Меню Рубрики

Что такое ифа в туберкулезе

Туберкулез уже давно вышел за рамки медицинской и стал настоящей социальной проблемой.

Какой бы ни был социальный статус или материальное состояние человека (ведь зачастую туберкулез ассоциируется именно с нищетой), страховки от этого заболевания ему не даст никто.

Как известно, передается туберкулез воздушно-капельным путем.

Попадая в организм, микробактерии M. Tuberculosis, являющиеся в 92 % случаев возбудителями заболевания у человека, оседают в нижних отделах легких, однако это не означает автоматическое инфицирование и болезнь.

Активно размножатся микробы начинают при сильном ослаблении иммунитета. Именно тогда и начинается развитие этого серьёзного заболевания.

Инфекцией могут быть поражены не только легкие, но и кости, органы мочеполовой, нервной и лимфатической систем, кожа, суставы и даже глаза.

Эффективность лечения этого недуга напрямую зависит от срока, на котором была диагностирована болезнь.

Есть несколько различных методик диагностики туберкулеза, однако мы остановимся только на одной из них – методе иммуноферментного анализа, который более известен, как ИФА.

Иммуноферментный анализ крови на туберкулёз является одним из наиболее распространённых методов диагностики заболевания, протекающего во внелегочной форме.

Именно на последних словах стоит сделать особенное ударение, поскольку довольно часто результаты других обследований на туберкулез являются ложноотрицательными из-за того, что болезнь не локализуется в легких, а поражает другие органы и системы.

Этот анализ на туберкулез помогает выявить следы инфекции в организме, однако его результаты не являются достаточными показаниями для того, чтобы диагностировать у пациента туберкулез в активной форме.

Для полного подтверждения диагноза, кроме ИФА на туберкулез, необходимо пройти другие обследования, такие, как ПЦР или микроскопия бактериальных культур.

ИФА позволяет выявить в крови человека антитела, которые вырабатываются в ответ на инфицирование организма микробактериями M. Tuberculosis.

Антигены для M. Tuberculosis являются специфическими, поэтому вероятность ложного результата в связи с инфицированием организма другими возбудителями практически нулевая.

Одним из главных показаний, по которым врач может направить больного на сдачу иммуноферментного анализа на туберкулез, является присутствие у человека симптомов данного заболевания на фоне отрицательных результатов ПЦР, рентгенологического исследования и микроскопии.

Если на протяжении длительного периода у пациента наблюдается повышение температуры тела, кашель, головные боли, слабость, сильная потеря веса, утомляемость, это может стать тревожным звоночком и поводом пройти дополнительное обследование.

Кроме того, анализ крови на туберкулез необходим в таких случаях:

  • При длительном контакте пациента с болеющими туберкулезом людьми, а также пациентам, которые по долгу своей службы обязаны контактировать людьми, входящими в группу риска (лица, употребляющие наркотики или пребывающие в местах лишения свободы, бездомные).
  • При безуспешном лечении таких заболеваний мочеполовой системы, как цистит, пиелонефрирт, хронический простатит, воспаление эндометрия (если лечение не дает результатов, это может указывать, что поражена туберкулезом именно мочеполовая система).
  • При анемии или лейкоцитозе.
  • Для диагностики заболевания у лиц, которые страдают от иммунодефицита (ВИЧ-инфицированные, онкобольные).
  • ИФА на туберкулез может быть назначен уже в процессе лечения болезни, чтобы посмотреть на эффективность лечения. Однако в этом случае увеличение антител на фоне приёма лекарственных препаратов считается нормальным явлением.

Направляют на ИФА и детей, которые, в силу неокрепшего иммунитета, более подвержены заболеванию.

Можно сдавать анализ на туберкулез вместо Манту, особенно когда у ребенка имеются аллергические заболевания, способные вызвать ложную реакцию после проведения вышеуказанной пробы.

Также широко известно, что реакция при проведении Манту может оказаться ложной, если у ребенка есть какие-либо хронические заболевания.

В некоторых случаях врач может направить на анализ крови после положительного результата Манту. Тогда анализ используется для подтверждения диагноза.

Одним из главных преимуществ данного вида скрининга для детей является его удобность, ведь даже при заболевании, протекающем в легких, сделать микроскопическое исследование посева мокроты у детей довольно проблематично.

Как и любое другое обследование, анализ крови на туберкулез имеет свои особенности, которые необходимо учитывать при его прохождении.

Прежде всего, отметим, что анализ покажет правильный результат после того, как в организме будет выработано достаточное количество антител.

То есть на ранних сроках заболевания ИФА на туберкулез может быть ложноотрицательным, и при сохранении симптомов, указывающих на туберкулез, его необходимо повторить через 2-7 недель, когда в крови будет выработано достаточно антител.

Вместе с тем, возможность того, что анализ оказался ложноположительным, исключена из-за отсутствия взаимовлияния с другими видами микробактерий.

ИФА на туберкулез используется как дополнительное обследование для диагностики заболевания, и результаты анализа не могут стать основанием для постановления диагноза.

Тест является нечувствительным к БЦЖ-вакцинации.

Для проведения ИФА на туберкулез берется кровь с вены.

Перед сдачей анализа стоит помнить о нескольких несложных правилах, необходимых для того, чтобы результаты теста были верными:

  1. Перед сдачей анализа нужно исключить употребление антибиотиков, поскольку они могут искажать результат.
  2. После употребления пищи должно пройти минимум 5 часов, а ещё лучше – чтобы анализ проводился утром на голодный желудок.
  3. За несколько дней до проведения диагностики необходимо отказаться от алкоголя и жирной пищи. Курить перед сдачей анализа так же нежелательно.

Обычно узнать результат анализа на туберкулез можно уже через несколько часов после их сдачи. Если, по результатам анализа, коэффициент позитивности составляет 0 – 0,79, это говорит об отсутствии активной формы этого серьезного заболевания.

Положительный результат ИФА свидетельствует не только о том, что организм поражен активной формой туберкулеза разной локации.

Антитела в сыворотке крови могут остаться после лечения туберкулеза, а также свидетельствовать о тубинфицированности (наличии микробактерий в организме на фоне отсутствия симптомов заболевания).

Анализ крови является достаточно надежным методом диагностики сложного инфекционного заболевания.

Чувствительность тест-системы варьируется от 61 % (при туберкулезе лимфатической системы) до 100 % (при туберкулезном экссудативном плеврите).

С помощью данного скрининга можно обнаружить наличие инфекции, которая локализуется в любом внелегочном органе или системе.

источник

Многие интересуются тем, как берется и делается анализ крови на туберкулез. Данная процедура довольно распространена. Это современный ответ прежним типам диагностики заболевания. Но какими бывают анализы крови? Что за особенности они включают в себя? И как гражданин по результатам должен понять, есть ли у него заболевание, или нет? Разобраться во всем этом не так трудно, как кажется. Не нужно иметь медицинское образование, чтобы по готовым результатам сделать вывод. Так какими знаниями должен обладать гражданин в отношении анализов на туберкулез?

Для начала разберем, о какой болезни идет речь? Дело все в том, что туберкулез — это тяжелое хроническое заболевание, крайне опасное и заразное. Передается воздушно-капельным путем или через бытовые приборы. Оно весьма распространено в мире, но на начальных стадиях туберкулез довольно трудно выявить.

Данное заболевание способно поразить все человеческие органы. Поэтому нельзя точно предсказать, каким будет исход. Чтобы вовремя распознать болезнь, требуется провести комплекс исследований. Например, сделать анализ крови на туберкулез.

Самым распространенным типом болезни является тот, что поражает легкие. Именно с ним у многих складывается ассоциация. Довольно часто проявление болезни можно спутать с обычной простудой. Туберкулез сам по себе никак серьезно не проявляется. Особенно на начальных этапах развития.

Многие интересуются, как называется анализ крови на туберкулез. Знать это важно. Ведь при своевременном лечении заболевание отступает, и человек не сталкивается с серьезными негативными последствиями болезни. Важно знать, что на данный момент в мире есть несколько типов диагностики.

Какие именно? Можно выделить следующие:

  • реакция Манту;
  • анализ мокроты;
  • бронхоскопия;
  • ИФА;
  • QuantiFERON-TB Gold;
  • IGRA;
  • ПЦР.

В некоторых случаях проводится общий анализ крови. Обычно это делается на начальных этапах, чтобы выявить вероятность наличия заболевания. А подтверждение происходит только посредством указанных ранее методов. Сейчас придумали еще один способ, который заменяет анализ крови на туберкулез — диаскинтест. Он не контактирует с кровью, но помогает при этом обнаружить туберкулезную палочку в организме человека. Он имеет ряд своих преимуществ и недостатков. В России был введен в 2016 году.

Теперь немного об анализах крови. Ведь именно они считаются наиболее информативными. Чаще всего под данным термином подразумевают ИФА-исследование. Такой анализ крови на туберкулез позволяет выявить наличие антител к туберкулезным палочкам.

В принципе, не самый худший вариант. Все, что должен сделать пациент, — это сдать кровь на анализ. Обычно берут венозную, она предоставляет более точный результат. К сожалению, сейчас принято считать ИФА не слишком информативным. Ведь по данному исследованию нельзя будет сказать, на какой стадии находится заболевание, если оно имеется. Зато подобная процедура помогает, как уже было сказано, выявить наличие антител к заболеванию в организме.

К счастью, медицина не стоит на месте и существуют иные способы выявления недуга. Причем, связанные с кровью. Какие плюсы и минусы у них есть? Как они проводятся? Каким образом можно понять, что человек болен?

Куда более информативным и эффективным является анализ крови ПЦР на туберкулез. Это современный способ, который позволяет определить наличие туберкулезной палочки. Крайне информативен, если на исследование берется не кровь, а мокрота.

Как правило, ПЦР-диагностика назначается при подозрительных симптомах, которые чем-то напоминают туберкулез. Тем не менее, как говорят врачи, данное исследование в случае с кровью не дает 100% результата. Он возможен только тогда, когда пациент болен туберкулезным сепсисом. В противном случае ПЦР-диагностика крови не имеет высокой результативности.

На что еще следует обратить внимание? Анализ крови при туберкулезе у детей, как правило, не проводится. Чаще всего им назначают так называемую реакцию Манту. Данная технология позволяет с высокой, но не 100% точностью выявить наличие заболевания.

Как проводится анализ? Ребенку подкожным методом вводят специальный препарат. Далее несколько дней нужно наблюдать за местом укола. Если туберкулеза нет, то данная область останется без изменений. Можно заметить лишь небольшую припухлость и изменение цвета кожи — она станет более розовой.

При наличии туберкулеза место укола отекает, опухает, опухоль начинает разрастаться. Иногда может приобретать синюшный цвет. В данной ситуации ребенку повторно назначают Манту. Либо делается анализ крови на туберкулез (ИФА или ПЦР), который подтверждает или опровергает результат пробы.

Тем не менее следует обратить внимание на то, что реакция Манту — это далеко не самый лучший способ диагностики туберкулеза в организме. Дело все в том, что данный анализ нередко ошибается.

Как еще можно интерпретировать полученный анализ? Расшифровка положительной реакции Манту проста. Она может наблюдаться при:

  • обострении обычных хронических заболеваний;
  • астме;
  • аллергии;
  • инфекционных болезнях;
  • ослабленном иммунитете;
  • эпилепсии.

Соответственно, даже положительный результат пробы не дает точных указаний на наличие болезни. Поэтому анализ крови на туберкулез вместо Манту оказывается более эффективным и информативным. Нужно исключить все ранее перечисленные варианты развития событий. Только тогда можно будет судить о наличии заболевания.

Если Манту оказалась положительной, не следует поднимать панику. Уже было сказано, что данный способ диагностики не самый лучший. Нужно сдать анализ крови. При туберкулезе легких (и не только) происходят некоторые изменения в организме. Какие именно?

Дело все в том, что на начальных стадиях кровь остается без изменений. Поэтому общий или клинический анализ не имеет смысла. В зависимости от «запущенности» болезни, будут меняться те или иные показатели. Общий анализ крови при туберкулезе иногда действительно помогает удостовериться в наличии или отсутствии заболевания.

Тем не менее только на него полагаться не стоит. Ведь кровь и ее состав меняются, в зависимости от множества факторов. Поэтому рекомендуется либо ИФА-диагностика, либо ПЦР. Но и об общем анализе крови тоже не следует забывать.

На какие показатели нужно обратить внимание, если есть вероятность туберкулезного заражения? При активной стадии заболевания общий анализ крови действительно поможет понять, что в крови находится возбудитель.

Как именно? Основополагающей является СОЭ. В норме у человека данный показатель будет зависеть от возраста. Следует опираться на следующие данные:

  • дети до 10 лет — до 10 мм/ч;
  • женщины до 50 лет — до 20 мм/ч;
  • женщины после 50 — до 30 мм/ч;
  • мужчины до 50 лет — 15 мм/ч максимум;
  • после 50 — до 20 мм/ч.

Тем не менее СОЭ у беременных и больных людей может повышаться. При туберкулезе, как правило, данный показатель возрастает приблизительно до 50 единиц и больше. Поэтому следует обратить внимание на него. Если скорость оседания эритроцитов в крови превосходит значительно норму, можно сделать вывод о высокой вероятности заражения.

Какие особенности нужно учитывать, если решено провести дополнительное исследование на наличие изучаемого заболевания? Анализ крови на туберкулез вместо Манту назначается довольно часто. Но при этом ИФА и ПЦР часто не достаточно для окончательной постановки диагноза. Общий анализ крови тоже не полностью показывает картину происходящего в организме.

Следует обратить внимание на то, что врач при подозрениях на наличие туберкулезной палочки в организме назначает биохимический анализ крови. Также можно сделать отдельно исследование на наличие белка. Это позволит удостовериться в результатах.

Если туберкулез есть, но только в неактивной форме, то показатель белка окажется в переделах нормы. Острая форма заболевания повышает холестерин, мочевину и лизоцим. При этом альбумин окажется пониженным.

Заболевание, которое поражает печень, увеличивает такие показатели, как АСТ, АЛТ и билирубин. Все это выявляется по анализу крови, в то время как реакция Манту не дает подобной информации. Этот факт нужно учитывать.

Теперь понятно, что если есть какие-то опасения по поводу наличия изучаемого заболевания в организме, можно сдать анализ крови на туберкулез. Также дополнительно назначается биохимия и общее исследование. Все это помогает комплексно оценить ситуацию и сделать вывод о наличии болезни в организме.

Тем не менее сейчас многие говорят о новом типе диагностики туберкулеза, который позволяет не контактировать реагенту с кровью. Речь идет об упомянутом ранее диаскинтесте. Это замена Манту. Стоит ли верить данному исследованию? Какие плюсы и минусы у него есть?

Данный способ диагностики позволяет не контактировать с кровью — это уже было подчеркнуто неоднократно. А значит, при ослабленном организме нет вероятности заражения болезнью. Для пациента диаскинтест напоминает Манту. Исследование требуется проводить ежегодно. Обычно раз в 12 месяцев для людей от 8 до 17 лет.

Правда, многие указывают на то, что данный тип проверки организма на наличие туберкулеза не отличается точностью. Все это из-за того, что, как и при реакции Манту, некоторые факторы могут дать ложноположительный результат. И человеку назначат либо повторное исследование, либо анализ крови на туберкулез.

Теперь понятно, как можно выявить наличие изучаемого заболевания при помощи тех или иных анализов. QuantiFERON-TB Gold и IGRA — это редко встречающиеся на практике методики исследования крови. Собой представляют скриннинги, которые указывают на содержание антител и наличие болезни. В России практически не применяются.

Можно заметить, что даже общий и биохимический анализы крови помогут выявить туберкулез в том или ином случае. Достаточно обратить внимание на некоторые показатели. Они будут нарушены. СОЭ при туберкулезе обязательно повышается. Вообще, только врач может на основании нескольких исследований сделать точное заключение. Для подтверждения диагноза можно брать на анализ не кровь, а мокроту.

источник

Своевременная диагностика туберкулеза производится с задействованием множества различных способов и методов. Это заболевание вносит изменения во весь организм, и потому для него характерны некоторые отклонения в составе различных материалов для исследования, в том числе и в крови. Анализы на туберкулез, выполняемые по крови, наиболее информативные и эффективные в связи с тем, что помогают установить не только наличие либо отсутствие заболевания, но и выяснить, какой возбудитель его вызвал. В данном материале будет рассказано о том, что такое ИФА на туберкулез и для чего он проводится.

ИФА расшифровывается как иммуноферментный анализ, он проводится по венозной крови. Этот метод лабораторных исследований считается одним из наиболее точных среди применяемых для диагностики туберкулеза. Это универсальное и максимально информативное исследование, которое может применяться при любых заболеваниях, вызываемых конкретными возбудителями, вне зависимости от того, грибки это, бактерии или вирусы. Связано это с принципом, на котором основано исследование.

Известно, что при попадании в организм того или иного возбудителя – грибка, бактерии или вируса – иммунитет расценивает его как чужеродный организм, с которым необходимо бороться. Для этого в организме в течение нескольких дней, а иногда и недель, вырабатываются антитела для борьбы с возбудителем. Естественно, что они поступают и в кровь. Иммуноферментный анализ крови проводится для того, чтобы определить, имеются ли в крови такие специфические иммунные антитела, ведь если имеются они, значит, имеется и возбудитель, для борьбы с которым они возникли.

Как раз на этом свойстве иммунитета и основан принцип действия прививок. Под кожу вводится минимальное количество возбудителя и формируется иммунитет.

Как уже было сказано выше – туберкулез является инфекционным заболеванием, а значит, у него имеется определенный возбудитель. Этот возбудитель ничем не отличается от других аналогичных и при попадании в организм он вызывает ответную реакцию иммунитета. То есть соответствующие специфические антитела начинают активно вырабатываться. Обычно, при заражении большим количеством возбудителя, уже через несколько недель в крови антител концентрируется достаточно для того, чтобы определить их методом ИФА.

Однако, в случае, если пациент контактировал с зараженным разово или заболевание протекает в скрытой неострой форме, заражение произошло небольшим количеством возбудителя, то антитела могут нарабатываться в малом количестве и медленно. В этом случае поставить диагноз методом ИФА может быть сложно. Обычно, дополнительно назначаются и другие исследования в этом случае.

В целом же данный метод информативный и эффективный. К тому же он очень точен при диагностировании отрытых форм туберкулеза.

Отличительной чертой исследования методом ИФА на туберкулез является то, что такой способ вовсе не имеет противопоказаний (на сегодняшний день их не выявлено). В частности, такой анализ можно проводить тем пациентам, у которых есть противопоказания к проведению кожных проб, и реакцию Манту им осуществить нельзя.

Относительным противопоказанием может быть перенесение в период предполагаемой сдачи воспалительного или инфекционного заболевания других органов и систем. Это связано с тем, что наличие в крови большого количества антител другого типа может затруднить диагностику и, потенциально, сделать ее менее точной. Но, в зависимости от метода проведения анализа, иногда удается избежать и этого.

Таким образом, вопрос о противопоказаниях к проведению процедуры должен решаться в индивидуальном порядке с лечащим врачом.

Данный метод имеет множество разнообразных преимуществ. Основные из них таковы:

  1. Высокая точность и информативность метода;
  2. Возможность проводить его при наличии противопоказаний к другим анализам и способам диагностики;
  3. Отсутствие ошибочно положительного результата (хотя ошибочно отрицательный может быть, хотя и крайне редко);
  4. Более объективная оценка результатов, чем при осмотре и измерении кожных проб, вроде Манту;
  5. Не имеет осложнений, побочных действий;
  6. Не имеет противопоказаний – может проводиться после вирусной инфекции или после вакцинации;
  7. Никак не связан с аллергическими реакциями, то есть, результат у аллергика и не аллергика будет одинаково точным и эффективным (в отличие от кожных проб).

Время получения результата почти такое же, как при проведении кожных проб, а в некоторых случаях и еще быстрее.

Несмотря на все свои преимущества, анализ ИФА имеет и ряд недостатков. Наиболее значимые из них таковы:

  1. Достаточно высокая стоимость исследования и относительная сложность его проведения в лабораторных условиях;
  2. Существует возможность получения ложноотрицательного результата, при полной невозможности ложноположительного;
  3. Ложноположительный результат возможен лишь в одном случае – когда есть инфицирование другими микотическими бактериями нетуберкулезного характера;
  4. Это исследование, из-за своей высокой сложности, проводится не во всех медицинских учреждениях, и даже не во всех городах.

Некоторые недостатки, перечисленные выше, характерны для любого теста для диагностики туберкулеза. В частности, ложноположительный результат при заражении другими микотическими бактериями нетуберкулезного характера, характерен также для пробы Манту и Диаскинтеста.

Перед тем, как сдать кровь на анализ ИФА на туберкулез, пациентку необходимо пройти небольшую подготовку. Четкое следование рекомендациям по подготовке приведет к тому, что результат исследования станет более точным и объективным. Итак, перед исследованием такого типа рекомендуется:

  • Не есть в течение 12 часов – тест проводится натощак;
  • Не курить перед исследованием так долго, как возможно, и категорически запрещено курить в течение получаса перед сдачей;
  • В течение суток накануне теста не желательно пить много воды;
  • В некоторых случаях нужно отменить прием некоторых лекарственных препаратов хотя бы за неделю до исследования, но это решается с врачом индивидуально в каждом конкретном случае.

Проводить исследование нужно в утреннее время, лучше до 12 часов.

Как проводится такой тест на туберкулез? Для проведения исследования используется венозная кровь. То есть, она забирается из вены правой или левой руки. В зависимости от методики, которой работает данная лаборатория, может забираться тот или иной объем пробы, в одну пробирку или в несколько. После этого пациент может уходить, а кровь отправляется в лабораторию, где она исследуется под микроскопом. В ходе лабораторного исследования рассматривается, как проба реагирует на внесение возбудителя, а также с помощью микроскопа разыскиваются уже известные антитела к возбудителю.

Что же может показать данный тест? Результатов может быть только два – положительный или отрицательный. Положительный результат означает, что антитела к возбудителю туберкулеза в крови обнаружены были, то есть в организме присутствует возбудитель туберкулеза, человек болен. При отрицательном результате антител в крови обнаружить не удалось, а значит, возбудителя в организме нет, и человек не инфицирован.

В крайне редких случаях может иметь место сомнительный результат, когда антитела единичны, но все же присутствуют. Это может говорить о самом начале и болезни и том, что иммунная система только начала еще вырабатывать антитела. Кроме того, как было написано выше, всегда есть вероятность ложноположительного или ложноотрицательного результаты.

Такое исследование обязательно необходимо проводить в случае, если его назначил врач. Однако оценивать его результат можно только в комплексе с другими методами диагностики. В частности, при прохождении медицинской комиссии перед поступлением ребенка в детский сад или школу, при прохождении исследования для получения медицинской книжки, результаты данного теста не считаются гарантией отсутствия туберкулеза. С медицинско-юридической точки зрения гарантией отсутствия в организме туберкулеза является отрицательная проба Манту и отсутствие изменений на флюорографии пациента.

Исследование достаточно дорогостоящие и цена его может отличаться в зависимости от класса и уровня медицинского учреждения, а также от города и региона в котором оно расположено. Для облегчения ориентации в ценовой политике лабораторий ниже приведена таблица со стоимостью данного исследования в различных городах.

Город Медицинское учреждение или лаборатория Стоимость
Москва Клиника Современной Медицины 7400 рублей
Санкт-Петербург Группа клиник Дезир 5530 рублей
Екатеринбург Медицинский центр Парацельс От 1620 рублей

Такая разница в ценах может отличаться также составом оказываемых услуг. Например, в некоторых лабораториях отдельно указывают стоимость процедур забора и исследования пробы крови.

Это довольно информативный, хотя и способный давать ложный результат, метод. Он незаменим тем пациентам, которые имеют противопоказания к проведению стандартных проб. Однако ставить диагноз по одному только результату данного исследования нельзя.

источник

ИФА анализ — что это такое, расшифровка иммуноферментного анализа крови на паразитов, сифилис, ВИЧ, туберкулез. Норма в таблице, результаты

Благодаря развитию современной медицины, врачу при постановке диагноза больше не нужно ориентироваться на косвенные проявления заболеваний или проводить многоступенчатые лабораторные исследования. Достаточно провести один анализ, который подтвердит или опровергнет предполагаемый первоначальный диагноз.

Таким методом является иммуноферментный анализ (ИФА) — это исследование позволяет обнаружить специфические антитела и антигенны свойственные при разнообразных патологиях, что во многом ускоряет установку диагноза.

ИФА анализ — это такое лабораторное исследование (метод), которое помогает определить присутствие или отсутствие определённых антител в организме для борьбы с вирусом и их количество.

Основой исследования является естественная реакция антиген (вредоносный организму объект) – антитело (белок уничтожающий вредоносные объекты), позволяющая выявить присутствие разнообразных вирусов, бактерий.

ИФА представляет собой естественный иммунный ответ организма – взаимодействие антитела с соответствующим антигеном. Так во время ИФА в пробирку с материалом добавляются поочередно антигены или антитела, после чего происходит выявление концентрации получившихся комплексов антиген-антитело.

Если совпадения образовались, то возникают иммунные комплексы, далее происходит ферментная реакция красящего вещества с объединённой молекулой. Именно благодаря изменению цвета в ходе ферментативной индикации происходит идентификация заболевания после исследования уровня определяемого соединения.

Иммуноглобулины человека дифференцируются на несколько классов, отличающихся друг от друга свойствами, структурой и антигенными особенностями тяжелых цепей (Н-цепи). У всех млекопитающих, в том числе и человека, выделяют пять Н-цепей, которые и определяют принадлежность иммуноглобулинов к соответствующему классу: G, М, A, D, Е.

Каждый класс отличается друг от друга биологическими свойствами, и способностями связывать антигены, и скоростью и прочностью связи с молекулой.

Функции каждых иммуноглобулинов (lg) различны:

Кол-во в организме Функции Период полураспада (дней) Значение
G 70% Формируют пассивный иммунитет у новорожденного;

необходимы для иммунного ответа

улучшают фагоцитоз,

21-24 обеспечивают длительный гуморальный иммунитет при инфекционных заболеваниях
М 5-10% нужны для активации фагоцитоза,

способны связать 5 молекул антигена,

5 Обеспечивает первичную иммунную реакцию
А 10-15 Нейтрализуют токсины и вирусы

нужны для формирования раннего иммунитета

Образование местного иммунитета

4-5 Защита слизистых оболочек
Е 0,2% вызывают аллергию и анафилаксию активируют тканевые базофилы 2 Защита от паразитов
D 0,2% задействованы в выработке лимфоцитов, необходим как мембранный рецептор для антигенов; 3 Их роль малоизучена

Возникновение иммуноглобулинов происходит по своеобразной «цепочке» — lgM lgG, именно так реагирует организм на появление в организме антигена. Во время лабораторной диагностики проводится оценка концентрации трех основных иммуноглобулинов – G, M, A.

ИФА-анализ с каждым годом становится все более популярным.

Такое исследование ускоряет постановку диагноза, а это очень важно для терапии таких патологий как:

  • вирусный гепатит;
  • ВИЧ-инфекция;
  • цитомегаловирус,
  • вирус Эпштейна-Барр,
  • вирус герпеса,
  • корь
  • краснуха,
  • туберкулез,
  • сальмонеллёз,
  • дизентерия,
  • клещевой энцефалит,
  • бактерии хеликобактер,
  • боррелиоз,
  • столбняк,
  • сифилис,
  • дифтерия,
  • лептоспироз,
  • хламидиоза,
  • уреаплазмоз,
  • микоплазмоз,
  • коклюш.

Так же анализ позволяет определить инфицирование паразитами:

  • плоскими червями
  • аскаридами
  • гистолическими амебами,
  • печеночными тремадами,
  • лямблиями,
  • токсоплазмами,
  • трихинеллами,
  • двуусткой,
  • цестодозами.

ИФА является своеобразным маркером аутоиммунных патологий и злокачественных новообразований.

При подготовке к исследованию следует придерживаться таких правил:

  • за сутки до забора крови нельзя курить и употреблять алкоголь,
  • не заниматься спортом или другими физическими нагрузками,
  • стараться не допускать стрессов,

Перед тем как сдать ИФА анализ, нужно избегать стрессов.

  • прекратить употребление лекарственных средств не позже чем за 10 дней до манипуляции.
  • Так же врачи рекомендуют придерживаться специальной диеты – исключить жирную и жареную пищу, а если исследование проводится на гепатиты, то необходимо не употреблять любые оранжевые овощи и особенно цитрусовые. Сдавать кровь следует с утра на голодный желудок.

    Ложноположительным анализ бывает из-за невыполненных рекомендаций, особенно употребления жирной пищи, что приводит к слишком большой концентрации триглицеридов в плазме, из-за чего проводимость ИФА снижается.

    В качестве исследуемого материала может использоваться цельная кровь, сыворотка или плазма венозной крови. Забор материала, обычно проводится из локтевой вены, для этого применяется одноразовая игла и вакуумная пробирка, необходимо 5-10 мл крови.

    Для точности результата важно придерживаться правильной техники взятия пробы – прокол самого сосуда и окружающих тканей должен быть произведен одной манипуляцией, поэтому используется короткая игла с большим диаметром, благодаря чему не травмируется противоположная стенка вены и не повреждаются эритроциты.

    Так же для сохранения целостности эритроцитов, нужно чтобы кровь стекала по стенкам пробирки.

    Во время хранения материала следует избегать возможной его ионизации, кроме того материал не должен контактировать с остатками дезинфицирующих средств, поэтому используется только одноразовая пластиковая пробирка, с маркировкой ФИО пациента, датой и временем сдачи материала.

    Если необходимо непродолжительное хранение исследуемого материала, то используется холодильная камера с температурой 2-4 о С, если необходимо более продолжительное хранение, то материал замораживается при температуре -20 о С.

    После подготовки исследуемого материала врач-лаборант приступает к необходимым манипуляциям. Для этого используются ряд специальных наборов антигенов, обдающих свойством спровоцировать ответные реакции организма на раздражитель, это разнообразные инфекции, гормоны, аллергены.

    Схема ожидаемой реакции «антиген-антитело» выглядит приблизительно так:

    • Первичная реакция — определяемый Ig (Ab) и очищенный антиген возбудителя (Ag).
    • Для обнаружения получившихся иммунных комплексов далее следует новая иммунологическая реакция, где антигеном выступает связанный специфический Ig, а антителом для него выступает коньюгат- Ig (Ab).
    • Последний этап — ферментативная реакция, вместе с катализатором молекулой коньюгата. Субстратом выступает хромоген (не окрашенный), который в процессе протекания реакции окрашивается, и интенсивность цвета и определяется количественный показатель иммуноглобулина в пробе.

    В настоящий момент разработано множество разнообразных вариантов ИФА, четкая классификация их отсутствует. Обычно, методы рассматриваются исходя из разделения её на гетеро- и гомогенные — все фазы анализа происходят с применением твердой фазы или с использованием только раствора.

    Современные клинико-диагностические лаборатории обычно используют гетерогенный (твердофазный) ИФА, в нем под твердой фазой подразумевается абсорбция антигенов или антител на твердой поверхности специальных лунок, расположенных на полистироловом микропланшете, метод подразделяется на прямой и непрямой ИФА.

    При прямом ИФА, вносимый антиген закрепляет в период инкубационного процесса на поверхности пустых лунок, для этого исследуемые пробы материал помещают в чистые лунки на 20-25 минут, это нужно для прикрепления антигена к их поверхности. После этого происходит добавление необходимого антитела. Далее материал остается на определенное время для образования связей.

    Антитела всегда добавляют в избытке, поэтому даже при их наличии в пробе остаются не связанные антигены, а если антигенов нет совсем, то связей не будет. Чтобы удалить«лишние» антитела проводится декантация, после чего остаются только те антитела, которые создали связь с антигеном.

    После этого следует ферментативная реакции – добавление в лунки раствора с ферментом, после чего происходит окрашивание полученных связей.

    При непрямом методе ИФА используемые антитела, заранее соединенные с субстратом ферментативной реакции; в этом случае связь антител с антигеном происходит в период инкубационного процесса, после чего происходит мобилизация связей на поверхности лунок, а вносимый после конъюгат и субстратно-хромогенный реагент окрашивают реакцию.

    Таким образом, главным отличием непрямого от прямого метода является не приклеивание материала к поверхности чистых лунок, а связывание с антигеном, иммобилизованным на планшете.

    Останавливается протекание реакции с применением специализированных устройств, далее каждая лунка подвергается процессу фотометрирования, за которым следует сравнительная характеристика полученного результата с проведенными ранее контрольными пробами.

    Если обнаруживается повышение оптической плотности в пробе, то завышена и концентрация специфических антител в исследуемом результате.

    Проведение исследования не занимает много времени, от забора крови до получения результата проходит от 1 до 10 дней, в зависимости от диагностических мероприятий.

    На полученном пациентом бланке-результате диагностики указывается отрицательный либо положительный результат на определенные классы иммуноглобулинов, так же указывается количественный показатель различных классов антител.

    Возможны различные интерпретации результатов:

    1. IgM (+) (IgA, IgG не определялись) – процесс выздоровления;
    2. IgM (-) ;IgG (+), IgA (+) – хроническая инфекционная патология;
    3. IgM, IgG, IgA (все с – значением) – отсутствие защитных механизмов к инфекциям;
    4. IgG (+/-) и IgA (+/-), IgM (+) – острый процесс;
    5. IgM (-), IgA(-),IgG(+) – постинфекционный иммунитет;
    6. IgM, IgG, IgA (+) – хроническая патология в стадии обострения.

    Так, например, если были обнаружены IgG и IgM, то возможно у пациента одно из таких заболеваний:

    • вирусный гепатит;
    • цитомегаловирус;
    • герпес;
    • ветряная оспа;
    • хламидиозом;
    • стафилококковая или стрептококковая инфекция.

    Иммуноферментный анализ часто назначается при гормональных исследованиях, нормы показаны в таблице:

    Название гормона Пол Норма
    1 тиреоглобулин м/ж До 70 МЕ/мл
    2 тироксин м/ж 64-146 нмоль/л
    3 трийодтиронин м/ж 1,8-2,8 нмоль/л
    4 Свободный тироксин м/ж 11-25 пмоль/л
    5 Свободный трийодритонин м/ж 4,49-9,3 пмоль/л
    6 Тестостерон, дегидротестостерон Ж 0,5-10 мЕд/л

    ИФА анализ — это такое диагностическое исследование, которое позволяет оценить вероятность образования онкологических патологий. Однако интерпретация результатов проводится только лечащим врачом.

    ИФА подходит для выявления разнообразных форм половых инфекций, в том числе сифилиса, часто используется и для скрининга беременных.

    Благодаря этому исследованию можно узнать, как давно произошло заражение и стадия заболевания на момент исследования:

    • иммуноглобулины М говорят о длительности заболевания;
    • IgA — пациент заразился более 30 дней назад;
    • IgG обнаруживается на «пике» заболеваний, или же в тот момент, когда терапия окончилось недавно.

    В процессе исследования лунки на планшете с отрицательным показателем остаются бесцветные, а положительные окрашиваются в ярко-желтый цвет. Если цвет положительных лунок не совпадает с цветом контроля, то результат считается сомнительным и необходимо повторное исследование.

    Иммуноферментный анализ — это первая ступень в диагностике ВИЧ. Проводить анализ нельзя сразу же после предполагаемого заражения необходимо дождаться окончания инкубационного периода (от 14 дней до 6 месяцев).

    В ходе анализа определяются антитела к ВИЧ-1 и ВИЧ-2, происходит поиск АТ класса G, который обычно появляется на более поздних сроках и АТ класса А и М, они могут быть определены на ранних стадиях (во время инкубационного периода).

    При получении положительных проб далее следует:

    • если первый тест дал положительный результат, то кровь вновь перепроверяется другим лаборантом;
    • повторный положительный результат предполагает пересдачу материала,
    • при повторении результата, пациенту назначается иммуноблотинг.

    Окончательный вывод о наличии ВИЧ-инфекции выдается только после результата иммуноблотинга.

    ИФА также применяется в качестве диагностического исследования туберкулеза, но если у пациента даже и были выявлены антитела к данной патологии, то это не всегда подтверждает наличие у него туберкулеза, поэтому ИФА часто применяется качестве уточняющей методики, либо же для диагностики скрытой внелегочной формы.

    ИФА анализ — это такое исследование, позволяющее обнаружить у пациента заражения паразитами и простейшими, в ходе диагностики можно определить даже время заражения.

    Цитомегаловирус IgM обнаруживаются через 30-45 дней после заражения, либо во время реактивации инфекции в течение 4-6 месяцев