с разными свойствами, меняется скорость и характер их роста на питательных средах, а при снижении жизнеспособности МБТ их рост на среде может не только замедлиться, но даже и не появиться. Первичные культуры микобактерий, выделенные из патологического материала, особенно чувствительны к отсутствию факторов роста. По-видимому, при вегетировании в тканях организма они теряют способность самостоятельно синтезировать такие вещества. Следовательно, для таких культур необходимы полноценные питательные среды.

По составу среды можно разделить на 3 группы:

1. среды, содержащие глицерин;
2. белковые среды (сывороточные, яичные);
3. синтетические (безбелковые) среды.
4. смешанные среды, которые являются более полноценными.

По консистенции среды делят на твёрдые, полужидкие и жидкие. Для культивирования и дифференциации микобактерий туберкулёза используется большое количество разнообразных по составу и консистенции питательных сред.

Питательные среды, используемые для получения культур микобактерий можно разделить на три группы:

1. яичные (Левенштейна-Йенсена, Финна, Петраньяни и др.);
2. агаровые (Миддлбрука 7Н10, 7Н11 и др.);
3. бульонные или жидкие (Миддлбрука 7Н9, 7Н12, Дюбо, Школьниковой и др.).

Для культивирования МБТ используют различные питательные среды: жидкие, полужидкие и плотные. Жидкие и полужидкие среды используются редко, в связи с возможностью возникновения аварийных ситуаций и внутрилабораторного заражения персонала. Стандартной плотной средой, рекомендуемой ВОЗ для выделения возбудителя и определения его лекарственной чувствительности является яично-солевая среда Левенштейна-Йенсена. Она выпускается в виде порошка, который разводится, разливается в пробирки и подогреваясь, приобретает плотную консистенцию, за счет сворачивания яичного белка. Предварительно, перед сворачиванием, среда подкрашивается бриллиантовым зеленым для облегчения в последующем идентификации колоний МБТ.

Существуют другие варианты плотных яичных сред: Финна II (L-аспарагин заменен на глутамат), Аникина (без аспарагина), Гельберга (приготовленная на картофельном отваре). Однако они имеют ряд недостатков: высокая стоимость с учетом широкого распространения бактериологического исследования в противотуберкулезных учреждениях, относительно медленный рост МБТ, особенно при их пониженной жизнеспособности, что особенно часто встречается в условиях химиотерапии. Разработка новых плотных питательных сред, позволяющих ускорить выделение микобактерий, повысить интенсивность их роста, а также, что весьма важно, снизить себестоимость в условиях массового применения, является несомненно актуальной проблемой, заслуживающей серьезного внимания.

Диагноз туберкулеза у пациента подтверждается на основании лабораторного исследования при обнаружении в диагностическом МБТ при параллельных микроскопических и культуральных исследованиях. Именно поэтому исследования в микробиологических лабораториях противотуберкулезной службы, помимо микроскопии мазков из клинического материала, должны обязательно включать культуральные исследования, направленные на идентификацию кислотоустойчивых микобактерий и определение их принадлежности к виду M. tuberculosis или к другим видам нетуберкулезных микобактерий, а также определение чувствительности микобактерий к лекарственным препаратам.

Бактериологический метод является более чувствительным и достоверным, он позволяет выявить МБТ, если их содержится около 100 в 1 мл. материала. Важным преимуществом этого метода является возможность выделения возбудителя и изучение его видовой принадлежности, вирулентности, лекарственной чувствительности.

Недостатками бактериологического метода можно считать:

1. сложность – выполним только в специализированной бактериологической лаборатории.
2. высокую стоимость исследования.
3. длительность исследования может составить 20-90 дней, в зависимости от типа роста микобактерии.

МБТ – очень требовательные гетеротрофы, нуждающиеся в глутаминовой и особенно аспарагиновой кислоте и глицерине (источнике углеводов) Стимулятором роста является лецитин, содержащийся в больших количествах в яичном желтке.

В связи с ограничением объема массовых флюорографических обследований должны проводится бактериологические исследования на туберкулез у лиц из контингентов повышенного риска заболевания туберкулезом:

• с остаточными туберкулезными изменениями.
• больных хроническими неспецифическими болезнями органов дыхания
• больных с хроническими заболеваниями мочеполовой системы (хронический пиелонефрит, цистит, простатит, мочекаменная болезнь, осложненная пиелонефритом, лица с неясными болями в поясничной области, расстройством мочеиспускания, находящиеся на гемодиализе, после пересадки почки)
• перенесшие туберкулез любой локализации и имеющих урологические жалобы с дизурией, гематурией и альбуминурией
• женщин с бесплодием и хроническими воспалительными заболеваниями гениталий
• работников из неблагоприятных по туберкулезу крупного рогатого скота хозяйств
• с гиперэргическими реакциями Манту и имеющих контакт с больным туберкулезом
• нетранспортабельных больных
• при подозрении на туберкулез легких, туберкулез лимфатических узлов, костно-суставной и туберкулез других локализаций
• бактериологическое обследование на туберкулез производятся у всех лиц при обращении в поликлинику за медицинской помощью с субфебрильной температурой неясной этиологии, грудной симптоматикой и простудными заболеваниями
• рентгенположительные лица обследуются при наличии отягощающих факторов (перенесенные тяжелые заболевания, длительное лечение кортикостероидными препаратами и др.)

Бактериологическому исследованию подвергается самый разнообразный материал: мокрота, промывные воды бронхов, желудка, экссудат, отделяемое ран, моча, ликвор, биопсийный и секционный материал и др.

Результативность бактериологического обследования зависит от правильности сбора патологического материала, хранения и его доставки, особенно от больных с бронхолегочными заболеваниями. При необходимости транспортировки патологического материала на дальние расстояния (особенно в летний период) необходимо применять консерванты, которыми должна снабжать специализированная баклаборатория. В качестве консервантов употребляют стерильные: 10% раствор трехзамещенного фосфорнокислого натрия, 10% раствор глицерина на дистиллированной воде и 2-3% раствор борной кислоты на дистиллированной воде. Патологический материал заливается в соотношении 1:1, вязкая мокрота 1:2, 1:3. В случае использования консерванта допускается более длительное хранение патологического материала (до 2-3 суток в условиях холодильника).

Материал доставляется в лабораторию в стерильной, хорошо закрытой посуде. С целью максимально гомогенизировать материал и подавить рост неспецифической гнилостной и гноеродной флоры, при отсутствии предварительной консервации, материал обрабатывается 10% трехзамещенным фосфорнокислым натрием (фосфат натрия), или 2%-6% стерильным водным раствором серной кислоты (метод Гона).

Для повышения информативности метода целесообразно исследовать патологический материал 3-кратно, в течение одной недели. Такая мера повышает чувтвительность метода на 3,4-5,8%. Рядом авторов установлено, что максимальный прирост высеваемости МБТ у вновь выявленных пациентов наблюдается при 6-кратных посевах (36-37%).

Для повышения результативности культурального метода рекомендуют посев осуществлять одновременно на две-три различные по составу питательные среды, чаще на среду Левенштейна-Йенсена и на среду Финна II. Посевы просматриваются каждые 7 дней, рост МТ появляется на 3-6 неделе. Большинство посевов дает рост МТ в течение 2-х месяцев. Однако, отдельные штаммы растут до 90 дней, поэтому необходимо инкубировать посевы до 3-х месяцев. При отсутствии роста к этому времени посев считается отрицательным.

Вирулентные культуры МБТ растут на плотных питательных средах в виде R-колоний (шероховатых) различной величины. Колонии чаще сухие, морщинистые, цвета слоновой кости, иногда с розоватым или желтоватым оттенком. Гладкие колонии (S-формы) характерны для микобактерий бычьего типа, которые в посдедние годы встречаются крайне редко. Следует помнить, что гладкие колонии с влажным ростом могут вырастать после курса проведенной химиотерапии больному туберкулезом. В виде S-форм с ярко оранжевой или желтой пигментацией растут сапрофиты и атипичные микобактерии.

Положительный ответ дают только после микроскопии мазка из выросших колоний по Цилю-Нильсену, подтверждения их кислотоустойчивости. В мазках обнаруживаются интенсивно прокрашенные красные палочки, лежащие одиночно или скоплениями, переплетаясь в виде «кос» (благодаря наличию корд-фактора), в длительно растущих культурах видны темные зерна. Далее проводится количественная оценка результатов посева. Существуют различные системы оценки. Общепринятой в РБ считается трехбалльная система.

Результаты учитывают путем ежедневного, начиная с третьего дня инкубации, сравнения сроков появления роста на питательной среде и оценки интенсивности роста колоний МБТ.

Интенсивность роста оценивалась путем подсчета колоний по 3-х бальной системе (колониеобразующие единицы – КОЕ):

• (1+) – от единичных до 20 КОЕ – «скудное» бактериовыделение, бактериоскопически микобактерии не определяются;
• (2+) – от 21 до 100 КОЕ – «умеренное» бактериовыделение,
• бактериоскопически определяются единичные микобактерии в каждом поле зрения или единичные в препарате;
• (3+) – более 100 КОЕ – «обильное» бактериовыделение, бактериоскопически определяются 10 и более микобактерий в каждом поле зрения.

источник

Туберкулез является одним из самых массовых заболеваний в мире. Это трудноизлечимая инфекционная болезнь, которая не проходит без последствий для организма и может привести к смертельному исходу. Основные клинические проявления туберкулеза – субфебрильная температура тела на протяжении нескольких недель и кашель, который сопровождается выделением мокроты, зачастую кровавой.

Анализ мокроты на выявление бактерий туберкулеза является одним из важнейших диагностических методов болезни. В случае туберкулезного воспаления, как и многих других воспалительных заболеваний дыхательной системы, «мокрый» кашель является защитным механизмом организма. При помощи этого процесса организм пытается избавиться от инфекции.

Выявлением пациентов, заболевших туберкулезом, занимаются врачи первичных лечебных заведений. Но подтверждается диагноз в специализированном противотуберкулезном учреждении. Сбор мокроты на микобактерии туберкулеза относится к обязательным диагностическим минимумам.

Симптоматика туберкулезной инфекции может не проявляться длительное время. При развитии патологии появляется сухой кашель, на смену которому приходит мокрый, с выделением патологической слизи.

Характер самого секрета может быть разным:

Изначально это вязкая, бело-гнойная мокрота, в последующем ее вязкость увеличивается.

Иногда в нем могут обнаруживаться прожилки крови, как проявление кавернозного процесса в легочной ткани.

В редких и тяжелых случаях слизистые выделения из легких могут быть представлены сплошной кровавой массой.

При активном туберкулезном инфекционно-воспалительном процессе не встречается пенистый секрет, как при бронхите или простуде.

Количество мокроты за сутки в течение всей болезни также изменяется. На пике болезни оно может достигать 300-400 мл за сутки. При этом постепенно отделение бронхиального секрета затрудняется, кашель приобретает спазматический характер. Первоначально мокрота преимущественно отходит утром, далее – в течение всего дня.

Основные методы выявления микобактерии туберкулеза в биологических жидкостях:

Согласно рекомендациям ВООЗ, забор проводят не меньше двух раз. Исследование назначают при обращении к врачу пациента с жалобами на кашель, который длится более 3 недель. После чего проводят бактериоскопическое исследование и выявляют наличие кислоустойчивых бактерий.

Существует определенная последовательность сдачи анализа мокроты при подозрении на туберкулез:

1. Всем пациентам, которые подвергаются клиническому обследованию, производят забор двух образцов секрета для микроскопии.
2. Контейнеры для сбора должны быть одноразовые с широкой горловиной, объемом не меньше 5-7 мл.

Первую порцию бронхиального секрета пациент собирает и сдает при посещении лечебного учреждения в день обращения с соответствующими жалобами.

Вторую порцию пациент собирает дома самостоятельно утром. Медицинский сотрудник должен разъяснить правила забора секрета.

При диагностическом исследовании важно знать правила сбора мокроты на туберкулез:

1. Забор материала производят в утреннее время до приема пищи – за ночь во время сна образуется большое количество мокроты, что облегчает непосредственно проведение забора выделений и повышает информативность исследования.
2. Нужно провести все гигиенические процедуры ротовой полости: почистить зубы и пополоскать слизистую рта – это проводится с целью предотвращения попадания в патологический материал остатков пищи и микрофлоры ротовой полости.
3. Перед самой процедурой не следует принимать противокашлевые лекарственные препараты, так как угнетение кашля может затруднить отхождение слизи.
4. Вечером перед сном накануне забора материала назначают препараты, которые облегчают отхождение секрета (муколитики). Если отхождение мокроты затруднено, то в таком случаем применяют ингаляционное введение разжижающих или отхаркивающих лекарственных средств.

Нужно приготовить стерильную герметическую емкость для материала.

Помещение, где проводится забор, должно быть хорошо проветрено, соответствовать санитарным нормам, быть отдаленным от большого собрания людей.

Для облегчения отхождения секрета можно выпить теплой воды. После этого хорошо откашливаются и сплевывают мокроту в контейнер. Необходимо проследить, чтобы не была сплюнута слюна.

Забором материала занимаются работники лечебных медицинских учреждений. Лучше всего сдавать мокроту под контролем медика, который определит правильность выполнения процедуры. Изучением патологического материала занимается лаборант, задача которого заключается в точном и правильном исследовании мокроты.

Мокроту для исследования на туберкулез необходимо доставить сразу же после ее забора. В крайнем случае, она хранится не более семи дней в холодильнике при температуре +3°С. При транспортировке все контейнеры плотно упаковывают в специальные биксы, фиксируя их в вертикальном положении. Должна быть защита от УФ лучей. К каждому боксу прикрепляют описание образцов ТБ-05(а), дату и номер забора.

Бактериоскопическое исследование заключается в создании мазка на предметном стекле, который проходит определенные этапы обработки. Одним из них является окрашивание по методу Циля-Нильсена. Далее проводят пересмотр 100 полей зрения. Если не обнаруживаются МБТ, то просматривают еще дополнительно 200.

Также исследуемый материал окрашивают карболовым фуксином. Затем обесцвечивают 5% раствором серной кислоты или 3% солянокислым спиртом. Затем мазок окрашивают метиленовым синим и просматривают в микроскопе с применением имерссионного масла.

Важно! Всем пациентам с подозрением на туберкулез проводят микроскопию трех различных образцов мокроты. Это может выполнить любая клиническая лаборатория. Данное исследование входит в диагностический минимум на предмет туберкулезной инфекции.

Микроскопическим методом обычно выделяют около 75% всех бактериовыделителей среди впервые заболевших туберкулезом. Важно придерживаться кратности диагностических мероприятий – это повышает выявляемость и информативность.

При своевременно проведенном бактериоскопическом исследовании можно выявить больного на начальной стадии заболевания, изолировать его, и уже в ближайшее время начать специфическую химиотерапию, что, в свою очередь, снизит вероятность возникновения осложнений.

Бактериологический метод исследования проводят при помощи таких способов, как:

• люминесцентная микроскопия мазков;
• посев мокроты на туберкулез;
• биологический способ (заражение морских свинок);
• иммуноферментное исследование;
• молекулярно-генетический способ;
• ВАСТЕС 460 – жидкостно-культуральная система;
• MGTT 960;
• амплификация нуклеиновых кислот – ПУР.

В основном эти методы относят к высоко специализированным и проводят в специальных лабораториях.

Расшифровка результатов анализа на наличие микобактерии туберкулеза заносится в форму ТБ-05 (заполняется на каждого пациента). Данное заключение содержит следующие пункты:

• название ЛПУ;
• дата заполнения;
• ФИО, возраст, пол, адрес пациента;
• причина проведения анализа (диагностика, контроль);
• номер образца и районный идентификационный номер пациента;
• дата забора мокроты;
• результаты диагностики (лабораторный порядковый номер, внешний вид мокроты, микроскопический анализ, ФИО лаборанта с подписью и датой).

Несмотря на то, что результат исследования может быть положительным, установлением окончательного диагноза занимаются фтизиатры в туберкулезном диспансере. Как правило, требуется проведение еще нескольких методов исследования, одним из которых является рентгенологический.

В зависимости от результатов микробиологического исследования, существует 4 варианта тактических действий:

1. При нахождении КУБ (кислотоустойчивых бактерий) в двух мазках бронхиального секрета больного необходимо направить в противотуберкулезный диспансер.
2. Если КУБ найдены в одном мазке из двух, необходимо провести рентгенологическое исследование. После этого больно отправляют в противотуберкулезный диспансер для уточнения диагноза.
3. Если КУБ не выявлены ни в одном из мазков, но тем не менее есть клинические проявления туберкулезной инфекции, а рентгенологически определяются очаговые или инфильтративные изменения в легких – проводят тест-терапию антибиотиками широкого спектра действия в течение двух недель. При этом нельзя назначать специфические к туберкулезному возбудителю препараты. Если терапия успешна – диагноз туберкулеза снимается. Но если терапия не дала результата, то в таком случае больного отправляют на дообследование в туберкулезный диспансер.

Мазок мокроты при туберкулезе

Если КУБ не найдены ни в одном из образцов бронхиального секрета, но в легких на рентгенограмме найдены очаги диссеминации, круглая или кольцевидная тень – то в таком случае пациента также отправляют на дообследование в диспансер.

Результаты считаются положительными и имеют определенную степень, если:

1. В каждом поле зрения определяется больше 10 КУБ – степень 3+. При этом проверяют не меньше 20 полей зрения.
2. В каждом поле зрения определяется от 1 до 10 кислотоустойчивых бактерий – степень 2+. При этом просматривают от 50 полей зрения.
3. На 100 полей определено от 10 до 99 КУБ – степень 1+. Проверяют при этом не меньше 100 полей.
4. На 300 полей определено 4-9 КУБ – недостаточно позитивный результат степень 1+. В соответствующей графе записывают конкретную цифру, например, 6/300.

Негативным считается результат, если:

1. При исследовании не меньше чем 300 полей зрения определено от 1 до 3 КУБ.
2. При исследовании 300 полей зрения не найдено ни одного КУБ.

Повторный забор проводят через несколько дней для постановки точного диагноза. Самый оптимальный вариант – трехразовая сдача. Иногда могут потребоваться дополнительные пробы. Результаты бактериологического исследования можно получить на следующий день после сдачи мокроты.

При соблюдении всех правил забора материала, техники безопасности и своевременном обращении за медицинской помощью диагностика и лечение туберкулеза не вызовет никаких затруднений.

источник

Исследование мокроты на МБТ имеет важное клиническое и эпиде­миологическое значение. Обнаружение в мокроте микобактерий свидетель­ствует о том, что больной является бацилловыделителем, т.е. может выде­лять микобактерий во внешнюю среду. Такие больные представляют по­вышенную опасность для окружающих здоровых людей.

Мокроту лучше собирать утром, предварительно прополоскав рот, чтобы в ней было меньше слюны. При малом количестве мокроты ее соби­рают в течение суток. При отсутствии мокроты используют раздражающие ингаляции аэрозолями гипертонических растворов (например, поваренная соль с содой) для ее появления.

Исследование мокроты начинают с ее осмотра. При кровохарканье в мокроте обнаруживают прожилки или сгустки крови. Также в мокроте могут обнаруживаться кусочки бронхиолитов — обызвествленных камней бронхов.

При микроскопии мокроты в ней могут выявляться эритроциты, лей­коциты, эпителий, альвеолярные клетки, пылевые клетки, цилиндрический и плоский эпителий, известковые соли, кристаллы холестерина, эластиче­ские волокна.

Наибольшее значение имеет обнаружение в мокроте эластических во­локон. Эластические волокна выделяются из легких в виде пучков различ­ной величины, сохраняющих очертания альвеол, без сохранения альвео­лярного строения или в виде небольших обрывков. Кроме того, в мокроте могут обнаруживаться так называемые коралловидные волокна (волокна Коппена-Джонса) — толстые, шероховатые образования, которые образу­ются в результате отложения на эластических волокнах жирных кислот. Могут также выявляться обызвествленные волокна.

Наличие эластических волокон в мокроте указывает на разрушение легочной ткани. При свежем распаде пучки волокон сохраняют альвеоляр­ное строение, при пролиферативных формах туберкулеза альвеолярное строение не сохраняется. Коралловидные волокна появляются в основном в случаях старого туберкулеза, обызвествленные волокна — при распаде обызвествленных очагов во время обострения процесса.

В мокроте больных туберкулезом можно обнаружить известковые со­ли (в основном карбонаты и сульфаты). Они попадают в мокроту чаще всего из старых, распадающихся обызвествленных очагов.

Кристаллы холестерина, как правило, свидетельствуют о наличии в легких старых каверн.

В ряде случаев в мокроте может обнаруживаться так называемая «тетрада Эрлиха»:

Обызвествленные эластические волокна

Известь в виде кристаллических и аморфных образований

Обнаружение в мокроте тетрады Эрлиха свидетельствует об обо­стрении старого туберкулезного процесса.

Исследование мокроты также проводится бактериоскопическим, бак­териологическим и биологическим методами — см. предыдущий вопрос.

Исследование плевральной жидкости в основном применяется для диагностики туберкулезного плеврита.

Прозрачный светло-желтого цвета, с нитями фибрина экссудат назы­вают серозным. Содержание белка в нем колеблется в пределах 40-60 г/л. В начальном периоде острой фазы серозного плеврита в клеточном составе 50.-60% нейтрофилов, 15-25% лимфоцитов, также обнаруживаются эритро­циты, базофилы, мезотелиальные клетки.

При стабилизации или стихании воспаления в экссудате превалируют лимфоциты (90-95%). Увеличение в экссудате количества нейтрофилов и уменьшение лимфоцитов свидетельствует о нагноении экссудата.

Исследование ликвора имеет важное значение в диагностике туберку­лезного менингита.

В норме При туберкулезном менингите

Прозрачная, бесцветная, может слегка опалесцировать, при стоя­нии через 12-24 ч образуется паутинообразная пленка

Характер истече­ния при пункции

50-60 капель в минуту (при нор­мальном давлении в спинномозговом канале — 120-200 мм вод. ст.)

Вытекает очень частыми каплями или струей (вследствие повыше­ния давления)

Реакции Панди и Нонне-Апельта

Количество кле­ток в 1 мкл (цитоз)

Значительно повышено — 100-150 и больше. Вначале цитоз ней-трофильно-лимфоцитарный, поз­же — лимфоцитарный

Резко снижено. Степень сниже­ния пропорциональна тяжести менингита

источник

Мокрота – патологические выделения из дыхательных путей, появляющиеся после кашля. Отхаркивание свидетельствует о нарушении функции внутренней оболочки респираторного тракта. Анализ мокроты – исследование, широко применяемое для диагностики заболеваний легких и бронхов. Процедура позволяет дифференцировать патологии, протекающие на фоне кашля и другой типичной клинической симптоматики. Получить мокроту для анализа можно самостоятельно во время кашля или при использовании медицинской манипуляции (бронхоскопии).

Основная цель проведения описываемого исследования – уточнение диагноза. При обычных обстоятельствах мокрота не выделяется. Бокаловидные клетки реснитчатого эпителия секретируют от 10 до 100 мл жидкости, которая проглатывается человеком.

Прогрессирование патологического процесса в бронхах или легких ведет к изменению активности работы соответствующих структур с нарастанием кашля, одышки, боли в груди. Увеличивается количество жидкой фракции слизи, может присоединяться бактериальная микрофлора. Результат – выделение мокроты с кашлем.

Исходя из предполагаемого диагноза и результатов визуальной оценки секрета бронхиальных желез, врач назначает соответствующий тип исследования. Применение разных вариантов анализа мокроты позволяет оценить физико-химические свойства жидкости, цитологические изменения (присутствие раковых клеток), наличие бактериальной инвазии.

Исследование мокроты может проводиться как невооруженным глазом, так и с помощью специализируемого оборудования.

В зависимости от заболевания, которое подозревает врач, могут использоваться следующие типы диагностики:

• Общий анализ мокроты. Врач оценивает физические характеристики слизи, которая появляется после кашля;
• Цитологическое (микроскопическое) исследование. Для проведения соответствующей диагностики доктору требуется микроскоп. С помощью увеличения изображения осуществляется анализ жидкости. Методика позволяет увидеть наличие патологических клеток, которые появляются при определенных заболеваниях;
• Химическое исследование. Оцениваются изменения, происходящие в метаболизме альвеолоцитов и реснитчатого эпителия бронхов;
• Бактериологический метод или бакпосев мокроты. Суть исследования базируется на высевании бактерий, полученных из содержимого дыхательных путей на питательной среде. Рост колоний подтверждает наличие возбудителя в респираторном тракте. Важным преимуществом посева остается возможность проверки чувствительности бактерий к конкретным противомикробным препаратам в лабораторных условиях.

В тяжелых случаях для своевременной диагностики патологии респираторной системы пациента одновременно назначаются все три варианта исследования. На основе полученных результатов проводится подбор соответствующей терапии.

Факт! Общий или макроскопический анализ позволяет оценить мокроту сразу же после ее получения. Указанный вариант исследования используется врачами сотни лет. Еще до изобретения микроскопа и современных анализаторов врачи ставили диагнозы по внешнему виду отхаркиваемой жидкости.

Ниже будут описаны ключевые аспекты, на которые врач обращает внимание во время диагностики.

Суточное количество выделяемой слизи колеблется от 50-100 мл до 1,5 л в зависимости от базовой патологии, которая нарушает нормальный процесс секреции бокаловидных клеток. Респираторные заболевания по типу бронхита или пневмонии сопровождаются выделением до 200 мл жидкости (суточное количество).

Резкое возрастание указанного показателя происходит при скоплении гноя или крови с дальнейшим выходом через природные пути. Бронхоэктатическая болезнь, дренированный абсцесс, гангрена легкого протекают с выделением до 1,5 л жидкости.

В зависимости от характера жидкости, которая отхаркивается во время кашля, пульмонологи выделяют следующие типы мокроты:

• Слизистая. Благоприятный вариант развития событий. Болезни, при которых встречается – бронхиальная астма, хронический бронхит, трахеит;
• Слизисто-гнойная. Дополнительно присоединяется бактериальная инфекция. Кроме кашля и слизи, выделяется жидкость, которая является собой продукты жизнедеятельности микроорганизмов и «переваренные» иммунными клетками бактерии. Болезни – абсцесс легкого, бактериальные пневмонии, гангрена;
• Гнойная. Причины возникновения те же, что и в предыдущем случае. Отличие – больший процент гноя и продуктов распада тканей. Состояние пациента ухудшается;
• Кровянистая. При попадании отдельных эритроцитов или порций крови в жидкость, отхаркиваемой во время кашля, она приобретает характерный цвет. Симптом свидетельствует о повреждении сосудов. Возможные причины – рак, травма, инфаркт легкого, актиномикоз.

Оценка характера жидких выделений при кашле способствует пониманию патологического процесса, который развивается в дыхательной системе пациента и подбору адекватного лечения.

Цветовая палитра мокроты, выделяемой во время кашля, зависит от ее характера.

Возможные комбинации:

1. Слизистая – сероватая или прозрачная;
2. Слизисто-гнойная – серая с желтыми или гнойными вкраплениями;
3. Гнойная – жидкость может быть темно-желтой, зеленой или коричневой;
4. Кровянистая – различные оттенки красного. Важно помнить, что «ржавый» цвет указывает на наличие видоизмененных эритроцитов. При повреждении сосуда кровь алая или розовая (в зависимости от интенсивности кровопотери).

Мокрота в 75% случаев не имеет характерного запаха. Исключением остается выделение гнойного содержимого. Отмершие частички тканей обуславливают гнилостный запах. При прорыве кисты легкого, в которой развивался эхинококк (гельминт) возникает фруктовый аромат.

Слизь, выделяемая при кашле преимущественно гомогенна.

Разделение мокроты на слои характерно для следующих патологий:

• Абсцесс легкого. В указанном случае формируется 2 слоя – серозный и гнилостный;
• Гангрена легкого. В данном случае дополнительно образуется третий (верхний) пенистый слой, который обусловлен жизнедеятельностью соответствующих микроорганизмов, продуцирующих пузырьки газа.

Визуальная оценка слизи позволяет быстро установить диагноз без проведения вспомогательных анализов.

Примеси в мокроте представлены эритроцитами, гноем или серозной жидкостью. Присутствие описанных включений позволяет врачу оценить степень поражения легочной ткани и понять, какой патологический процесс является первичным для конкретного клинического случая.

Химический анализ жидкости, выделяемой во время кашля, позволяет определить выраженность патологического процесса. В зависимости от результатов исследования врач подбирает соответствующие лекарства, направленные на стабилизацию функции реснитчатого эпителия.

В норме рН мокроты составляет от 7 до 11. Прогрессирование процессов распада легочной ткани ведет к окислению соответствующей реакции (показатель ниже 6). Причина изменения значения рН базируется на нарушениях процессов обмена солей и минералов.

Белок всегда присутствует в выделяемой при кашле жидкости. Норма – до 0,3%. Незначительное повышение соответствующей цифры до 1-2% может указывать на прогрессирование туберкулеза. Существенное возрастание показателя (10-20%) – признак развития крупозной пневмонии. Лабораторное исследование слизи с определением белка позволяет дифференцировать указанные патологии на фоне анализа клинической картины (кашель, одышка, боль в груди) и результатов других диагностических процедур.

Желчные пигменты

Желчные пигменты, а точнее, микрочастички холестерина выделяются со слизью во время кашля при следующих патологиях:

1. абсцесс;
2. образование эхинококковой кисты;
3. злокачественные опухоли респираторного тракта.

Микроскопический анализ мокроты позволяет с помощью соответствующего оптического аппарата выявить наличие клеток или микроорганизмов, которые в норме не должны присутствовать в выделяемой с кашлем слизи.

Эпителиальные клетки

Эпителий в мокроте – вариант нормы. При микроскопическом исследовании внимание обращается на резкое увеличение концентрации клеток или образование эпителиальных цилиндров. Указанная картина свидетельствует о повреждении дыхательных путей и внутренней оболочки.

Альвеолярные макрофаги

Функция альвеолярных макрофагов – обеспечение локальной иммунной защиты. Небольшое количество клеток может присутствовать в слизи. Резкое возрастание концентрации макрофагов свидетельствует о хроническом воспалительном процессе (бронхит, бронхоэктатическая болезнь, астма, трахеит).

Появление лейкоцитов свидетельствует о наличии острого воспаления, которое может возникать на фоне бактериальной инфекции. Возможные патологии – абсцесс, пневмония, бронхоэктатическая болезнь.

Кровяные тельца появляются в мокроте при разрыве мелких или больших сосудов. О характере кровотечения врач судит по количеству эритроцитов. Отдельно стоит выделить появление видоизмененных клеток, которые проникают сквозь расширенные стенки сосудов без разрыва последних. Типичный пример заболевания – крупозная пневмония.

Опухолевые клетки

Атипичные клетки в мокроте – признак развивающегося онкологического процесса. Для уточнения локализации и типа патологии требуется проведение дополнительных анализов.

Эластические волокна

Появление эластичных волокон в выделяемой при кашле слизи – признак серьезного поражения легких с распадом тканей. Примеры заболеваний – гангрена, поздняя стадия бронхоэктатической болезни, туберкулез и рак, сопровождающийся деструкцией паренхимы органа.

Микробиологический анализ мокроты – один из важных методов верификации наличия туберкулеза. Возбудитель болезни – микобактерия (палочка Коха).

Определение наличия микроорганизма возможно с помощью бактериоскопического метода при использовании микроскопа. Для визуализации возбудителя нужно окрасить исследуемый материал по Цилю-Нильсену. Если в мокроте после кашля обнаруживается палочка Коха, фтизиатр должен в документации указать БК (+), что свидетельствует о выделении возбудителя. Такие больные требуют изоляции. БК (-) – пациент не распространяет бактерию.

Факт! Анализ мокроты на туберкулез проводится также посредством посева исследуемой жидкости на питательную среду. Плюсом методики остается 100% точность. Если бактерия присутствует в организме, она вырастет и в лабораторных условиях. Основной минус описанной диагностики – длительность получения результатов анализа (иногда больше месяца).

Бактериологическое исследование при воспалительном поражении респираторного тракта, как правило, используется для верификации внебольничных форм инфекции (пневмония, актиномикоз и тому подобное).

Анализ проводится в три этапа:

1. забор мокроты для исследования;
2. посев жидкости на предварительно подготовленную питательную среду;
3. пересев необходимой колонии с изучением химических и физических характеристик возбудителя.

При необходимости установления восприимчивости к противомикробным средствам дополнительно выполняется проба на чувствительность. В чашку Петри, где выросла колония микроорганизмов, помещаются бумажные кружки, обработанные антибиотиками. Те препараты, вокруг которых зона разрушения колонии максимальная, рекомендуются к применению конкретному пациенту.

Сбор мокроты на общий анализ может назначаться практически при любом заболевании, которое сопровождается отхаркиванием после кашля. Однако соответствующая диагностика редко применяется при сезонных вирусных инфекциях из-за ненадобности. В указанных случаях кашель и другие симптомы регрессирует при обильном питье и соблюдении постельного режима.

Патологии, требующие проведения анализа мокроты:

• туберкулез;
• абсцесс легкого;
• злокачественные новообразования;
• гангрена легкого;
• бронхиальная астма;
• хронический бронхит;
• пневмокониозы – профессиональные заболевания бронхолегочной системы.

Подтверждение диагноза осуществляется с помощью лабораторных, физикальных, а также инструментальных методов.

Подготовка пациента к сбору мокроты для анализа – ответственный процесс, от которого может зависеть качество диагностики. При игнорировании простых правил в слизи появляются дополнительные примеси, мешающие лаборанту установить первопричину кашля и респираторной патологии в целом.

Рекомендации:

• Подготовка емкости. Оптимальными остаются контейнеры, продаваемые в аптеках. В случае отсутствия такого флакона подойдет даже полулитровая банка или небольшой пластиковый бак (не больше 1 л). Однако нужно учесть, что такие емкости крайне неудобны и могут использоваться только в нетипичных обстоятельствах, когда нет доступа к нормальным контейнерам;
• За два часа до исследования необходимо почистить зубы и прополоскать ротовую полость. Удаление частичек пищи и слюны способствует повышению точности диагностики;
• Проконсультироваться с врачом. Доктор подробно объяснит, как правильно собрать мокроту на анализ.

Если человек впервые сдает бронхиальную слизь, тогда ему часто требуется несколько попыток для правильного выполнения процедуры.

Кроме описанных выше нюансов подготовки, правила сбора мокроты предусматривают использование утренней порции слизи. Причина – скопление секрета с ночи, что существенно облегчает отхаркивание после кашля. Можно брать бронхиальную слизь и в другое время дня, однако, количество и качество исследуемого материала снижается.

Алгоритм сбора мокроты на общий анализ:

1. глубокий вдох с задержкой воздуха на 10 секунд;
2. плавный выдох;
3. повторные 2 вдоха;
4. на третьем выдохе воздух необходимо с силой выталкивать из груди, после чего нужно откашляться;
5. поднести контейнер к нижней губе и сплюнуть слизь.

Указанный алгоритм позволяет собрать необходимое количество исследуемого материала (2-5 мл). При возникновении трудностей рекомендуется наклониться вперед, лечь на бок. Для ускорения отхождения слизи дополнительно можно сделать увлажняющую ингаляцию паром или с применением отхаркивающего средства.

Сбор мокроты описанным способом не исключает попадания слюны в исследуемый образец во время кашля. Альтернативой указанному алгоритму действия остается забор секрета дыхательных путей во время бронхоскопии. Врач с помощью эндоскопа исследует состояние реснитчатого эпителия и может взять необходимое количество жидкости для соответствующего анализа.

Домашний сбор мокроты проводится аналогично описанной выше методике. Важно после попадания слизи в контейнер после кашля плотно закрыть емкость и быстро доставить в лабораторию. В противном случае информативность исследования снижается.

В норме расшифровкой анализа мокроты занимается пульмонолог или фтизиатр. Ниже представлена таблица, в которой указаны характеристики выделяемой после кашля слизи при отсутствии патологии.

После изучения мокроты лаборант заполняет соответствующую форму (нажми, чтобы увеличить).

Указанный документ может выглядеть немного по-другому. Все зависит от конкретной лаборатории. Ниже представлены варианты бланков исследования с предполагаемыми диагнозами.

Расшифровка: розовый цвет слизистой мокроты в сочетании с присутствием микобактерий туберкулеза (МТ+) указывает на наличие соответствующей патологии.

Расшифровка: учитывая наличие лейкоцитов, слизисто-гнойную консистенцию и большое количество кокковой флоры, наиболее вероятным диагнозом остается хронический бактериальный бронхит.

Расшифровка: в первую очередь внимание нужно обратить на большое количество мокроты (50 мл). В сочетании с изобилием лейкоцитов, которые покрывают все поле зрения микроскопа, и присутствием эластичных волокон можно судить о наличии абсцесса, который прорвался в бронх.

Для того чтобы расшифровывать анализ мокроты и подобрать адекватную терапию от кашля рекомендуется консультация пульмонолога или фтизиатра. Участковый терапевт и семейный врач также могут справиться с простыми вариантами респираторной патологии.

Кашель – проблема, которая часто протекает на фоне отхаркивания слизи. Анализ мокроты – простой и эффективный метод уточнения предполагаемого диагноза. Самостоятельно соответствующее исследование не гарантирует полноценной оценки функционирования респираторной системы пациента, но в сочетании с базовыми процедурами упрощает выбор адекватного лечения для конкретного больного.

источник