Квантифероновый тест на туберкулез и тест t spot

Квантифероновый тест (QuantiFERON®-ТВ Gold) — это современный лабораторный тест, который позволяет выявить туберкулез в латентной (скрытой) и активной стадии.

Туберкулез – опасное инфекционное заболевание, вызванное микобактериями туберкулеза. Микобактерии туберкулеза могут поражать все органы и системы организма, чаще страдают органы дыхания, поэтому выделяют две формы туберкулеза: лёгочная и внелёгочная. При лёгочной форме поражаются лёгкие и бронхи, при внелёгочной форме: пищеварительная система (чаще дистальный отдел тонкого кишечника и слепая кишка); мочеполовая система (почки, мочевыводящие пути, половые органы у женщин: матка, трубы, придатки, у мужчин: простата, яички); нервная система (головной, спинной мозг); опорно-двигательная система (кости, чаще поражается позвоночник, суставы); кожа, глаза и др.

Основной путь передачи бактерии туберкулеза, является воздушно-капельный, который осуществляется при разговоре, кашле или чихании больного человека, именно этот путь заражения приводит к лёгочной форме туберкулеза. Чаще всего после инфицирования заболевание протекает латентно (скрыто), и лишь у некоторых, при определенных изменениях в организме переходит в активную стадию. Своевременная диагностика туберкулеза — это единственная возможность не допустить перехода латентной стадии заболевания в активную у инфицированных людей, и защитить здоровых людей от инфицирования, путем выявления зараженных.

Разберем по полочкам скрининговые специфические методы диагностики туберкулеза: на сегодняшний день существует 2 группы.

• 1 группа — это кожные тесты, сюда относится проба Манту и Диаскин тест.
• 2 группа — это IGRA-тесты, лабораторные исследования туберкулеза по крови человека, к ним относятся ТОЛЬКО: Квантифероновый тест и T-SPOT.TB (т-спот).

ОБРАТИТЕ ВНИМАНИЕ! ПЦР диагностика туберкулеза не подходит для скрининга выявления туберкулеза, т.к. для этого метода необходим материал из ОЧАГА предполагаемого туберкулеза.

ПЦР крови на микобактерию туберкулеза, будет положительна при туберкулезном сепсисе (заражение крови) и диссеминированном туберкулезе (самые тяжелые формы туберкулеза). В остальных случаях результат будет отрицательный, но это не означает, что человек не инфицирован туберкулезом.

ПЦР диагностика используется для быстрой диагностики открытых и закрытых форм туберкулеза, например у человека выставлен диагноз туберкулез легких, необходимо понять, опасен он для окружающих или нет, берется мокрота и определяется возбудитель в мокроте.

ПЦР положительная (рис.2) — туберкулезная палочка выделяется при чихании, кашле, разговоре, зараженный человек представляет опасность для окружающих. ПЦР отрицательная (рис.1) — туберкулезный очаг не сообщается с бронхом, человек не выделяет туберкулезную палочку в окружающую среду, но при этом он заражен туберкулезом и нуждается в лечении!

Поэтому данный метод не используется для скрининговой диагностики туберкулеза, т.к. он не может исключить или подтвердить факт инфицирования туберкулезом.

источник

Квантифероновый тест – что это такое? Плюсы и минусы. Может ли квантифероновый тест заменить пробу Манту и диаскинтест в диагностике туберкулеза? Показания, подготовка и правила сдачи, где сделать, цена

Сайт предоставляет справочную информацию исключительно для ознакомления. Диагностику и лечение заболеваний нужно проходить под наблюдением специалиста. У всех препаратов имеются противопоказания. Консультация специалиста обязательна!

Квантифероновый (квантефероновый) тест представляет собой метод лабораторной диагностики на инфекцию M. tuberculosis, который позволяет выявлять как скрытые формы бессимптомного бактерионосительства, так и собственно развившийся туберкулез различных органов (легких, почек и др.).

Квантифероновый тест – это лабораторный непрямой метод выявления микобактерий туберкулеза в крови человека. Непрямым метод является потому, что основан на выявлении не самих микобактерий, а продуктов, которые вырабатываются иммунными клетками в ответ на наличие в организме микробов. То есть о наличии микобактерий результаты теста позволяют судить косвенно – если в крови определяются вещества, вырабатываемые иммунными клетками в ответ на наличие микробов, то это считается подтверждением инфицирования микобактериями.

Принцип и суть квантиферонового теста довольно непросты, так как его производство включает в себя два этапа – культуральный и последующий иммуноферментный. Рассмотрим это подробнее. Во-первых, в пробирке, в которой выполняется тест, находятся три антигена микобактерий туберкулеза: ESAT-6, CFP-10, TB7.7(p4). В норме эти антигены имеются на поверхности микобактерий, и их распознает иммунная система человека, как чужеродные, запуская соответствующий ответ с выработкой антител для уничтожения «чужих», попавших в организм.

Для производства первого культурального этапа теста кровь обследуемого человека вносится в пробирку с находящимися в ней антигенами микобактерий туберкулеза. Далее кровь инкубируется при температуре 37 o С в течение нескольких часов в этой пробирке, что имитирует попадание микобактерий туберкулеза в организм (только в качестве организма выступает набранная проба крови). И если в крови человека имеются микобактерии туберкулеза, то есть он был инфицирован в прошлом ими, то в процессе инкубации лимфоциты крови вырабатывают вещество, называемое гамма-интерфероном.

После завершения инкубации пробирки, содержащей смесь исследуемой крови и антигены микобактерий, начинается второй этап квантиферонового теста, который заключается в определении концентрации гамма-интерферона. Концентрация интерферона определяется методом иммуноферментного анализа (ИФА). То есть из пробирки отбирается проба плазмы и проводится ИФА на определение концентрации интерферона. Если концентрация интерферона оказывается низкой (ниже нормы), то результат анализа – отрицательный, то есть микобактерии туберкулеза в организме отсутствуют. Когда концентрация интерферона находится в пограничной области, результат считается сомнительным, то есть невозможно однозначно сказать, имеются микобактерии в организме или нет. В таких случаях рекомендуется провести другие методы диагностики или повторить тест через некоторое время. Если же концентрация интерферона оказывается высокой (выше нормы), то это свидетельствует о том, что в организме человека присутствуют микобактерии.

Однако положительный результат квантиферонового теста не означает, что человек обязательно болен туберкулезом, и в этом существенный минус анализа. Дело в том, что положительный результат свидетельствует только о том, что организм человека «знаком» с микобактериями туберкулеза, а это может означать либо наличие заболевания (то есть человек болен туберкулезом), либо перенесенный в прошлом туберкулез, либо простое инфицирование микобактериями. На практике положительный квантифероновый тест означает только инфицирование микобактериями, которое наблюдается у 90 % взрослого населения России и других стран европейской части бывшего СССР. Причем 98 % инфицированных микобактериями туберкулеза никогда в жизни не заболевают самим туберкулезом, а бактерия просто живет в организме, подобно вирусу герпеса, который, однажды попав в ткани, остается в них пожизненно. И так же, как и герпес, микобактерия в подавляющем большинстве случаев не вызывает самого заболевания, просто существуя в организме, как условно-патогенный микроб.

А квантифероновый тест не позволяет различить обычного носительства микобактерий туберкулеза (имеющегося у 90 % взрослого населения бывшего СССР) и собственно заболевания туберкулезом. Тест дает заключение только о наличии или отсутствии микобактерий туберкулеза в организме. Поэтому, если результат теста положительный, то придется пройти дополнительные обследования, чтобы врач смог выяснить, какой же процесс имеет место в конкретном случае – простое инфицирование и носительство микобактерий или же туберкулез. В качестве дополнительных к квантифероновому тесту для отличения носительства микобактерий и туберкулеза назначаются проба Манту, диаскинтест, рентген/флюорография, УЗИ, анализ мочи на микобактерии.

Таким образом, очевидно, что квантифероновый тест является малополезным для диагностики туберкулеза в большинстве случаев, так как он будет давать положительный результат у 98 % инфицированных микобактериями, но не болеющих туберкулезом. Именно поэтому по-прежнему основным методом раннего выявления туберкулеза у взрослых людей в России является ежегодная флюорография, а у детей – проба Манту и/или диаскин тест. Конечно, проба Манту и диаскин тест тоже имеют свои минусы, но они, во-первых, не так дорогостоящи, а во-вторых, не делают здоровых людей больными.

Под специфичностью теста понимают процент случаев, когда он дает положительный результат при отсутствии заболевания. То есть специфичность теста отражает ложноположительные результаты, когда заболевание выявляется там, где его нет. Специфичность квантиферонового теста высока – 99 %, что означает, что он выявляет инфицирование микобактериями там, где его нет, только в 1 % случаев. Как правило, подобные ложноположительные результаты обусловлены инфицированием человека видами микобактерий (M. kansasii, M. szulagai, M. marinum), которые не вызывают туберкулез никогда. Ложноположительные результаты квантиферонового теста при инфицировании нетуберкулезными микобактериями обусловлены тем, что эти виды микробов так же, как и туберкулезные микобактерии, на своей поверхности несут антигены ESAT-6, CFP-10, TB7.7(p4).

Таким образом, очевидно, что и положительный результат квантиферонового теста не является 100 % подтверждением того, что человек инфицирован микобактериями туберкулеза.

Совершенно однозначным плюсом квантиферонового теста является его высокая специфичность, благодаря которой он не дает ложноположительных результатов у людей, которые ранее были привиты вакциной Кальметта-Герена (БЦЖ) и у которых имеется аллергическая реакция на туберкулин (компонент пробы Манту). То есть если имеется ложноположительная реакция на пробу Манту вследствие сделанной в прошлом прививки БЦЖ или аллергии на туберкулин, то квантифероновый тест является методом выбора диагностики туберкулеза.

Кроме того, квантифероновый тест может проводиться у взрослых и детей, которым по каким-либо причинам (например, наличие кожных заболеваний и др.) противопоказаны кожные пробы (Манту, диаскинтест) на туберкулез.

В отличие от пробы Манту и диаскинтеста, квантифероновый тест не дает никаких побочных реакций, так как проводится в пробирке и для него только забирается проба крови из вены. К сожалению, проба Манту и диаскинтест могут вызывать побочные реакции, в том числе аллергические, так как их проведение связано с введением препарата под кожу (то есть в организм).

Также к плюсам квантиферонового теста можно отнести то, что его результаты более объективны по сравнению с пробами Манту и диаскинтестом. Ведь результат квантиферонового теста представляет собой измеренную концентрацию гамма-интерферона в сыворотке крови человека, а для оценки пробы Манту и диаскинтеста проводится измерение образовавшейся в месте введения препарата папулы. Соответственно, оценка размеров и состояния папулы целиком зависит от медицинского работника, который ее производит, а потому в такой ситуации довольно велик риск субъективности и связанной с этим некачественной оценки реакции.

Квантифероновый тест, в отличие от пробы Манту и диаскинтеста, можно пройти в любое время, так как для него нет противопоказаний, таких, как, например, острый период инфекций, обострение любых имеющихся хронических заболеваний (в том числе аллергии), период после вакцинации (прививки), карантин в учреждениях и т.д.

Отдельно следует отметить, что квантифероновый тест чувствителен и позволяет выявлять инфицирование микобактериями у людей со сниженным иммунитетом, например, у ВИЧ-инфицированных, онкобольных, страдающих аутоиммунными заболеваниями, алкоголизмом, сахарным диабетом, эпилепсией, почечной недостаточностью, принимающих препараты-иммуносупрессоры, наркотики и т.д. У данной группы людей (со сниженным иммунитетом) проба Манту, как правило, неинформативна, и дает отрицательный результат даже на фоне имеющегося активного туберкулеза.

Таким образом, резюмируя, можно коротко перечислить плюсы квантиферонового теста следующим образом:

• Отсутствие ложноположительных результатов у ранее привитых БЦЖ или у имеющих индивидуальную повышенную чувствительность к туберкулину;
• Возможность производить исследование на раннее выявление инфицированности микобактериями у людей, которым противопоказано проведение кожный проб Манту и диаскинтеста;
• Отсутствие побочных эффектов, так как для исследования забирается кровь, а не в организм вводится препарат;
• В организм не вводится никаких лекарственных препаратов, поэтому квантифероновый тест не отражается на общем самочувствии и состоянии человека;
• Объективная (а значит более точная по сравнению с субъективной) оценка результатов;
• Тест можно пройти в любое время и его результат не зависит от имеющихся у человека тяжелых хронических заболеваний, простуды или недавней вакцинации;
• Исследование дает положительный результат в случае инфицированности микобактериями людей со сниженным иммунитетом, у которых кожные пробы (Манту или диаскинтест), как правило, отрицательные.

Однако, помимо перечисленных плюсов, у квантиферонового теста имеется и ряд довольно существенных минусов.

Во-первых, несомненным минусом исследования является его относительно низкая чувствительность, вследствие чего в среднем в 16 % случаев туберкулез не выявляется. А в некоторых исследованиях указывается и еще больший процент ложноотрицательных результатов (до 25 %) квантиферонового теста у людей, которые точно больны туберкулезом. К тому же, ложноотрицательный результат может быть обусловлен имеющимися у человека нарушением функции иммунной системы, ненадлежащим обращением с пробирками после забора в них крови, ошибками при проведении самого анализа или вовсе недавним заражением микобактериями, когда иммунные клетки еще не успели среагировать на микробы. Это означает, что при отрицательном результате исследования нельзя быть полностью уверенным в том, что туберкулез у человека отсутствует, что, в конечном, итоге, влечет за собой необходимость проведения и других дополнительных тестов.

Во-вторых, положительный результат квантиферонового теста не свидетельствует о заболевании человека туберкулезом. И потому после получения положительного результата исследования для отличения носительства микобактерий от заболевания туберкулезом нужно проводить в обязательном порядке дополнительные обследования (такие, как бактериологическое и микроскопическое исследование мокроты и мочи, рентген грудной клетки и т.д.). Кроме того, ложноположительный результат квантиферонового теста может быть обусловлен неправильным проведением исследования или инфицированием человека микобактериями, которые не вызывают развития туберкулеза (M. kansasii, M. Szulagai, M. marinum).

А учитывая тот факт, что микобактериями инфицированы 90 % населения России, то практически у всех взрослых квантифероновый тест будет положительным, но реально туберкулез будет только примерно у 2 % из этих людей. А, значит, при использовании этого исследования для массовой диагностики придется дополнительно обследовать большое число людей, у которых туберкулеза нет, что связано с высокими затратами и повышением риска заболевания этих людей на фоне испытываемого ими стресса и лишнего посещения медицинских учреждений.

В-третьих, квантифероновый тест не позволяет отличить носительство микобактерий от реального заболевания туберкулезом или вылеченного в прошлом заболевания. И более того, наличие микобактерий туберкулеза в организме называется латентной туберкулезной инфекцией, а не носительством, то есть вполне здоровый человек, не имеющий развивающегося в организме заболевания, считается потенциально больным. И таким потенциально больным приходится назначать профилактическое лечение противотуберкулезными антибиотиками, что, естественно, дорого, неудобно и чревато большим количеством побочных эффектов. Кроме того, такое профилактическое применение противотуберкулезных антибиотиков может привести к перерождению микобактерий в такие формы, которые будут устойчивы к действию имеющихся лекарств. И в таком случае, если носитель микобактерий реально заболеет туберкулезом, риск того, что инфекция окажется антибиотикоустойчивой, очень высок. А тогда придется применять дорогие антибиотики или комбинации нескольких антибиотиков, что приведет к увеличению количества или усилению выраженности побочных эффектов этих препаратов.

В-четвертых, несмотря на то, что производитель набора для проведения квантиферонового теста рекомендует его как хороший метод выявления туберкулеза и инфицирования микобактериями у людей, страдающих иммунодефицитом (ВИЧ-инфицированные, онкобольные, страдающие сахарным диабетом, силикозом, почечной недостаточностью, принимающие препараты-иммуносупрессоры и т.д.), имеются данные о том, что у данных категорий людей исследование может давать некорректные, сомнительные или вовсе неверные результаты.

В-пятых, кровь для проведения квантиферонового теста должна быть запущена в работу в течение 12 часов, а любые ошибки в заборе или хранении проб могут приводить к неверным результатам.

Таким образом, коротко резюмируя, минусы квантиферонового теста можно описать следующим образом:

• Относительно высокий риск ложноотрицательных результатов у людей, реально болеющих туберкулезом;
• Отрицательный результат при недавнем заражении микобактериями;
• Необходимость проведения во многих случаях дополнительных диагностических обследований для выявления возможного туберкулеза, как при отрицательном, так и при положительном результате анализа;
• Невозможность отличения простого инфицирования микобактериями от активного туберкулезного процесса и в прошлом пролеченного туберкулеза;
• Теоретическая возможность некорректных и трудных в истолковании результатов теста у людей, страдающих иммунодефицитом (ВИЧ-инфицированные, онкобольные, страдающие сахарным диабетом, силикозом, почечной недостаточностью, принимающие препараты-иммуносупрессоры и т.д.);
• Необходимость точного исполнения инструкций по обработке проб крови.

Хотя многие частные и государственные медицинские учреждения, проводящие квантифероновый тест на коммерческой основе, заявляют, что он заменяет пробу Манту и диаскинтест, с точки зрения многих опытных врачей-фтизиатров это утверждение не совсем верно.

К сожалению, диагностика туберкулеза сложна, и ни один из существующих в настоящий момент времени методов не позволяет со 100 % точностью во всех случаях выявлять это инфекционное заболевание. А потому различные методы диагностики туберкулеза не заменяют и не исключают друг друга, а являются дополняющими. Соответственно, и квантифероновый тест не должен рассматриваться в качестве замены пробы Манту или диаскинтеста, его нужно полагать дополняющим исследованием, так как он имеет и преимущества, и минусы перед другими методиками.

Например, проба Манту обладает практически 100 % чувствительностью, то есть она позволяет выявлять туберкулез почти во всех случаях. Более того, проба Манту – это единственный тест, дающий положительный результат при раннем развитии инфекции, когда еще нет клинических признаков, и диаскинтест и квантифероновый тест – отрицательны.

Но, к сожалению, проба Манту часто дает ложноположительные результаты (в 30 – 50 % случаев), а потому при получении положительного результата пробы приходится также проводить дополнительные исследования. Например, проба Манту может быть положительной у людей, в прошлом привитых вакциной БЦЖ или у имеющих индивидуальную повышенную чувствительность к туберкулину (компоненту пробы Манту).

Зато диаскинтест не дает ложноположительной реакции у привитых вакциной БЦЖ, но дает ложноотрицательный результат на ранних стадиях развития инфекции.

Поэтому при вираже пробы Манту (когда после уменьшения вдруг появляется большой прирост размера папулы в месте введения препарата) рекомендуется выполнить еще и диаскинтест, и квантифероновый тест (или только диаскинтест). В такой ситуации, если и диаскинтест, и квантифероновый тест отрицательны, то вираж пробы Манту считается спровоцированным индивидуальной чувствительностью организма к туберкулину, аллергией или некими имеющимися у человека особенностями.

Если же диаскинтест отрицателен, а квантифероновый тест положителен, то, скорее всего, человек инфицирован и в его организме в скрытой форме протекает инфекционный процесс. В подобной ситуации врач может предложить профилактическое лечение или через два месяца повторную сдачу диаскинтеста. Ведь если через два месяца диаскинтест будет отрицательным, то это означает, что когда-то произошло инфицирование микобактериями, но они находятся в организме в неактивном состоянии, туберкулез отсутствует и профилактическое лечение не нужно.

Таким образом, квантифероновый тест является не заменой пробы Манту и диаскинтеста, а их дополнением. Ведь квантифероновый тест позволяет только выявить наличие микобактерий туберкулеза в организме, но вот отличить инфицирование от реального туберкулезного процесса – нет. Проба Манту же дает возможность отследить ответ на прививку вакциной БЦЖ и состояние эффективности иммунитета при контакте с микобактериями. А диаскинтест позволяет оценить активность микобактерий туберкулеза в организме в текущий момент времени и, соответственно, решить вопрос о назначении профилактического лечения. Таким образом, очевидно, что все три анализа являются взаимодополняющими, и если результат одного заставляет сомневаться в том, необходимо ли человеку лечение туберкулеза, то следует провести или оба других анализа, или один из них.

Несмотря на то, что производитель тест-системы указывает, что результат не зависит от имеющихся у человека в текущий момент времени инфекционных заболеваний (ОРВИ, грипп и др.) или обострения патологий внутренних органов, все же сотрудники лабораторий рекомендуют дождаться выздоровления от инфекции, и только после этого сдавать анализ. Как показала практика, острый инфекционный процесс в организме может стать источником ложноположительного результата квантиферонового теста, и в таком случае придется пересдавать кровь через 4 – 5 недель для получения точного результата.

Какой-либо подготовки перед сдачей крови на квантифероновый тест не требуется, поэтому накануне можно вести обычный образ жизни.

Однако кровь следует сдавать утром, строго натощак, минимум после 8-часового голодания. То есть сдать кровь на квантифероновый тест можно только по прошествии 8 часов после последнего приема пищи. Для исследования берется кровь из вены.

Для правильного проведения и корректной оценки результатов кровь для квантиферонового теста забирается в три специальные пробирки, одна из которых является отрицательным контролем, вторая – положительным контролем, и третья – собственно испытуемой. Правильная и точная оценка результатов анализа возможна только при постановке реакции во всех трех пробирках и учете ответа в положительном и отрицательном контролях.

В каждую пробирку набирается 1 мл крови из вены, после чего они плотно закрываются прилагающимися крышками и легко встряхиваются примерно 10 раз, чтобы кровь полностью покрыла стенки пробирок. Нельзя энергично и слишком усердно встряхивать пробирки, так как это может привести к отслоению геля, и в таком случае забор придется производить в новые пробирки.

После заполнения кровью перед началом производства квантиферонового теста пробирки с кровью можно хранить не более 12 – 16 часов и только при комнатной температуре (17 – 25 o C). Недопустимо хранение пробирок с пробами крови в холодильнике или морозильнике.

Если по каким-либо причинам невозможно набрать по 1 мл крови сразу в пробирки для квантиферонового теста, то можно набрать 5 мл венозной крови в обычную пробирку, предварительно налив в нее антикоагулянт гепаринат лития. Другие антикоагулянты (цитрат натрия, ЭДТА) использовать нельзя, так как они могут влиять на результаты теста. Кровь в пробирке с гепаринатом натрия может храниться до начала инкубации в специальных пробирках также 12 – 16 часов при комнатной температуре. То есть при необходимости в пробирку с гепаринатом натрия набирается 5 мл венозной крови, которую в течение 12 – 16 часов можно доставить в лабораторию и перелить в специальные пробирки для проведения квантиферонового теста.

Результат квантиферонового теста содержит три обязательных параметра, а именно, концентрация гамма-интерферона в положительном контроле, отрицательном контроле и испытуемой пробе. И для прочтения результата нужно учитывать показатели гамма-интерферона во всех трех пробирках (два контроля и проба).

Пробирка с отрицательным контролем называется NIL, с положительным контролем – Mitogen, а с пробой – TB-антиген. Прочтение результатов квантиферонового теста представлено в таблице ниже.

* В данном параметре должна указываться концентрация гамма-интерферона в пробирке с пробой за вычетом концентрации гамма-интерферона в отрицательном контроле.
** В данном параметре должна указываться концентрация гамма-интерферона в пробирке с положительным контролем за вычетом концентрации гамма-интерферона в отрицательном контроле.

Соответственно, после получения результатов теста, в котором указаны концентрации гамма-интерферона в трех пробирках (положительной контрольной, отрицательной контрольной и испытуемой), можно по приведенной выше таблице посмотреть самостоятельно, как интерпретировать эти цифры (положительный, отрицательный или сомнительный результаты).

Например, концентрация гамма-интерферона в пробирке с отрицательным контролем равна 4 МЕ/мл, в пробе – 0,75 МЕ/мл, а в положительном контроле – 2 МЕ/мл. Так как в пробе концентрация больше – 0,35 МЕ/мл, то нужно понять, эта цифра больше или меньше 25 % от значения отрицательного контроля. Отрицательный контроль равен 4 МЕ/мл, значит 25 % от этой цифры составляет 1 МЕ/мл. В нашем примере в пробе концентрация гамма-интерферона равна 0,75 МЕ/мл, что меньше 1 МЕ/мл, а значит меньше 25 % от значения отрицательного контроля. Таким образом, итоговый результат квантиферонового теста – отрицательный.

Т спот тест правильно пишется и называется T-SPOT.TB. По своей сути T-SPOT.TB – это практически такое же исследование, как и квантифероновый тест, поскольку у пациента проводится забор крови, и она инкубируется в пробирках с антигенами микобактерий туберкулеза. Только при производстве квантиферонового теста после инкубации крови производится измерение в ней количества гамма-интерферона, а при выполнении T-SPOT.TB измеряется количество самих иммунных клеток (лимфоцитов), вырабатывающих гамма-интерферон. Поэтому, в принципе, и квантифероновый тест, и T-SPOT.TB являются способами непрямой диагностики инфицирования микобактериями туберкулеза, основанными на одном и том же методе. Просто в одном методе проводится измерение одного продукта, а в другом – другого, получаемого в результате одной и той же реакции в одинаковых пробирках.

С 2016 по 2018 годы в России квантифероновый тест не выполнялся. Причины прекращения применения исследования не были оглашены публично, но можно предположить, что такое волевое решение органов здравоохранения стало ответом на то, что родители детей, у которых оказался положительным результат квантиферонового теста, сталкивались с серьезными трудностями, доказывая, что ребенок здоров, не болен туберкулезом, а просто инфицирован микобактериями, как и 90 % взрослого населения страны.

В настоящий момент (с июня 2018 года) квантифероновый тест разрешен к выполнению в России. Квантифероновый тест и его аналог – T-SPOT.TB (Т спот тест) производят многие частные лаборатории в крупных городах и лаборатории при НИИ туберкулеза.

С июня 2018 года квантифероновый тест в России разрешен.

Автор: Наседкина А.К. Специалист по проведению исследований медико-биологических проблем.

источник

T-SPOT.TB это иммунологический способ диагностики туберкулеза. Способ во многом похож на квантифероновый тест, он занимает 3-4 дня. Для его проведения нужна кровь исследуемого.

Обратите внимание, в Лабтест можно заказать услугу забора крови для теста T-SPOT.tb на дому. Записаться на прием анализа можно через форму по этой ссылке.

Название T-SPOT.TB расшифровывается так:

• литера T обозначает T-лимфоциты, клетки крови, на основе ответа которых производится исследование;
• Слово SPOT это перевод с английского языка, означающий «пятно». В результате лабораторного опыта в лунке образуются пятна, каждое из которых маркирует Т-лимфоцит;
• .TB это сокращенное международное обозначение туберкулеза.

В России использование методики Т-СПОТ утверждено в 2012 году ФЗ — 2012/648.

Этот способ определения носительства туберкулеза очень чувствителен и информативен, он позволяет исключить ложноположительные реакции на носительство микобактерии туберкулеза в случаях, когда большинство тестов ошибаются или неточны. По разным оценкам и в разных регионах земного шара чувствительность Т-СПОТ оценивается от 87 до 97%, информативность также доходит до 97%. Как вы знаете, диагностика туберкулеза у ВИЧ-инфицированных осложнена, а Т-СПОТ в этих случаях весьма информативен и надежен. Есть и другие случаи, в которых использование этого теста предпочтительно.

• у детей, привитых БЦЖ, у которых выявлено ложноположительная реакция Манту. В этом случае ценно сделать это малоинвазивное исследование до рентгенографии легких.
• у лиц с аллергическими и аутоимунными заболеваниями;
• у медицинских работников, людей, которые много путешествуют, военных, беременных;
• у заключенных или прибывших из мест заключения;
• у больных наркоманиями;
• у лиц, контактирующих с туберкулезными больными;
• у пациентов, проходящих терапию подавляющую иммунитет, как например, глюкостероидная или лучевая терапия, лечение с замещением функции почек;
• при наличии хронических заболеваний, сопровождающихся снижением или истощением иммунитета, как например, сахарный диабет, уже упоминавшийся ВИЧ, или пневмокониозы;
• при подозрении на внелегочные формы туберкулеза.

Внимание! Вакцинация БЦЖ не влияет на результаты теста T-SPOT.

Важно помнить, что Т-СПОТ является способом количественной диагностики наличия в организме туберкулеза, но не дает возможности отличить активную форму туберкулеза от латентной.

Этот тест у носителей ВИЧ имеет особое значение в диагностике туберкулеза. Вирус иммунодефицита поражает как раз те клетки, которые используются для диагностики в любом из IGRA-тестов, к которым относится и T-SPOT, т.е. клетки CD4. В ходе исследований обнаружилось, что даже на поздних стадиях развития ВИЧ, когда количество лимфоцитов CD4 уже не превышает ста на мм 3 , выявляемость туберкулеза при помощи Т-СПОТ остается очень высокой.

T-SPOT разрабатывался в Оксфордском Университете и первой на вооружение его приняла Европа, в 2004 году он официально включен в стандарты диагностики туберкулеза в Евросоюзе. США и Канада включили Т-СПОТ в официальную диагностику в 2005 году, Южная Корея в 2006, Тайвань в 2009, Китайская Народная Республика в 2010, Российская Федерация и Япония в 2012 году.

ПЦР – это исследование ДНК, а так как исследуется именно мокрота, ПЦР исключает возможность определить внелегочные формы туберкулеза. Получается, что Т-СПОТ – универсальный способ диагностики туберкулеза, а ПЦР мокроты специфический. Вероятно поэтому Т-СПОТ, наряду с квантифероновым тестом во всем цивилизованном мире именуют «Золотым стандартом» в диагностике туберкулеза.

C квантифероновым тестом T-SPOT во многом сходен, а вот с диаскин-тестом отличий много. Например, Диаскин-тест противопоказан лицам с аллергическими и аутоиммунными заболеваниями, он лишен количественных параметров оценки, чаще бывает ложноотрицательным. Диагностика при помощи диаскин-теста невозможна при отсутствии у пациента иммунного ответа на туберкулин.

Квантифероновый тест также хорош и точен как T-SPOT, главное различие в том, что квантифероновый тест определяет гамма-интерферон, вырабатываемый в ответ на внедрение туберкулезной палочки, а Т-СПОТ определяет сами Т-клетки, которые вырабатывают гамма-интерферон на присутствие микобактерии туберкулеза.

Нас часто спрашивают, какой тест лучше, квантифероновый или Т-СПОТ. Разницы никакой, они одинаково чувствительны и информативны, потому что в одном случае мы определяем количество Т-клеток, а в другом количество гамма-интерферона, который они выделяют. Стоимость и сроки их проведения также очень похожи.

Интересно, что вирусологи нашли у вирулентной Микобактерии туберкулеза фрагмент генома, который отсутствует в БЦЖ, используемой для прививки. Этот фрагмент, называемый RD1, был утрачен в процессе создания вакцины где то между 1908 и 1931 годами. Антигены к RD1 — ESAT-6 и CFP10 избирательно взаимодействуют только с теми Т-клетками, которые «знакомы» с фрагментом RD1. А мы помним, что этого фрагмента нет в обычной прививке. Выяснилось также, что его нет и у микобактерий, которые любят провоцировать ложно-положительную реакцию на туберкулез в здоровом организме, таких как Micobacterium kanzasii, M.marinum, M.szulgai и проч.

Все это позволило Т-СПОТ стать надежным и высокоинформативным методом диагностики как латентного, так и активного туберкулеза. Высокая точность диагностики позволяет избежать ненужных и, зачастую, вредных лечебных курсов и исследований.

Стоимость Т-СПОТ при этом не превышает стоимости квантиферонового теста, и записаться на него можно прямо здесь.

Кровь на Т-СПОТ можно сдать без записи в любом из девяти медицинских центров Лабтест в Санкт-Петербурге или даже вызвать медсестру для забора крови на дом. За два часа до исследования нельзя есть. Кровь забирают из вены. Актуальную стоимость исследования можно посмотреть на странице с прайс-листом.

Результатом исследования могут быть три варианта ответа. Чтобы понять, что значит каждый из них мы приводим расшифровку анализа Т-СПОТ:

• Отрицательный — организм не инфицирован туберкулёзом
• Положительный — организм инфицирован туберкулёзом
• Сомнительный — довольно редкий вариант ответа. Необходимо наблюдение в динамике, понадобится повторная сдача анализа или дополнительные методы обследования, например, ПЦР или антитела к туберкулёзу с консультацией фтизиатра.

Небольшое количество пятен в нулевом контроле, до 10-12 штук, обозначающих искомые лимфоциты, встречается и у здоровых незараженных людей. При таком их количестве лаборатория трактует результат как отрицательный. Большее число пятен трактуется как сомнительный результат, если в лунках с антигеном А и антигеном В от 8 до 100 – как положительный. При этом учитывается количество в нулевом контроле, но это уже лишние подробности. Однако, фтизиатры, руководствуясь собственным опытом, могут трактовать результат Т-СПОТ.тб по-своему, опираясь на весь комплекс симптомов и анамнеза болезни. Такой подход можно и нужно считать более корректным и справедливым в интересах пациента.

Записаться на анализ в один из девяти медицинских центров Лабтест в Санкт-Петербурге можно по ссылке ФОРМА ЗАПИСИ или единому телефону +7 812 385-11-95. Хотя можно прийти на анализ Т-СПОТ в любой из наших центров и безо всякой записи.

Кстати, в поисковых системах это исследование ищут по очень разнообразному числу запросов, в том числе нередко вводят сочетание тест пот или ти-спот, или теспот, и даже иногда спот тест. Мы любим всех наших клиентов, даже если кто-то не знает как правильно пишется Т-СПОТ.тб, это естественно, когда диагностика туберкулеза — не ваш бизнес. Чтобы нашу страницу можно было найти и по этим словосочетаниям, мы ввели в текст и его: Тест пот? Почему нет? Ти-спот? Пожалуйста! Теспот? Добро пожаловать!

источник

Туберкулёз в России распространён настолько, что к сорока годам 70-90% жителей нашей страны инфицированы им. Это не значит, что они больны: после инфицирования иммунитет большинства людей справляется с бактерией. Вероятность заболеть составляет в среднем 8% в первые два года после инфицирования, затем постепенно снижается, и формируется приобретенный клеточный иммунитет. Среди взрослых чаще болеют люди ослабленные, живущие в плохих условиях, при недостатке света и свежего воздуха. Тем не менее, заразиться может абсолютно каждый из нас. Поэтому так важно проходить регулярные проверки на туберкулёз и проверять своих детей.

ВОЗ рекомендует массовую вакцинацию новорожденных против туберкулёза во всех странах, где эта болезнь распространена. Поэтому на 3-5 день после рождения, еще в роддоме, всем новорожденным бесплатно делают прививку БЦЖ. Но эта вакцина не защищает от инфицирования туберкулёзом. Её задача несколько иная. Если не привитый ребенок младше 2 лет будет инфицирован туберкулёзом, у него крайне высока вероятность развития туберкулезного менингита и генерализованных форм туберкулеза, которые очень быстро приводят к смерти. БЦЖ достаточно надёжно защищает ребенка именно от этих форм. Она также защищает детей от легочной формы туберкулеза, но уже менее эффективно.

Проба Манту ежегодно проводится всем детям до 7 лет. Это не прививка (!), а иммунологический тест, показывающий, есть ли в организме возбудитель туберкулеза. При этом внутрикожно вводится туберкулин — специфический белок, содержащий антигены человеческого и бычьего туберкулеза. Через 72 часа измеряется размер папулы. На результат реакции Манту может повлиять посещение сауны, долгое принятие ванны, бассейн и расчёсывание места введения пробы. Временный контакт с водой никак не влияет на результаты пробы Манту, поэтому мнение о том, что Манту нельзя мочить — миф.

Он проводится детям с 8 лет. Также является кожной пробой. Но если в Манту используются антигены как человеческого, так и бычьего туберкулеза, то в диаскинтесте — только антигены туберкулеза человека. Диаскинтест гораздо более специфичен: реакция на него возникает, только если в организме есть активные бактерии туберкулеза. Проще говоря — если проба Манту положительная, это ещё ничего не значит: эта проба часто дает и ложноположительные реакции. А вот после диаскинтеста появилась реакция — это более серьёзный показатель.

Точность Манту составляет 50-70%, диаскинтеста — 90%.

Квантифероновый тест — один из новых методов диагностики туберкулёза по анализу крови. Он основан на определении в крови гамма-интерферона, который вырабатывают клетки в ответ на внедрение туберкулезной палочки. В отличие от Манту и диаскинтеста, квантифероновый тест не требует введения в организм никаких антигенов и бактерий. Кровь для исследования берут из вены. Результат готов через несколько дней, и его точность намного выше, чем у кожных проб. Тест будет положительным, только если человек действительно болен.

Этот метод диагностики туберкулеза по крови аналогичен квантифероновому тесту. Отличие в том, что квантифероновый тест определяет в крови гамма-интерферон, вырабатываемый в ответ на внедрение туберкулезной палочки, а Т-СПОТ определяет сами Т-клетки, которые вырабатывают гамма-интерферон на присутствие микобактерии туберкулеза. Оба теста одинаково чувствительны и информативны (до 97%), они чувствительнее диаскинтеста и намного чувствительнее реакции Манту. «Ти-спот» практически исключает ложноположительные и ложноотрицательные реакции, в то время как квантифероновый тест все-таки может давать ложноположительную реакцию, если во время сдачи крови человек был, например, болен ОРВИ.

Чтобы отличить активную форму туберкулеза от латентной, используется специфический тест — ПЦР (исследования мокроты на ДНК). Таким образом, диаскинтест, ти-спот и другие тесты позволяют определить, болен ли человек туберкулезом вообще (легочным или внелегочным), а ПЦР — болен ли он им в активной форме.

Всем взрослым с 15 лет в России рекомендуется раз в год проходить флюорографию. Детям с 15 до 17 лет разрешено выполнять Флюрографию, но это не отменяет постановку Диаскинтеста. Справку со свежим снимком требуют везде — даже при посещении ребенка в больнице. Флюорография — это скорее «коллективный барьер» на пути туберкулеза, чем метод выбора для индивидуальной проверки. Флюрография выявляет только легочные формы туберкулеза.

Если у вас остались вопросы по методам диагностики туберкулеза — позвоните нам: +7 812 331 00 00, мы ответим на них!

источник

Для диагностики туберкулеза наряду с Диаскинтестом и пробой Манту предлагается использовать иммуноферментные гамма-интерфероновые тесты, одним из которых является T-SPOT.TB. Этот метод диагностики во многом похож на квантифероновый тест, для его проведения так же необходима кровь из вены.

На сегодняшний день квантифироновый тест на территории Российской Федерации для выявления туберкулеза не используют. Вместо него предлагают английский аналог — Интерфероновый тест (Т-СПОТ или T-SPOT.TB).

В апереле 2014 года в Российской Федерации был зарегистрирован набор реагентов для in vitro диагностики туберкулезной инфекции Т-СПОТ.ТБ (T-SPOT®.TB). Получено регистрационное удостоверение № ФСЗ 2012/12648 Федеральной службы по надзору в сфере здравоохранения. Регистрационное удостоверение подтверждает, что Т-СПОТ является изделием медицинского назначения, и дает право на применение в Российской Федерации.

Название T-SPOT.TB расшифровывается следующим образом:

• «T» обозначает T-лимфоциты (клетки крови), на основе ответа которых производится исследование. Стимуляция Т-лимфоцитов специальными антигенами, характерными для возбудителя туберкулеза (микобактерии туберкулеза), способствует выработке интерферона.
• «SPOT» в переводе с английского языка, означает «пятно». В результате лабораторного опыта в лунке образуются пятна, каждое из которых маркирует Т-лимфоцит. Spot-анализ ведет подсчет пятен, возникших на месте иммунных клеток, специфичных к туберкулез-антигену;
• «TB» — это сокращенное международное обозначение туберкулеза.

Данный анализ может применяться для всех людей, находящихся в группе риска по латентной туберкулезной инфекции, а также для лиц с подозрением на туберкулез вне зависимости от их возраста, пола, иммунного статуса и терапии.

Плюсы (преимущества) T-SPOT.TB теста:

• высокая специфичность и высокая чувствительность;
• отсутствие противопоказаний для исследования;
• безопасность и отсутствие побочных реакций;
• отсутствие ложноположительных результатов в случае вакцинации БЦЖ;
• интерпретация результатов теста менее субъективна, чем интерпретация результатов кожных туберкулиновых проб;
• возможно применять для дифференцирования туберкулезной инфекции у детей от поствакцинальной аллергии, а также для оценки уровня специфического иммунитета в процессе лечения.

Минусы (недостатки) T-SPOT.TB теста:

• не является законодательно закреплённым методом выявления туберкулеза, поэтому делается не бесплатно, а за «свой счёт»;
• высокая стоимость T-SPOT.TB (минимум в Москве – 6000 рублей, в среднем 6800 рублей). В регионах стоимость значительно ниже;
• тест возможно сделать пока только в некоторых городах: Москве, Санкт-Петербурге, Новосибирске, Тюмени, Самаре и др.;
• в ряде случаев тест дает ложноотрицательную реакцию (100% диагностики туберкулеза не существует).
• Т-СПОТ является способом количественной диагностики наличия в организме туберкулеза, но тест не позволяет различить ЛТБИ (латентную туберкулёзную инфекцию) и активный туберкулёз. Поэтому в регионах с высоким уровнем инфицированности тест не имеет прямого диагностического значения.

T-SPOT может быть использован вместо пробы Манту или Диаскинтеста во всех случаях, когда показано проведение кожных проб в качестве теста для диагностики туберкулеза. В качестве дополнительного метода исследования для подтверждения или опровержения сомнительных результатов кожных тестов. И особенно тест показан тем лицам, у которых имеются противопоказания к проведению пробы Манту и Диаскинтеста:

• индивидуальная непереносимость туберкулина;
• кожные заболевания и аллергические состояния в период обострения;
• дети, подростки и взрослые с высоким риском развития аллергической реакции;
• инфекционные заболевания в период обострения;
• васкулиты;
• эпилепсия.

Для диагностики туберкулеза с помощью Т-СПОТ теста берут анализ крови в количестве от 2 до 8 мл в зависимости от возраста:

• Дети в возрасте до 2 лет — 2 мл;
• Дети в возрасте от 2 до 9 лет — 4 мл;
• Взрослые и дети в возрасте 10 лет и старше — 8 мл.

Для исследования берется венозная кровь утром натощак (или не менее чем через 2-4 часа после последнего приема пищи).

Обследование проводится при наличии информированного согласия законных представителей несовершеннолетних детей.

Результат Т-СПОТ теста может быть:

• отрицательным, если в организме туберкулез отсутствует;
• положительным, если организм инфицирован туберкулёзом;
• сомнительным (неопределенным), если тест не дает однозначного ответа.

Т-СПОТ — положительный результат:
«Положительный» означает текущую инфекцию, но не позволяет дифференцировать недавнее инфицирование туберкулезом от ранее произошедшего, а также оценить степень активности туберкулезного процесса. Положительный Т-СПОТ предполагает назначение КТ органов грудной клетки для исключения локального туберкулеза.

Т-СПОТ — отрицательный результат:
«Отрицательный» чаще означает отсутствие туберкулеза в организме человека, но может наблюдаться и при супрессии Т-клеточного звена иммунной системы, наступившей вследствие иммунодефицитного состояния, в том числе и при прогрессировании туберкулеза. В этом случае следует ориентироваться на результаты прямых методов исследования, подтверждающих специфическую природу заболевания.

Отрицательные результаты тестов при отсутствии клинических симптомов заболевания позволяют врачу фтизиатру выдать справку об отсутствии у ребенка в настоящий момент активного туберкулеза.

Т-СПОТ — сомнительный результат:
В редких случаях результаты теста не могут быть интерпретированы вследствие не прохождения положительного контроля теста и оцениваются как неопределенные. В этом случае нельзя не подтвердить, не исключить туберкулезную инфекцию.

Т-СПОТ.ТБ (Т-SPOT®.ТВ) следует применять и интерпретировать только совместно с общей клинической картиной. Отрицательный Т-СПОТ не исключает возможности инфицирования М. tuberculosis.

Иммунологический тест in vitro (в пробирке) T-SPOT проводится как альтернативный метод, который не входит в программу государственных гарантий по организации бесплатной медицинской помощи гражданам и проводится на платной основе.

источник