Исследование плевральной жидкости на туберкулез

Если у человека в плевральной полости находится жидкость в большом количестве, это свидетельствует о развитии в организме патологического процесса. Чтобы выявить нарушение, необходимо провести анализ выпота по нескольким направлениям. Ниже представлена информация о том, какие нарушения позволяет выявить исследование, как подготовиться к забору биоматериала и как расшифровать заключение, выданное в лаборатории.

Плевральная полость — это пространство небольшого размера, внешне напоминающее щель. Она расположена между грудной клеткой и легкими. Плевральная полость — это зона, играющая важнейшую роль в процессе дыхания. В ней происходит выработка небольшого количества жидкости, которая необходима для уменьшения показателя трения легких о грудную клетку с внутренней стороны.

В норме выделяется до 25 мл данной смазки. На фоне течения какого-либо патологического процесса усиливается выработка жидкости. За счет этого легкое не может полностью расправиться при вдохе.

Основное показание к назначению анализа — необъяснимое увеличение количества плевральной жидкости в сочетании с повышенной температурой тела, одышкой, болезненными ощущениями в области груди, кашлем и ознобом. На основании результатов исследования врач может судить о причине патологического состояния.

Скопление плевральной жидкости является следствием течения многих недугов. Основные причины образования выпота:

• Сердечная недостаточность застойного характера.
• Цирроз печени.
• Ателектаз.
• Нефротический синдром.
• Микседема.
• Слипчивая форма перикардита.
• Проникновение спинномозговой жидкости в плевру после травмы или хирургического вмешательства.
• Смещение венозного катетера (центрального).
• Дуроплевральная фистула.
• Пневмония.
• Туберкулез.
• Новообразования злокачественного характера.
• Закупорка тромбом легочной артерии.
• Системная красная волчанка.
• Ревматоидный плеврит.
• Панкреатит.
• Перфорация пищевода.
• Инфекция грибкового характера.
• Прорыв абсцесса легкого.
• Синдром Мейгса.
• Гиперстимуляция яичников при проведении ЭКО.
• Асбестоз.
• Тяжелая почечная недостаточность хронического характера.
• Саркоидоз.
• Патологии аутоиммунного характера.
• Абсцесс печени.

В процессе анализа плеврального выпота специалист может выявить вышеперечисленные заболевания даже на ранней стадии их развития.

Решение относительно целесообразности проведения пункции принимает лечащий врач на основании результатов диагностики. Если анализ плеврального выпота является необходимостью, специалисту необходимо подготовить пациента к предстоящей процедуре.

В первую очередь, врач направляет пациента на обследование, включающее:

При наличии у пациента выраженного кашля врач назначает ему прием медикаментозных средств.

Непосредственно перед процедурой медсестра измеряет у исследуемого пульс, давление. Кроме того, проводится клинический анализ крови. Если пациент находится без сознания, процедура осуществляется в палате стадионаре. В остальных случаях она осуществляется в манипуляционном кабинете.

Пункция плевральной жидкости — это серьезная процедура, которая требует от врача наличия определенных навыков.

• Пациент принимает положение сидя и упирается руками на спинку стула. Реже больной укладывается на кушетку и поворачивается на здоровый бок. При этом руку он должен завести за голову.
• Медсестра измеряет давление и пульс. За показателями она должна следить в течение всей процедуры. При выявлении отклонений ей необходимо известить об этом врача.
• Специалист изучает рентген-снимок, чтобы определить место прокола. При скоплении патологического выпота игла вводится в зоне 7-9 межреберья по подмышечной линии сзади. Если пациент находится в положении лежа, место прокола несколько смещается.
• Кожный покров вокруг необходимой зоны обкладывается одноразовыми стерильными пеленками. Затем место прокола обрабатывается спиртом или раствором йода.
• Врач проводит анестезию. Как правило, с целью обезболивания используется раствор новокаина. Игла вводится по верхней части нижележащего ребра. Это сводит риск повреждения кровеносных сосудов и нервных волокон до минимума. Раствор впрыскивается постепенно.
• Одноразовой стерильной иглой врач прокалывает плевру. Пациент в это время испытывает резкие болезненные ощущения. Плевральная жидкость поступает в шприц посредством потягивания поршня. При большом количестве выпота используется электроотсос. В подобных случаях игла заменяется на более толстую.
• После откачивания выпота врач вводит в плевральную полость противомикробный препарат.

Завершающим этапом является резкое извлечение иглы. Место прокола затем обрабатывается раствором йода или медицинским спиртом. После этого на него накладывается повязка или клеится пластырь.

Важно знать, что пункция сопряжена с определенным риском. При правильном проведении процедуры он минимален.

В редких случаях развиваются осложнения, требующие немедленного врачебного вмешательства (в том числе хирургического). К ним относятся:

• Повреждение легочной ткани, следствием чего является пневмоторакс.
• Прокалывание желудка, диафрагмы, печени или селезенки. Данные состояния мгновенно нарушают работу сердца и могут привести к его остановке.
• Нарушение целостности кровеносных сосудов.
• Инфицирование плевры или грудной клетки.
• Воздушная эмболия кровеносных сосудов головного мозга.
• Резкое уменьшение показателя артериального давления.

Если у пациента появляется кашель с кровью, он резко бледнеет, теряет сознание или у него появляются судороги, человека помещают в реанимационную палату.

Данный анализ плевральной жидкости подразумевает ее оценку по характеру, плотности, прозрачности и цвету.

Врачи разделяют выпот на 2 большие группы:

1. Транссудаты. Это жидкости невоспалительного характера.
2. Экссудаты. Это выпоты воспалительного характера. Они, в свою очередь, могут быть серозными, серозно-фибринозными, геморрагическими, хилезными, хилусподобными, псевдохилезными, холестериновыми, гнилостными.

Показатели цвета и прозрачности плевральной жидкости в легких напрямую зависят от ее характера. Серозные экссудаты и транссудаты, как правило, имеют светло-желтый оттенок. При этом они прозрачные. Другие виды экссудатов мутные и могут иметь различные цвета.

Плотность жидкости определяется урометром. У транссудатов показатель колеблется в пределах 1005-1015, у экссудатов — выше 1015.

В процессе анализа определяется содержание белка с помощью рефрактометра. Показатель измеряется в граммах на литр. Транссудаты содержат до 25 г/л, экссудаты — более 30 г/л.

С целью дифференцирования жидкостей проводится проба Ривальты. Суть метода заключается в подкислении дистиллированной воды с последующим добавлением в нее нескольких капель выпота. Экссудаты в процессе химической реакции образуют помутнение, напоминающее внешне белое облако. Его появление обусловлено наличием в жидкости серомуцина — вещества, которое свертывается при контакте с уксусной кислотой. Транссудаты подобным свойством не обладают, то есть они не образуют помутнения.

Это исследование плевральной жидкости, в процессе проведения которого оценивается клеточный состав выпота:

1. Жировые капли. Свойственны гнойным и хилезным экссудатам.
2. Кристаллы холестерина. Присутствуют в старых выпотах.
3. Злокачественные клетки.
4. Эритроциты и лейкоциты. В норме они присутствуют во всех жидкостях. Увеличенное количество эритроцитов и лейкоцитов может свидетельствовать о наличии гнойного и серозного экссудата.
5. Клетки мезотелия. Если они претерпели изменения и обнаруживаются в виде скоплений, это говорит о старом транссудате.

Анализ плевральной жидкости требует времени. В большинстве случаев пациент получает заключение спустя 3 рабочих дня после забора биоматериала. При этом сама процедура отнимает не более 30 минут.

В норме плевральный выпот прозрачный и не имеет цвета. Показатель рН жидкости составляет не менее 7,6 и не более 7,64. Содержание белка в выпоте не должно превышать 2 г/л. Количество лейкоцитов в норме не более 1000 мм 3 . Показатель глюкозы такой же, как и в крови. Уровень же ЛДГ в 2 раза меньше, чем в жидкой соединительной ткани.

Любые отклонения от нормы свидетельствуют о нарушениях:

• Красный цвет выпота — инфаркт легкого, асбестоз, травма, злокачественное новообразование, плевральный эндометриоз.
• Молочный или белый оттенок — метастазирование опухоли, лимфома.
• Черный цвет — организм инфицирован грибком аспергилус.
• Зеленоватый оттенок — наличие свища между желчным пузырем и плевральной полостью.
• Темно-красный или коричневый цвет — амебиаз, разрыв кисты печени.
• Вязкий выпот — эмпиема, мезотелиома.
• Показатель рН менее 6 говорит о повреждении пищевода.
• Уровень рН 7-7,2 — плеврит.
• Показатель рН 7,3 — эмпиема, опухоль, системная красная волчанка, туберкулез, нарушение целостности стенок пищевода. Кроме того, такой показатель нередко свидетельствует о плеврите ревматоидного характера.
• Высокий уровень ЛДГ (1000 единиц и более) — опухоль злокачественного характера, эмпиема, пневмония (как правило, на фоне СПИДа), парагонимоз.
• Показатель глюкозы менее 1,6 ммоль/л — ревматоидный плеврит. Реже — эмпиема.
• Уровень глюкозы от 1,6 до 2,7 ммоль/л — опухоль, разрыв пищевода, плеврит на фоне системной красной волчанки, туберкулез.
• Наличие молочной кислоты свидетельствует об активной жизнедеятельности бактерий.
• Присутствие амилазы в выпоте — панкреатит, нарушение целостности стенок пищевода, псевдокиста поджелудочной железы, некроз тонкого кишечника, язва пептического вида.
• Повышенный уровень нейтрофилов — эмпиема, заболевания инфекционного характера.
• Увеличение показателя эритроцитов — опухоли, травмы грудной клетки, легочный инфаркт.
• Лимфоциты более 85 % — туберкулез, саркоидоз, лимфома, ревматоидный плеврит хронического характера, хилоторакс, синдром желтых ногтей.
• Наличие аномальных клеток — метастазирование опухоли, мезотелиома, рак крови.
• Лимфоциты не менее 50 и не более 70 % — наличие злокачественного новообразования.
• Эозинофилы более 10 % — асбестоз, эмболия легочной артерии, болезни паразитарного или грибкового характера, опухоль.

Таким образом, с помощью анализа плевральной жидкости возможно выявить имеющуюся патологию на любой стадии ее развития.

Исследование выпота проводится как в государственных, так и коммерческих медицинских учреждениях. Но анализ осуществляется не во всех клиниках. Учреждение должно иметь оснащенную лабораторию, реактивы, а также высококвалифицированных работников. Относительно наличия данной услуги необходимо узнавать непосредственно в регистратуре.

Цена анализа плевральной жидкости зависит от региона и политики медицинского учреждения. Например, средняя стоимость исследования в Москве составляет 750 рублей. Необходимым оборудованием и реактивами в столице оснащены 23 лаборатории. Наименьшая цена в Москве — 550 рублей, самая высокая — 950 рублей.

Кроме того, важно учитывать стоимость забора биоматериала. Цена составляет, в среднем, 250 рублей. В частных учреждениях дополнительно оплачивается консультация врача. Стоимость первичного приема варьируется от 1000 до 2500 рублей.

В поликлинике по месту жительства анализ плевральной жидкости (при наличии данной услуги) проводится на бесплатной основе, необходимо только предъявить медицинский страховой полис.

Исследование выпота показано при резком увеличении его объема. С помощью анализа плевральной жидкости врач получает возможность выявить наличие патологического процесса даже на ранней стадии его развития. Исследование не подразумевает соблюдения строгих правил подготовки, все необходимые мероприятия врач и медсестра проводят непосредственно перед процедурой.

Пункция выпота сопряжена с возникновением у пациента болезненных ощущений. Для того, чтобы их минимизировать, врач вводит человеку раствор новокаина. После этого осуществляется забор биоматериала. Длительность процедуры составляет около получаса.

источник

Анализ плевральной жидкости необходимо производить по следующим направлениям: внешний вид, клеточный состав, биохимическое и бактериологическое исследование.

Прежде всего при оценке плеврального выпота следует установить, что представляет собой плевральная жидкость—экссудат или траассудат.

Транссудативный выпот возникает в результате нарушения капиллярного гидростатического или коллоидно-осмотического давления под влиянием системных факторов.

Увеличение капиллярного гидростатического давления наблюдается при застойной сердечной недостаточности.

Примером снижения онкотического давления плазмы служит такое гипопротеинемическое состояние, как цирроз печени. Оба этих процесса способствуют скоплению плевральной жидкости с низким содержанием белка.

В противоположность этому экссудативный выпот является результатом поражений плевральной поверхности, приводящих к повышению проницаемости капилляров или обструкции лимфатических сосудов. Повреждение плевральной поверхности возникает в результате инфекционного или опухолевого процесса и способствует образованию плевральной жидкости с высоким содержанием белка.

Выпот, концентрация белка в котором превышает 3 г/л, обычно называют экссудатом. В проведенных недавно исследованиях было отмечено, что концентрация белка, равная 3 г/л, принятая за пограничный уровень при диагностике экссудативного выпота, приводит к ошибкам более чем у 10% больных.

Получены данные, свидетельствующие, что более точная диагностика экссудативного выпота возможна при наличии следующих трех критериев: отношение концентраций белка в плевральной жидкости и в сыворотке крови превышает 0,5; отношение содержания ЛДГ в плевральной жидкости к в сыворотке крови превышает 0,6 и содержание ЛДГ в плевральной жидкости превышает 200 ME или 2/3 от нормального уровня сывороточной ЛДГ. При отсутствии указанных признаков выпот является транссудатом. Таким образом, считается, что перечисленные критерии позволяют провести наиболее точную дифференциацию экссудативных и транссудативных выпотов.

В табл. 132 приведен неполный список причин плеврального выпота, разделенных в зависимости от того, является ли выпот транссудатом или экссудатом. Очевидно, что при дифференциальной диагностике транссудативного выпота необходимо иметь в виду клинические состояния, обусловленные повышением капиллярного гидростатического давления или коллоидно-осмотического давления — другими словами, гипопротеинемией любой этиологии.

Причины экссудативного выпота более многообразны, и сузить круг возможных заболеваний помогают различные методы исследования.

Иногда имеет значение количество жидкости. Отмечают цвет, прозрачность, запах и наличие крови. Большинство экссудативных выпотов и все транссудативные выпоты прозрачны и имеют соломенную окраску. Жидкость молочно-белого цвета свидетельствует о хилотораксе или хилезном выпоте.

Гной говорит об эмпиеме. Зловонный выпот свидетельствует в пользу эмпиемы, вызванной анаэробными микроорганизмами. Очень вязкая жидкость геморрагического характера типична для злокачественной мезотелиомы.

Определение числа лейкоцитов и эритроцитов в плевральной жидкости иногда может оказать большую помощь в дифференциальной диагностике экссудативных плевральных выпотов. Интенсивные геморрагические выпоты нередко содержат более 10 х 10 11 клеток в 1 л.

Обычно подобные изменения возникают яри травме (гемоторакс), злокачественных новообразованиях и эмболии легочной артерии. Геморрагический характер жидкости придает наличие 5—10 х 10 9 эритроцитов в 1 л. Для придания плевральной жидкости кровянистой окраски достаточно добавления к ней 1 мл крови.

Следовательно, обнаружение в плевральном выпоте, имеющем геморрагическую окраску, менее 10 х 10 11 эритроцитов в 1 л по существу не оказывает никакой помощи в диагностике. Транссудативные выпоты редко бывают геморрагическими, поэтому обнаружение геморрагического выпота на фоне застойной сердечной недостаточности должно служить основанием для поиска другого диагноза, прежде всего эмболии легочной артерии, осложненной инфарктом легкого.

Ушиб при травме также сопровождается геморрагическим выпотом. Существуют два прикроватных теста, которые могут применяться для определения, действительно ли плевральная жидкость имеет геморрагический характер или это результат травматичной плевральной пункции.

Можно измерить величину гематокрита в плевральной жидкости и сравнить ее с гематокритом крови. Одинаковые значения гематокрита свидетельствуют в пользу травматичной пункции, однако то же самое может наблюдаться при торакальной травме и реже — при злокачественных новообразованиях.

Кроме этого, можно определить, свертывается ли плевральная жидкость. Жидкость, полученная при травматичной пункции, свертывается в течение нескольких минут, в то время как в крови, содержащейся в плевральном выпоте, дефибринация наблюдается через несколько часов или дней, и полноценный сгусток вообще не образуется.

Общее число лейкоцитов имеет меньшую диагностическую ценность, однако считается, что при транссудате в 1 л содержится менее 10 х 10 9 лейкоцитов/а при экссудате — более 10 х 10 9 . Лейкоцитарная формула информативна в двух случаях: нейтрофильный сдвиг (75%) свидетельствует о первичном воспалительном процессе; лимфоцитарный сдвиг (>50%) — о хроническом экссудативном выпоте (может быть обусловлен туберкулезом, уремическим или равматоидным плевритом) или о злокачественных новообразованиях, прежде всего лимфоме.

Причина превалирования в этих выпотах мононуклеарных клеток заключается в том, что больные с указанными заболеваниями обычно наблюдаются не на ранних стадиях острого инфекционного процесса. К моменту плевральной пункции острый нейтрофильный сдвиг сменяется мононуклеарным сдвигом.

Эозинофилия в плевральной жидкости (>10 х 10 7 эозинофилов в 1 л) обычно не оказывает помощи в постановке диагноза, однако, как оказалось, означает, что выпот вероятнее всего является осумкованным и будет иметь благоприятный исход. Кроме того, наличие эозинофилов делает диагноз туберкулеза маловероятным.

Эозинофилы могут обнаруживаться при попадании в плевральную полость воздуха или жидкости. Эозинофильный плевральный выпот встречается при инфаркте легкого, узелковом периартериите, а также при паразитарных и грибковых заболеваниях.

Как правило, содержание глюкозы в плевральной жидкости изменяется параллельно таковому в сыворотке крови. Низкое содержание глюкозы в плевральной жидкости сужает дифференциальную диагностику причин экссудативного выпота.

Известно шесть патологических процессов, приводящих к низкому содержанию глюкозы в плевральной жидкости: парапневмонический выпот, и в первую очередь эмпиема, при котором содержание глюкозы почти всегда низкое; ревматоидный плевральный выпот ( 160 ЕД. Сомоджи в 100 мл) в случаях сочетания плеврального выпота с панкреатитом. Кроме того, оно может быть высоким при разрыве пищевода и реже — при злокачественных опухолях, причем первичная опухоль нередко располагается вне поджелудочной железы.

В последние несколько лет большой интерес вызвало измерение рН плевральной жидкости. Значение рН менее 7,3 ограничивает дифференциальный диагноз эмпиемой, злокачественными опухолями, коллагенозами, разрывом пищевода и гемотораксом, а рН ниже 7,0 обнаруживается только при эмпиеме плевры, коллагенозах и разрыве пищевода.

Следовательно, низкое значение рН плевральной жидкости (

Очаговым образованием в легком называют рентгенологически определяемый единичный дефект округлой формы в проекции легочных полей. Края его могут быть гладкими или неровными, но они должны быть достаточно отчетливыми для того, чтобы определить контур дефекта и позволить измерить его диаметр в двух ил.

Анализ плевральной жидкости необходимо производить по следующим направлениям: внешний вид, клеточный состав, биохимическое и бактериологическое исследование. Прежде всего при оценке плеврального выпота следует установить, что представляет собой плевральная жидкость—экссудат или траассудат.

источник

Анализ плевральной жидкости на микобактерии туберкулеза

(информация для специалистов)

Анализ плевральной жидкости на микобактерии назначается в случае любого определенного физикально и подтвержденного рентгенологически скопления жидкости между листками плевры. Целью этого исследования является обнаружение кислотоустойчивой микобактерии туберкулеза.

Туберкулезный плеврит представляет собой воспалительную реакцию плевры, вызванную микобактерией туберкулеза, попавшей туда лимфогенным или гематогенным путем. Часто возникает у молодых людей и присоединяется к туберкулезу легких.

Выделяют 3 варианта течения туберкулезного плеврита:

— аллергический (возникает рано при свежем заражении или хроническом течении),

— перифокальный (часто сочетается с туберкулезом легких, имеет скудную симптоматику),

— туберкулез плевры (может быть как самостоятельным заболеванием, так и сочетаться с туберкулезом других органов).

Туберкулез является инфекционным заболеванием, которое вызывается Mycobacterium tuberculosis .

Заражение в основном происходит воздушно-капельным путем от больного человека (возможны также алиментарный, контактный и трансплацентарный пути, но они встречаются значительно реже).

В ответ на попадание возбудителя в организме начинает формироваться иммунный ответ. При снижении иммунитета проявляются признаки заболевания. Формируется очаг в легких, поражаются лимфатические узлы, микобактерии попадают в венозное русло и распространяются по организму.

Кроме того, распространению заболевания способствуют:

— проведение иммуносупрессивной терапии, прием глюкокортикостероидов

— наличие заболеваний, снижающих иммунитет, в том числе ВИЧ

— отказ от проведения вакцинации БЦЖ

— алкоголь, курение, употребление наркотиков и несоблюдение социально-гигиенических норм.

Туберкулез является социальным заболеванием, то есть его распространение на определенной территории зависит от социально-экономического развития (чем оно ниже, тем выше заболеваемость). В настоящее время в России определяется очень высокий уровень заражения туберкулезом, в том числе и детей. В связи с высокой устойчивостью возбудителя к антибиотикам, несвоевременным выявлением заболевших, а также повышением уровня недообследованных граждан из других стран повысился процент заболеваний социально-благополучных граждан. Этому также способствуют стрессы, переутомление, наличие хронических заболеваний.

Для профилактики заболевания обязательно ежегодное проведение флюорографического обследования взрослого населения, а кроме того рекомендовано проведение пробы Манту детям 1 раз в год.

Анализ плевральной жидкости на микобактерии туберкулеза производится с помощью бактериоскопического метода при окрашивании мазков по Цилю-Нильсену.

Суть метода основана на кислотоустойчивости микобактерий туберкулеза. При окрашивании выделяют несколько этапов. Сначала происходит проникновение карболового фуксина в клетку через мембрану. Затем все некислотоустойчивые структуры клетки обесцвечиваются серной кислотой и докрашиваются раствором метиленового синего. Таким образом, все клетки и структуры приобретают синий цвет, исключение составляет лишь кислотоустойчивая микобактерия туберкулеза, окрашенная в малиново-красный цвет.

Показания для проведения исследования:

— При положительной туберкулиновой пробе.

— При контакте с больным туберкулезом.

— При выявлении экссудата после общеклинического исследования плевральной жидкости для уточнения этиологии.

Подготовка пациента к проведению исследования :

Специализированная подготовка пациента не требуется.

В норме микобактерии туберкулеза в плевральной жидкости не обнаруживаются.

Обнаружение микобактерий достоверно говорит о туберкулезном поражении плевры. Однако определяются они в плевральной жидкости редко.

Анализ результатов может проводить только врач, принимая во внимание жалобы больного, клиническую картину заболевания, а также данные других лабораторных и инструментальных исследований.

источник

Исследование плевральной жидкости

Анализ мокроты

Цель занятия:изучить основные лабораторные методы диагностики заболеваний органов дыхания (исследование плевральной жидкости, исследование мокроты); научиться интерпретировать результаты этих исследований.

Практические навыки: уметь производить макроскопическое и микроскопическое исследования плевральной жидкости и мокроты; уметь интерпретировать результаты обследования.

Плевральная пункция

Плевральную пункцию производят для удаления жидкости из плевральной полости, определения характера выпотной жидкости с целью уточнения диагноза и введения в плевральную полость лекарственных веществ.

Проводят плевральную пункцию в VII-VIII межреберьях по верхнему краю ребра между задней подмышечной и лопаточной линиями (в месте наибольшей тупости). Перед пункцией проводят обработку манипуляционного поля йодом и спиртом, а затем местную анестезию. Прокол производят специальной иглой с надетой на нее резиновой трубкой с зажимом (для предупреждения попадания воздуха в плевральную полость). Шприцом, присоединенным к резиновой трубке, после снятия зажима производят извлечение плевральной жидкости.

При удалении значительного количества жидкости используют аппарат Потена. Первоначально удаляют не более 800-1200 мл жидкости, т. к. извлечение большого количества приводит к быстрому смещению органов средостения в большую сторону и может сопровождаться коллапсом.

По характеру выпотную жидкость разделяют на транссудат(невоспалительная жидкость) и экссудат (жидкость воспалительного характера).

Транссудат образуется:

• при заболеваниях сердца (недостаточность кровообращения по большому кругу, адгезивный перикардит);

• печени (циррозы, тромбоз воротной вены); почек (нефротический синдром различной этиологии);

• нарушении обмена электролитов, некоторых гормонов (альдостерона) и при других состояниях.

Экссудатсерозного и серозно-фибринозного характера наблюдается:

• при экссудативных плевритах туберкулезной или ревматической этиологии,

• серозно-гнойного или гнойного характера при бактериальном плеврите; гнилостный — из-за присоединения гнилостной флоры;

• геморрагический экссудат — при злокачественных новообразованиях и травматическом поражении плевры, инфаркте легкого, туберкулезе;

• хилезный — при затруднении лимфооттока через грудной проток вследствие сдавления опухолью, увеличенными лимфоузлами; 5.

• хилезоподобный — вследствие серозного воспаления и обильного клеточного распада с жировым перерождением.

Лабораторное исследование плевральной жидкости

Макроскопическое исследование плевральной жидкости (характер, цвет, прозрачность, запах, относительную плотность).

Характер плевральной жидкости определяется на основании консистенции, цвета, прозрачности, исследования относительной плотности, а также химического исследования содержания белка и клеточного состава.

Цвет: транссудат обычно бледно-желтого цвета; серозный экссудат — бледно- или золотисто-желтый; гнойный — серовато-желтый или желто-зеленый; геморрагический — розовый, темно-красный или бурый; гнилостный — бурый; хилезный и хилезоподобный экссудаты напоминают разбавленное молоко.

Прозрачность: транссудат и серозный экссудат всегда прозрачны или немного опалесцируют. Остальные экссудаты мутны, помутнение обусловлено обилием лейкоцитов (гнойный и серозно-гнойный экссудаты), эритроцитов (геморрагический экссудат), капелек жира (хилезный экссудат), клеточного детрита (хилезоподобный экссудат).

Запах обычно отсутствует. Неприятный, зловонный запах имеет только гнилостный экссудат, он обусловлен распадом белка под действием ферментов анаэробной флоры.

Относительная плотность определяется с помощью урометра, ареометра, отградуированного в пределах от 1.000 до 1,050. В узкий цилиндр наливают 50 мл жидкости. Урометр медленно погружают в жидкость, стараясь не замочить часть, оставшуюся над жидкостью. Показания снимают по верхнему мениску, если жидкость мутная, и по нижнему мениску, — если жидкость прозрачная.

У транссудатов относительная плотность колеблется от 1,005 до 1,015; у экссудатов относительная плотность выше 1,015.

Химическое исследование плевральной жидкости сводится к определению белка. В транссудате содержится 5-30 г/л белка, в экссудатах — более 30 г/л. Для отличия транссудатов от экссудатов предложена проба Ривальты: 100-200 мл дистиллированной воды в цилиндре подкисляют 2-3 каплями ледяной уксусной кислоты и добавляют по каплям исследуемую жидкость. Падающая капля образует помутнение в виде белого облачка, опускающегося до дна сосуда, если исследуемая жидкость — экссудат (вследствие свертывания серозомуцина под влиянием уксусной кислоты). Помутнение не образуется или оно бывает незначительным и быстро растворяется, если исследуемая жидкость — транссудат. Большое количество фибриногена (0,5-1,0 г/л) в экссудате обусловливает его способность к самопроизвольному свертыванию.

Микроскопическое исследование плевральной жидкости

Микроскопическое исследование производят после предварительного центрифугирования, при этом исследуют препараты в нативном виде (неокрашенные) под покровным стеклом и препараты, окрашенные по Романовскому — Гимзе. Среди клеточных элементов различают элементы крови (эритроциты, лейкоциты различных видов) и тканевые клетки (макрофаги, мезотелиальные клетки и др.).

Эритроциты имеются в плевральной жидкости в небольшом количестве (до 15 в поле зрения). Они попадают в жидкость вследствие прокола. В геморрагическом экссудате эритроцитов очень много, они обычно покрывают все поле зрения.

Лейкоциты в небольшом количестве (до 15-20 в поле зрения) содержатся всегда в транссудатах. В экссудатах, особенно гнойных, они встречаются в большом количестве, при этом определяются все виды лейкоцитов, содержащихся в крови.

Нейтрофилы обнаруживают в любых экссудатах, при благоприятном течении воспалительного процесса число их постепенно уменьшается, при неблагоприятном (развитие гнойного воспаления) — резко возрастает. В гнойных экссудатах они являются преобладающими клетками, причем встречаются различные их формы (неизмененные и дегенеративные). При благоприятном течении количество дегенеративных форм уменьшается, увеличивается число активных нейтрофилов.

Лимфоциты имеются в транссудатах в небольшом количестве (до 10-15 в поле зрения) и в каждом экссудате. В серозных экссудатах в разгар заболевания они превалируют в цитологической картине, составляя до 80-90% всех лейкоцитов. Большое количество лимфоцитов содержится также в хилезных экссудатах.

Эозинофилы могут встречаться в серозных, геморрагических экссудатах различной этиологии (ревматические, туберкулезные, посттравматические в стадии рассасывания и др.). При эозинофильных плевритах количество эозинофилов составляет до 30-80% всех клеточных элементов.

Макрофаги обнаруживаются при гнойных, геморрагических экссудатах.

Мезотелий (покровный эпителий) обнаруживается в транссудатах большой давности при заболеваниях почек и сердца и может превалировать над другими элементами, кроме того клетки мезотелия в небольшом количестве можно обнаружить в начальной стадии и в период резорбции экссудатов, а в значительном количестве они иногда встречаются при опухолях, особенно канцероматозе серозных оболочек.

Плазматические клетки могут определяться в значительном количестве при затяжных воспалительных процессах в серозном или гнойном экссудате, а также в период рассасывания раневого геморрагического экссудата.

Полибласты — тканевые клетки различной величины встречаются в гнойных экссудатах.

Клетки злокачественных опухолей обнаруживаются при канцероматозе плевры вследствие первичного (при мезотелиоме) или вторичного (прорастание из соседних и метастазирование из удаленных органов, лимфогрануломатоз) поражения. Цитологическая диагностика рака основывается на обнаружении конгломератов атипичных (злокачественных) клеток.

Жироперерожденные клетки появляются в хилезоподобных экссудатах.

Жировые капли встречаются в большом количестве в хилезных экссудатах, наблюдаются также при хроническом воспалении серозных оболочек, сопровождающемся обильным клеточным распадом с жировым перерождением (хилезоподобный экссудат).

Кристаллы жирных кислот, гематоидина встречаются при гнойных и гнилостных экссудатах.

Кристаллы холестерина появляются при холестериновых экссудатах, которые наблюдаются довольно редко при застарелых осумеованных выпотах плевральной полости, чаще туберкулезной этиологии. Иногда в небольшом количестве встречаются в гнойных экссудатах.

Дата добавления: 2016-11-02 ; просмотров: 5519 | Нарушение авторских прав

источник

Бактериоскопическое исследование плевральной жидкости включает в себя окраску мазков по Цилю-Нильсену. Появление в плевральной жидкости туберкулёзных палочек — наиболее достоверный признак туберкулёза плевры. Микобактерии при туберкулёзных плевритах обнаруживают в экссудате сравнительно редко. При подозрении на туберкулёзный процесс в плевре, но при отрицательном бактериоскопическом исследовании необходимо бактериологическое исследование плевральной жидкости на микобактерии туберкулёза.

Обнаружение в жидкости из перикарда туберкулёзных палочек — наиболее достоверный признак туберкулёза перикарда. Туберкулёзные микобактерии при туберкулёзных перикардитах обнаруживаются в экссудате сравнительно редко.

Бактериоскопическое исследование плевральной жидкости и жидкости в перикарде – это достаточно простой, но эффективный метод определения туберкулезных, а также анаэробных либо аэробных бактерий с помощью микроскопов разных модификаций. Как и любое другое исследование жидкостей серозных полостей, бактериоскопическое исследование плевральной жидкости и жидкости в перикарде помогает решать такие задачи:

• Определение основного возбудителя патологии;
• Исключение определенной группы микобактерий;
• Оценка степени инфицирования бактериями той или иной серозной среды.

Кроме того, бактериоскопия имеет порой решающее значение для диагностики серьезных патологий, когда в материале пункции (именно так получают материал для анализов), экссудате перикарда или плевральном, находят гонококки, пневмококки и другие бактерии этого вида, анаэробные микроорганизмы, бациллы туберкулеза. Своевременное определение вида возбудителя заболевания помогает уточнить причину, поставить более точный диагноз, а значит, и начать эффективное лечение.

Бактериоскопическое исследование плевральной жидкости и жидкости в перикарде проводится по методу окраски материала – мазков либо осадка жидкостей. В бактериоскопии плеврального материала, также для исследований жидкости перикарда часто используют способ окраски по методике Циля-Нильсена. Этот метод называют прямым, поскольку он не требует доведения материала до однородной консистенции (гомогенизации) и любой другой обработки. Бактериоскопическое исследование плевральной жидкости и жидкости в перикарде как микроскопия материала существует уже более века. Бактериоскопия позволяет выявить достаточно быстро практически все виды аэробных бактерий (микроорганизмов, которые размножаются только при наличии кислорода), а также тех, которые погибают на воздухе – анаэробных.

Также, бактериоскопические анализы определяют все кислотоустойчивые микроорганизмы – микобактерии, их еще для краткости обозначают аббревиатурой – КУБ (кислотоустойчивые бактерии).

[1], [2], [3], [4], [5], [6]

источник

А. И. Каграманов, Н. А. Шмелев, Е. Д. Тимашева, О. П Архипова

По внешнему виду различают следующие типы экссудата, наиболее часто встречающиеся у туберкулезных больных при экссудативном плеврите: серозный, серозно-геморрагический, серозно-гнойный, гнойный, хилезный.

Наиболее ценным исследованием в экссудате является подсчет клеточной формулы жидкости, которая дает представление об их содержании в том или ином экссудате. Подсчет клеточной формулы особенно ценно иметь при повторных анализах, иначе может ускользнуть направление изменений, например, возрастание нейтрофилов в лимфоцитарном, серозном экссудате или увеличение лимфоцитов в жидкости эозинофильного характера.

Для характеристики клеток Н. А. Шмелев и Э. Л. Вольфсон предлагают пользоваться тремя видами окраски: витальной, оксидазной и азур-эозиновой. Наиболее простой из них является окраска по способу Романовского азур-эозиновой смесью. Приготовленная краска наливается на фиксированный мазок на 6-8 минут, но не более. Затем препарат смывается водой и высушивается на воздухе. Процентное соотношение отдельных видов клеточных элементов вычисляется из подсчета 200 клеток.

Мазки из экссудата приготовляют по следующей методике: доставленная прозрачная жидкость центрифугируется (из мутных и тем более гнойных жидкостей препарат готовится без центрифугирования); после центрифугирования жидкость из пробирки быстро сливается и из осадка приготовляются мазки. Затем мазки высушивают на воздухе, фиксируют в метиловом спирту в течение 3-5 минут и окрашивают по Романовскому.

Н. А. Шмелев предлагает для исследования экссудатов пользоваться витальным способом окраски. Этот метод позволяет наиболее быстро и полноценно исследовать клетки в полостных жидкостях. Его преимущество перед техникой фиксированного мазка заключается, во-первых, в быстроте приготовления препарата, так как не нужно фиксировать и красить мазок; во-вторых, в большей сохранности клеток; в-третьих, витально окрашенный препарат позволяет лучше дифференцировать группу клеток с круглыми ядрами и базофильной протоплазмой.

По цитологической картине различают несколько типов плевральных жидкостей:

1. эозинофильный и эозинофильно-лимфоцитарный,
2. лимфоцитарно-эритроцитарный скудноклеточный; лимфоцитарный; лимфоцитарно-нейтрофильный,
3. нейтрофильно-серозный и гнойный,
4. мононуклеарно-моноцитарный, макрофаговый, мезотелиальный.

Эозинофильный экссудат наблюдается при туберкулёзных плевритах, особенно при пневмоплевритах. Эозинофилы могут являться преобладающим родом клеток в экссудатах. Однако в некоторых случаях эозинофилы бывают представлены в несколько меньшем проценте (10-20%). Остальные клетки составляют лимфоциты. Экссудат в этих случаях становится эозинофильно-лимфоцитарным. Наряду с эозинофилами и лимфоцитами, в них бывают представлены и гистиоциты, иногда базофильные нейтрофилы.

Эозинофильный экссудат образуется вскоре после наложения лечебного пневмоторакса, особенно после пережигания спаек. По клинической картине такой экссудат характеризуется благоприятным течением, склонен к быстрому исчезновению и не является препятствием к продолжению как искусственного пневмоторакса, так и таких вмешательств, как торакокаустика.

Лимфоцитарный тип экссудата представляет собой наиболее известную картину туберкулезной жидкости. В нем можно выделить несколько подтипов. В одних случаях острый период образования жидкости в плевре нередко сопровождается почти полным отсутствием клеток. При исследовании осадка после длительного центрифугирования можно обнаружить единичные эритроциты и лимфоциты.

В других случаях экссудат с самого начала богат клетками и состоит не только из лимфоцитов, но и других клеточных элементов — эозинофилов, моноцитов, гистиоцитов и нейтрофилов, т.е. наблюдается полиморфная картина. Этот тип экссудата Н. А. Шмелев описывает под названием лимфоцитарно-эозинофильного.

Лимфоцитарный экссудат, как скудноклеточный, так и обильно содержащий клетки, встречается и в остром периоде туберкулезных плевритов и пневмоплевритов, и в холодном. Третий подтип лимфоцитарного экссудата (лимфоцитарно-нейтрофильный) характеризуется значительной примесью нейтрофилов. Он является неблагоприятным по своему клиническому значению и представляет переход к следующей группе.

Нейтрофильный тип экссудата может быть как серозным, так и гнойным. Серозный выпот, содержащий нейтрофилы, представляет собой начальную фазу нагноения, это — микрогнойный экссудат. Рассасывание нейтрофильных экссудатов при пневмоплевритах, по наблюдениям Н. А. Шмелева, является большой редкостью, при поддержании же пневмоторакса нейтрофильный серозный экссудат переходит в макроскопически гнойный.

Гнойный экссудат по своему характеру бывает исключительно нейтрофилиным. Он отличается от серозно-гнойного выпота тем, что все нейтрофилы в гнойном экссудате находятся в состоянии дегенерации и значительной деструкции.

Мононуклеарный тип экссудатов состоит из моноцитов, гистиоцитов и клеток мезотелия. Моноцитов в экссудате может быть только выражением бистро преходящей фазы в течении экссудативного процесса. Он наблюдается при высыпании бугорков в плевре. При исследовании экссудата моноциты обнаруживаются в значительном количестве и располагаются обычно группами.

Макрофаговая реакция наблюдается главным образом при таких осложнениях, как кровоизлияние в плевральную полость, а также в незначительной степени при гнойных экссудатах туберкулезного характера. Мезотелиальные клетки обнаруживаются обычно наряду с макрофагами. Большое количество их наблюдается, однако, не при туберкулезе, а при таких заболеваниях, как новообразование.

Помимо цитологического исследования, экссудат подвергается также и бактериоскопическому исследованию на туберкулезные микобактерии. Для обнаружения туберкулезных микобактерий серозный экссудат длительно центрифугируется, затем верхний слой сливается, из осадка делают мазки и подвергают микроскопированию.

При отрицательных бактериоскопических результатах следует прибегать к исследованию экссудата методом флотации. Последний флотируется также, как и мокрота, при количествах от нескольких капель до 15-20 мл.

источник

Оценка анализа N-ПЦР при диагностике плеврального туберкулеза: обнаружение M.tuberculosis в плевральной жидкости и мокроте, собранной в тандеме

Задуманные и разработанные эксперименты: ПК HKP. Выполнены эксперименты: ПК DSC VMK. Проанализированы данные: ПК MKS DSC VMK HKP. Используемые реагенты / материалы / инструменты анализа: MKS DSC VMK SS HKP. Написал бумагу: ПК HKP.

Неспецифическое клиническое проявление и paucibacillary характер туберкулезного плеврита остается проблемой для диагностики. Диагностика туберкулезного плеврального выпота зависит от проявления наличия туберкулезных бацилл в мокроте, плевральной жидкости или плевральной биопсии или демонстрации гранулемы в плевре путем гистологического исследования. Мы изучили клиническую полезность диагностики плеврального туберкулеза с использованием анализа N-ПЦР в домашних условиях, микроскопии мазка и культивирования АФБ. Помимо плевральной жидкости было изучено включение мокроты в эффективность диагностики плеврального туберкулеза.

Образцы плевральной жидкости и мокроты из 58 туберкулезных и 42 негрубистых пациентов с плевральным выпотом были обработаны для микроскопии мазка AFB, культуры и анализа N-ПЦР. Микобактерии были обнаружены исключительно в туберкулезных образцах плевральной эффузии. Ни один из образцов, не являющихся туберкулезными плевральными выпотами, был положительным для микобактерий. Сравнительный анализ показал, что анализ Н-ПЦР имел наивысшую чувствительность. Включение мокроты вместе с плевральной жидкостью увеличило чувствительность N-ПЦР от 51,7 до 70,6% (p 3 г / дл) и плевральной жидкости: соотношение сывороточного белка (> 0,5); и (4) реакция пациентов на противотуберкулезное лечение. Туберкулезный плевральный выпот был диагностирован, если был определен окончательный критерий или все наводящие критерии. Исходя из этих критериев, 58 пациентов были классифицированы как пациенты с туберкулезным плевральным выпотом. Слюна, а также плевральная жидкость были собраны у всех из них и исследованы [6] — [7].

Критерии, используемые для злокачественного плеврального выпота (контроль), были: (i) клиническая история, указывающая на быстрое наполнение плеврального выпота; с очаговым злокачественным поражением или без него в другом месте тела. (ii) Плевральная жидкость является экссудативной, обычно геморрагической и (iii) на цитологическом исследовании положительным для злокачественных клеток. Исходя из этих критериев, 42 пациента были классифицированы как не туберкулезные плевральные выпоты (N-TPE). В двенадцати из этих пациентов мокрота была собрана в дополнение к плевральной жидкости.

Все клинические образцы были обработаны в установке Biosafty level 3 (BSL-3). После сбора образцы транспортировали при 4-8 ° С и выдерживали при этой температуре в установке до тех пор, пока они не были обработаны для выделения и экстракции ДНК. Все образцы обрабатывали в течение 24 часов после сбора свежеприготовленными реагентами. Только 2-3 клинических образца обрабатывались одновременно, чтобы свести к минимуму перекрестное загрязнение образцов обученным персоналом.

100 образцов плевральной жидкости были обработаны методом NALC-NaOH [12]. Короче говоря, плевральную жидкость центрифугировали при 4500 g в течение 15 мин. Осадок обрабатывали равным объемом N-ацетил-L-цистеина-NaOH (конечная концентрация NALC-NaOH, NaOH, 2%) в течение 15 мин при комнатной температуре и нейтрализовали стерильным фосфатным буфером (0,067 М, рН 6,8). После центрифугирования при 4500 г в течение 15 мин осадок ресуспендировали в 1 мл стерильной дистиллированной воды [13]. Суспензия была разделена на две части. Одна часть была использована для микроскопии мазка AFB и в качестве инокулятов для выделения AFB культурой на средах Lowenstein Jensen и 7H9 или в трубах MGIT (система BD BACTEC MGIT 960). Вторая часть была использована для экстракции ДНК. Слишком обработана мокрота, собранная у 70 пациентов.

Быстрое окрашивание кислоты Ziehl-Neelsen использовалось для подтверждения присутствия AFB.

Как описано, обработанные клинические образцы (плевральная жидкость и мокрота), полученные из 69 пациентов с плевральным выпотом, инокулировали на средах LJ и жидкой средой 7H9 и инкубировали при 37 ° C в течение 8 недель. LJ-уклоны проверяли два раза в неделю на видимые колонии и подвергали скринингу на AFB окрашиванием ZN. Жидкую среду исследовали в одинаковые моменты времени для роста. Трубы, демонстрирующие видимый рост, подвергали скринингу для AFB окрашиванием ZN. Положительные жидкие культуры были субкультивированы на средах LJ для выделения микобактерий. После доступа к автоматизированной системе концентрированные клинические образцы (0,5 мл), полученные от 31 пациента с плевральным выпотом, инокулировали в среду MGIT, содержащую смесь антибиотиков PANTA в соответствии с рекомендациями производителей и постоянно контролируемую в системе MGIT 960 (BD BACTEC ™ MGIT ™ 960 система для тестирования микобактерий, США).

Идентификация уровня изолятов проводилась стандартными биохимическими испытаниями (производство ниацина, восстановление нитратов, активность каталазы и арилсульфатазы, гидролиз Твин, чувствительность гидразида тиопена-2-карбоновой кислоты и т. Д.), Как рекомендовано Центрами по контролю и профилактике заболеваний (CDC), Атланта, штат Джорджия, с соответствующими контролями [14]. Для этой части исследования использовались микобактериальные колонии, полученные из среды LJ.

Колонии Mtb H37Rv & Mbo AN5, суспендированные в 100 мкл 0,1% тритона Х-100, кипятили в сухом бане (90 ° С в течение 40 минут), центрифугировали (10000 г, в течение 10 мин) и супернатант аликвотировали и хранили при -20oC. Супернатант использовали в качестве ДНК-мишени в ПЦР-анализе. Mtb H37Rv & Mbo AN5 штаммы были получены от Национального института JALMA для лечения проказы и других микобактериальных заболеваний (ICMR), Агра, Индия. Кроме того, в качестве контроля использовались также культуры Mtb. ДНК Mycobacterium tuberculosis H37Rv, полученная из «Материалов исследования туберкулеза и тестирования вакцин».

Шаблон ДНК из клинических образцов :. Вторую порцию суспензии, полученной из обработанных клинических образцов, центрифугировали. Осадок суспендировали в 100 мкл 0,1% тритона Х-100 и кипятили в сухом бане (90 ° С в течение 40 минут). Суспензию центрифугировали и обрабатывали, как описано для экстракции ДНК для ДНК контрольного шаблона.

Детали анализа были описаны ранее [10]. Праймеры N (5′-GAGGGTTGGGATGAACAAAGCAG-3 ‘) и S (5′-TATCCGTGTGTCTTGACCTATTTG-3′) использовали для амплификации гена hupB. Усиленный продукт ПЦР N-S использовали в качестве матрицы для N-ПЦР. Использовалась пара праймеров для N-PCR F (5’-CCAAGAAGGCGACAAAGG-3 ‘) и R (5′-GACAGCTTTCTTGGCGGG-3’). Продукты N-ПЦР подвергали электрофорезу на 10% полиакриламидном геле и окрашивали бромидом этидия. Размер ампликона для Mtb и Mbo составлял

116 bp и 89 bp соответственно [15]. Для анализа N-ПЦР обычно включали следующие элементы контроля: отрицательный контроль (с отсутствующей матричной ДНК) был включен в анализ, чтобы исключить появление ложных срабатываний. Для исключения случаев ложноотрицательных результатов в исследовании было включено ограничение на шипы из-за наличия ПЦР-ингибиторов в ДНК-экстрактах образцов. Помимо этих двух контролей положительный контроль с ДНК-мишенью был включен в каждый анализ [10].

Все статистические анализы проводились с использованием программного обеспечения STATA версии 9.2 (StataCorp, College Station, TX). Для всех анализов считалось, что значения p менее 0,05 указывают на статистическую значимость.

Распределение по полу и возрасту 100 пациентов с плевральным выпотом было следующим: 35 женщин и 65 мужчин со средним возрастом 42 ± 8,8 и 40 ± 4,3 соответственно. На основании клинических критериев описано, что 58 пациентов были классифицированы как TPE, а остальные — как N-TPE. AFB был обнаружен микроскопией мазка и / или культурой в 16 образцах (мокрота / плевральная жидкость), полученных от пациентов с ТПЭ. Эти индивидуумы считались окончательными / подтвержденными случаями плеврального туберкулеза (16/58, 27,5%). Оставшиеся 42 в категории TPE рассматривались как вероятные случаи плеврального туберкулеза (42/58, 72,4%). Результаты N-ПЦР сравнивали с: (i) клиническим диагнозом; (ii) улучшение обнаружения микобактерий в образцах мокроты, кроме плевральной жидкости; (iii) пациенты, выделенные как положительные AFB (подтвержденные ТБ плевры) Vs AFB отрицательный (вероятный туберкулез плевры); и (iv) биохимическая характеристика изолятов AFB.

N-ПЦР, культуральная и микроскопическая мазка микроскопии AFB сравнивались и были показаны в таблице 1. В 31 образце микобактерии были обнаружены либо с помощью микроскопии мазка N-PCR / культура / AFB. Эти 31 образец были получены из 58 клинически диагностированных туберкулезных пациентов с плевральным выпотом (TPE). Напротив, никаких микобактерий не было обнаружено в 42 образцах, полученных от пациентов, не являющихся туберкулезными плевральными выпотами (N-TPE, контрольные образцы).

ЗАМЕТКА. Клинический диагноз, Классификация пациентов и контроль, как описано в методах; PPV, положительное прогностическое значение; NPV, отрицательная прогностическая ценность; Чувствительность, TP / (TP + FN) x 100, где T истинно, F ложно, P положительно, а N отрицательно; Специфичность TN / (TN + FP) x 100; N-ПЦР, 116 bp-ампликона, генерируемого методом Nested-PCR, специфичным для Mycobacterium tuberculosis; Культура, AFB Рост обнаружен на LJ, 7H9 и / MGIT; AFB, кислотные быстрые бациллы.

По данным N-ПЦР 51,7% (30/58) образцов плевральной жидкости, полученных из ТПЭ, были положительными для Mtb по сравнению с 10,3% (6/58) культивированием и 3,4% (2/58) методом микроскопии мазка AFB. В образце плевральной жидкости отрицательным методом N-PCR AFB, выделенный из образца, впоследствии был идентифицирован как Mycobacterium fortuitum (образец № SPF-8). Были получены шесть изолятов, по два по каждой из труб LJ, 7H9 и MGIT соответственно. Все анализы показали идентичную специфичность и положительное прогностическое значение (PPV), но отличались своей чувствительностью и отрицательным прогностическим значением (NPV). Анализ N-ПЦР показал самую высокую чувствительность (51,7%) по сравнению с культурой (10,3%) и микроскопией мазка AFB (3,4%, таблица 1).

Основываясь на критериях, описанных в методах, распределение 70 образцов мокроты, собранных у пациентов с плевральным выпотом, показано в таблице 2. Пятьдесят восемь образцов мокроты были получены у пациентов с туберкулезным выпотом плевры, а 12 — с не туберкулезным плевральным выпотом. Идентичные методы были использованы для обнаружения Mtb в этих образцах мокроты, как описано ранее. Из 70 проанализированных образцов в 33 образцах Mycobacteria была обнаружена либо с помощью микроскопии мазка N-PCR / Culture / AFB. Все 33 положительных образца были получены из TPE. Двенадцать образцов, собранных из N-TPE, были отрицательными.

ЗАМЕТКА. Клинический диагноз, Классификация пациентов и контроль, как описано в методах; PPV, положительное прогностическое значение; NPV, отрицательная прогностическая ценность; Чувствительность, TP / (TP + FN) x 100, где T истинно, F ложно, P положительно, а N отрицательно; Специфичность TN / (TN + FP) x 100; N-ПЦР, 116 bp-ампликона, генерируемого методом Nested-PCR, специфичным для Mycobacterium tuberculosis; Культура, AFB Рост обнаружен на LJ, 7H9 и / MGIT; AFB, кислотные быстрые бациллы.

Используя N-ПЦР-анализ, 53,4% (31/58) образцов мокроты были положительными для микобактерий по сравнению с 12,1% (7/58) культивированием и 6,9% (4/58) с помощью микроскопии мазка AFB. Семь изолятов были получены, по два от LJ, 7H9 и три из труб MGIT соответственно. Из 33 образцов, в которых были обнаружены микобактерии, два образца были отрицательными с помощью анализа N-ПЦР. В одном образце выделенный AFB был идентифицирован как Mycobacterium chelonae (образец № SPF-80). Второй образец был положительным AFB, но культурой и отрицательным N-ПЦР (образец № SPF-18). Как было замечено ранее, три метода, используемые для обнаружения микобактерий в образцах мокроты, показали сходный диапазон специфичности, PPV и чувствительность. Все три метода показали 100% специфичность и PPV, и их чувствительность составляла 53,4% по анализу N-ПЦР, 12,1% по культуре и 6,9% с помощью микроскопии мазка AFB.

источник