Метод исследования мокроты при туберкулезе

Туберкулез является одним из самых массовых заболеваний в мире. Это трудноизлечимая инфекционная болезнь, которая не проходит без последствий для организма и может привести к смертельному исходу. Основные клинические проявления туберкулеза – субфебрильная температура тела на протяжении нескольких недель и кашель, который сопровождается выделением мокроты, зачастую кровавой.

Анализ мокроты на выявление бактерий туберкулеза является одним из важнейших диагностических методов болезни. В случае туберкулезного воспаления, как и многих других воспалительных заболеваний дыхательной системы, «мокрый» кашель является защитным механизмом организма. При помощи этого процесса организм пытается избавиться от инфекции.

Выявлением пациентов, заболевших туберкулезом, занимаются врачи первичных лечебных заведений. Но подтверждается диагноз в специализированном противотуберкулезном учреждении. Сбор мокроты на микобактерии туберкулеза относится к обязательным диагностическим минимумам.

Симптоматика туберкулезной инфекции может не проявляться длительное время. При развитии патологии появляется сухой кашель, на смену которому приходит мокрый, с выделением патологической слизи.

Характер самого секрета может быть разным:

Изначально это вязкая, бело-гнойная мокрота, в последующем ее вязкость увеличивается.

Иногда в нем могут обнаруживаться прожилки крови, как проявление кавернозного процесса в легочной ткани.

В редких и тяжелых случаях слизистые выделения из легких могут быть представлены сплошной кровавой массой.

При активном туберкулезном инфекционно-воспалительном процессе не встречается пенистый секрет, как при бронхите или простуде.

Количество мокроты за сутки в течение всей болезни также изменяется. На пике болезни оно может достигать 300-400 мл за сутки. При этом постепенно отделение бронхиального секрета затрудняется, кашель приобретает спазматический характер. Первоначально мокрота преимущественно отходит утром, далее – в течение всего дня.

Основные методы выявления микобактерии туберкулеза в биологических жидкостях:

Согласно рекомендациям ВООЗ, забор проводят не меньше двух раз. Исследование назначают при обращении к врачу пациента с жалобами на кашель, который длится более 3 недель. После чего проводят бактериоскопическое исследование и выявляют наличие кислоустойчивых бактерий.

Существует определенная последовательность сдачи анализа мокроты при подозрении на туберкулез:

1. Всем пациентам, которые подвергаются клиническому обследованию, производят забор двух образцов секрета для микроскопии.
2. Контейнеры для сбора должны быть одноразовые с широкой горловиной, объемом не меньше 5-7 мл.

Первую порцию бронхиального секрета пациент собирает и сдает при посещении лечебного учреждения в день обращения с соответствующими жалобами.

Вторую порцию пациент собирает дома самостоятельно утром. Медицинский сотрудник должен разъяснить правила забора секрета.

При диагностическом исследовании важно знать правила сбора мокроты на туберкулез:

1. Забор материала производят в утреннее время до приема пищи – за ночь во время сна образуется большое количество мокроты, что облегчает непосредственно проведение забора выделений и повышает информативность исследования.
2. Нужно провести все гигиенические процедуры ротовой полости: почистить зубы и пополоскать слизистую рта – это проводится с целью предотвращения попадания в патологический материал остатков пищи и микрофлоры ротовой полости.
3. Перед самой процедурой не следует принимать противокашлевые лекарственные препараты, так как угнетение кашля может затруднить отхождение слизи.
4. Вечером перед сном накануне забора материала назначают препараты, которые облегчают отхождение секрета (муколитики). Если отхождение мокроты затруднено, то в таком случаем применяют ингаляционное введение разжижающих или отхаркивающих лекарственных средств.

Нужно приготовить стерильную герметическую емкость для материала.

Помещение, где проводится забор, должно быть хорошо проветрено, соответствовать санитарным нормам, быть отдаленным от большого собрания людей.

Для облегчения отхождения секрета можно выпить теплой воды. После этого хорошо откашливаются и сплевывают мокроту в контейнер. Необходимо проследить, чтобы не была сплюнута слюна.

Забором материала занимаются работники лечебных медицинских учреждений. Лучше всего сдавать мокроту под контролем медика, который определит правильность выполнения процедуры. Изучением патологического материала занимается лаборант, задача которого заключается в точном и правильном исследовании мокроты.

Мокроту для исследования на туберкулез необходимо доставить сразу же после ее забора. В крайнем случае, она хранится не более семи дней в холодильнике при температуре +3°С. При транспортировке все контейнеры плотно упаковывают в специальные биксы, фиксируя их в вертикальном положении. Должна быть защита от УФ лучей. К каждому боксу прикрепляют описание образцов ТБ-05(а), дату и номер забора.

Бактериоскопическое исследование заключается в создании мазка на предметном стекле, который проходит определенные этапы обработки. Одним из них является окрашивание по методу Циля-Нильсена. Далее проводят пересмотр 100 полей зрения. Если не обнаруживаются МБТ, то просматривают еще дополнительно 200.

Также исследуемый материал окрашивают карболовым фуксином. Затем обесцвечивают 5% раствором серной кислоты или 3% солянокислым спиртом. Затем мазок окрашивают метиленовым синим и просматривают в микроскопе с применением имерссионного масла.

Важно! Всем пациентам с подозрением на туберкулез проводят микроскопию трех различных образцов мокроты. Это может выполнить любая клиническая лаборатория. Данное исследование входит в диагностический минимум на предмет туберкулезной инфекции.

Микроскопическим методом обычно выделяют около 75% всех бактериовыделителей среди впервые заболевших туберкулезом. Важно придерживаться кратности диагностических мероприятий – это повышает выявляемость и информативность.

При своевременно проведенном бактериоскопическом исследовании можно выявить больного на начальной стадии заболевания, изолировать его, и уже в ближайшее время начать специфическую химиотерапию, что, в свою очередь, снизит вероятность возникновения осложнений.

Бактериологический метод исследования проводят при помощи таких способов, как:

• люминесцентная микроскопия мазков;
• посев мокроты на туберкулез;
• биологический способ (заражение морских свинок);
• иммуноферментное исследование;
• молекулярно-генетический способ;
• ВАСТЕС 460 – жидкостно-культуральная система;
• MGTT 960;
• амплификация нуклеиновых кислот – ПУР.

В основном эти методы относят к высоко специализированным и проводят в специальных лабораториях.

Расшифровка результатов анализа на наличие микобактерии туберкулеза заносится в форму ТБ-05 (заполняется на каждого пациента). Данное заключение содержит следующие пункты:

• название ЛПУ;
• дата заполнения;
• ФИО, возраст, пол, адрес пациента;
• причина проведения анализа (диагностика, контроль);
• номер образца и районный идентификационный номер пациента;
• дата забора мокроты;
• результаты диагностики (лабораторный порядковый номер, внешний вид мокроты, микроскопический анализ, ФИО лаборанта с подписью и датой).

Несмотря на то, что результат исследования может быть положительным, установлением окончательного диагноза занимаются фтизиатры в туберкулезном диспансере. Как правило, требуется проведение еще нескольких методов исследования, одним из которых является рентгенологический.

В зависимости от результатов микробиологического исследования, существует 4 варианта тактических действий:

1. При нахождении КУБ (кислотоустойчивых бактерий) в двух мазках бронхиального секрета больного необходимо направить в противотуберкулезный диспансер.
2. Если КУБ найдены в одном мазке из двух, необходимо провести рентгенологическое исследование. После этого больно отправляют в противотуберкулезный диспансер для уточнения диагноза.
3. Если КУБ не выявлены ни в одном из мазков, но тем не менее есть клинические проявления туберкулезной инфекции, а рентгенологически определяются очаговые или инфильтративные изменения в легких – проводят тест-терапию антибиотиками широкого спектра действия в течение двух недель. При этом нельзя назначать специфические к туберкулезному возбудителю препараты. Если терапия успешна – диагноз туберкулеза снимается. Но если терапия не дала результата, то в таком случае больного отправляют на дообследование в туберкулезный диспансер.

Мазок мокроты при туберкулезе

Если КУБ не найдены ни в одном из образцов бронхиального секрета, но в легких на рентгенограмме найдены очаги диссеминации, круглая или кольцевидная тень – то в таком случае пациента также отправляют на дообследование в диспансер.

Результаты считаются положительными и имеют определенную степень, если:

1. В каждом поле зрения определяется больше 10 КУБ – степень 3+. При этом проверяют не меньше 20 полей зрения.
2. В каждом поле зрения определяется от 1 до 10 кислотоустойчивых бактерий – степень 2+. При этом просматривают от 50 полей зрения.
3. На 100 полей определено от 10 до 99 КУБ – степень 1+. Проверяют при этом не меньше 100 полей.
4. На 300 полей определено 4-9 КУБ – недостаточно позитивный результат степень 1+. В соответствующей графе записывают конкретную цифру, например, 6/300.

Негативным считается результат, если:

1. При исследовании не меньше чем 300 полей зрения определено от 1 до 3 КУБ.
2. При исследовании 300 полей зрения не найдено ни одного КУБ.

Повторный забор проводят через несколько дней для постановки точного диагноза. Самый оптимальный вариант – трехразовая сдача. Иногда могут потребоваться дополнительные пробы. Результаты бактериологического исследования можно получить на следующий день после сдачи мокроты.

При соблюдении всех правил забора материала, техники безопасности и своевременном обращении за медицинской помощью диагностика и лечение туберкулеза не вызовет никаких затруднений.

источник

Палочки размножаются в лёгких, образуют там колонии, выделяются при кашле, именно поэтому исследование мокроты – важный диагностический этап. Лабораторная диагностика делается в основном микроскопическим, микробиологическим методом, бактерии культивируют на плотных средах Левенштейна-Йенсена или Финна-II, окрашивание выполняют по Цилю-Нильсену. Есть и другие технологии, но все они не идеальны, имеют свои преимущества и недостатки.

Туберкулёз легких называют ещё чахоткой, что является устаревшим названием. Возбудитель – различные представители вида Mycobacterium tuberculosis complex, которых ещё называют палочками Коха (в честь первооткрывателя). Бактерии туберкулёза поражают в основном лёгкие, где образуют многочисленные колонии. Именно поэтому можно исследовать мокроту на наличие возбудителя. Также они формируют туберкулы – полые узелки из соединительной ткани, внутри которых находится гной и масса бактерий.

Лабораторное исследование мокроты довольно редко проводится для обнаружения людей, заражённых туберкулёзом. Чаще применяется для подтверждения диагноза, анализа состояния пациента, подстройки лечения, дозировки при химиотерапии, контроля результатов терапии. То есть оценка мокроты является постоянным необходимым способом исследования.

К лабораторной диагностике относится множество методов:

• макроскопия;
• микроскопия;
• иммуноферментный анализ;
• флуоресцентная микроскопия;
• полимеразная цепная реакция;
• культивирование.

Показанием к исследованию мокроты лабораторными методами являются признаки туберкулёза:

• гипертермия;
• длительный продуктивный кашель;
• затемнения на флюорографии.

К достоинствам технологии относят следующие факты:

• результат можно получить достаточно быстро при ПЦР и микроскопии;
• установить точный штамм бактерии;
• проконтролировать влияние химиотерапии или антибиотиков.

Минусы анализа мокроты следующие:

• при скрытой форме туберкулёза бактерии не выделяются при кашле, из-за чего результат лабораторной диагностики будет отрицательным;
• мокроту довольно трудно собрать, для этого нужна специальная герметичная ёмкость;
• некоторые методы (культивирование) довольно длительные – более месяца.

Можно брать экссудат следующего рода:

• материал после ингаляции небулайзером;
• промыванием бронхов специальными растворами;
• мокрота из альвеол;
• получение слизи при бронхоскопии;
• взятие биоптата их трахеи, бронхов или плевры;
• мокрота из бронхов;
• мазки с гортани.

Мокроту собирают в плотно закрывающиеся стерильные и герметичные ёмкости. Это нужно для снижения вероятности занесения микробов в окружающий мир.

Ёмкости должны соответствовать следующим требованиям:

• делаться из ударопрочного материала;
• иметь хорошую прозрачность для возможности визуальной оценки качества и количества мокроты;
• расплавляться при температуре 40-45 градусов;
• иметь объём не меньше 40-50 мл;
• отверстие должно быть шире 3 см.

Результативность и достоверность исследования мокроты зависит от правильности её сбора, соблюдения рекомендаций, которые должны минимизировать вероятность загрязнения материала. Кроме того, откашливание производится в герметичной комнате, так как данная процедура опасна для всех окружающих.

При сборе материала нужно соблюдать ряд правил:

• откашливание мокроты во флакон делается до начала химиотерапии;
• также его проводят обязательно с утра, до завтрака и приёма препаратов;
• при исследовании берут 3 пробы (каждый раз откашливая в новую ёмкость) в течение 3 суток подряд;
• материал сразу же отвозят в лабораторию (в течение часа). В идеале она должна находиться в одном здании с туберкулёзным стационаром;
• при невозможности это сделать пробу ставят в холодильник при +4оС, но держать там можно не более 2 суток;
• крайне важно следить за целостностью ёмкостей. Нарушение герметичности приводит не только к порче пробы, но и к опасному заражению окружающей среды;
• объём одной пробы должен составлять 3-5 мл;
• медицинский работник обязательно одевает халат, шапку, медицинскую маску, резиновые перчатки и специальный фартук;
• больному нужно откашливать не слюну или слизь из носа и глотки, а именно мокроту из нижних отделов бронхов. Для создания продуктивного кашля можно сделать 2-3 глубоких вдоха;
• перед откашливанием рот тщательно промывают водой, чтобы удалить естественную микрофлору и кусочки пищи;
• ёмкость держат у самых губ, после откашливания мокроту сразу сплёвывают;
• медицинский работник стоит сзади больного, чтобы мокрота не попала на него. Его задача – контролировать правильность сбора материала;
• после сбора слизи флаконы сразу герметично запечатывают;
• если больному трудно откашливать мокроту, то накануне вечером, а также рано утром перед сбором слизи пациенту даёт отхаркивающие препараты.

Режим сбора материала для лабораторного анализа на туберкулёз легких зависит от стадии развития и лечения заболевания:

1. При первом поступлении в течение 3 суток делают по 3 пробы ежедневно.
2. Во время лечения ежемесячно собирают 3 пробы за раз.
3. На долечивании каждые 2-3 месяца берут 2 пробы мокроты.

Исследование мокроты делается множеством способов. У каждого метода есть свои преимущества и недостатки, выбор технологии диагностики зависит от решения врача и оснащения больницы.

Характер мокроты зависит от стадии туберкулёза лёгких:

1. При инфицировании на латентной стадии мокроты может не быть, или она имеется, но в минимальном количестве и обладает белым цветом или прозрачностью.
2. При развитии клинической стадии мокрота приобретает выраженный гнойный характер, оттенок меняется на серый, жёлтый или зелёный, появляется неприятный запах.
3. На более поздних стадиях, при появлении рецидивов в мокроте обнаруживаются прожилки крови.

Наиболее быстрый, простой и дешёвый способ оценки материала на туберкулёз легких. За счёт этого может применяться для постановки диагноза, однако он не имеет достаточно высокой надёжности, поэтому его сочетают с флюорографией. Используется для оценки состояния больного в процессе лечения.

1. Прямая микроскопия. Материал готовится непосредственно из мокроты.
2. Микроскопия осадка. Материал концентрируется с помощью центрифугирования.

Для 50% достоверности метода нужно минимум 5000 бактерий на мл мокроты.

Для увеличения надёжности способа исследуют минимум 3 пробы материала. Получение отрицательного результата не означает отсутствие туберкулёза, так как мокрота может содержать очень малое количество возбудителей из-за закрытой формы.

Окраска делается по Цилю-Нельсену:

1. В материал вносится карболовый фуксин при повышенной температуре и протравливании фенолом, который проникает во все бактерии препарата.
2. Препарат обесцвечивается 25% серной кислотой и 3% солянокислым спиртом. Из-за восково-липидной мембраны палочки Коха не подвергаются воздействию кислот, поэтому они сохраняют окраску.
3. Остальные микробы подкрашиваются 0,3% метиленовой синью. Бактерии туберкулёза не восприимчивы к анилиновым краскам, из-за этого цвет у них не меняется.

В итоге палочки Коха приобретают красный цвет, а все остальные клетки – синий. Препарат надо рассматривать через световой бинокулярный иммерсионный микроскоп с тысячекратным увеличением. Для постановки диагноза обычно хватает 100 полей зрения. При отсутствии бактерий рекомендуется просмотреть ещё 200 полей.

Метод основан на реакции антигена и антитела. Антитела – специфические иммуноглобулины, которые образуются в ответ на проникновение бактерий и вирусов. Антиген – протеины, вызывающие выработку иммуноглобулинов.

1. Берётся антитело, меченное каким-либо веществом. Оно добавляется в материал, где присутствует антитело. В ходе реакции образуется единый комплекс.
2. Добавляется фермент, который меняет цвет меченных комплексов антиген-антитело. Интенсивность окраски материала указывает на количество иммуноглобулинов.

ВАСТЕС MGIT960 – автоматизированный прибор на 960 проб, который самостоятельно проводит исследование материала. Суть метода состоит в следующем:

1. В ёмкость вносится флюоресцирующий материал, флуоресцентные свойства которого блокируются с помощью кислорода.
2. Бактерии при своей жизнедеятельности поглощают кислород, уменьшают его количество.
3. Из-за снижения концентрации усиливаются флуоресцентные свойства материала. Оно регистрируется в автоматическом режиме.

Первые результата регистрируются на 4-5 день, а для достижения максимума нужно 11 суток.

Люминесценция позволяет поднять результативность исследования на 10-15%, а требуемое время на это снизить в 2-3 раза. Применяют флуоресцентные краски: аурамин и родамин. Их действие связано со способностью вступать в реакцию с воскоподобными веществами бактериальной мембраны возбудителя. При облучении ультрафиолетом окрашенные таким способом палочки Коха начинают светиться оранжевым или красным цветом, при том, что остальной материал имеет чёрный или тёмно-зелёный оттенок.

Важно! Недостатком является сравнительно высокая стоимость метода.

Из-за того, что бактерии в препарате становятся очень яркими и контрастными, то можно уменьшить расширение микроскопа в 4-10 раз, сократив тем самым необходимое время на исследование материала. К тому же флуоресцентная окраска при соотнесении с окрашиванием по Цилю-Нельсену может дать информацию, сколько бактерий потеряло кислотоустойчивые свойства вследствие химиотерапии.

Метод основан на увеличении количества ДНК возбудителя в материале в 100-110 раз за счёт специальных ферментов. Данный способ применим лишь для тех микробов, у которых точно установлен состав нуклеотидной последовательности. В отличие от копирования ДНК в результате деления клеток при ПЦР создаются лишь обрывчатые короткие участки ДНК.

Метод имеет множество преимуществ:

• для положительного результата достаточно 10-100 бактерий в пробе;
• абсолютная специфичность, так как метод применяется для конкретной ДНК;
• результат становится известным через 4-5 часов.

Тем не менее, из-за высокой чувствительности метода возможны ложноположительные результаты, что является существенным минусом. Диагностика проводится с помощью амплификатора – специального прибора, в котором проходит реакция. Он создаёт условия для ПЦР и может использоваться для хранения препарата.

Для культивирования рекомендуется плотная среда. На западе используется состав Левенштейна-Йенсена, который даёт колонии через 15-25 суток. В России применяют среду Финна-II, которая уменьшает срок получения результата на 2-3 дня и увеличивает вероятность появления колонии на 6-8%. Однако при любой среде рекомендуется посев минимум 2-3 материалов. Связано это с тем, что даже при нескольких пробах нет точной гарантии достоверности результата. Установлено, что при 6 посевах вероятность обнаружения туберкулёза увеличивается на 7-8%.

Исследование мокроты при лечении туберкулёза – обязательное условие для контроля состояния пациента. Сбор слизи должен соответствовать всем требованиям, иначе будет портиться материал, появиться опасность заражения. Анализ можно проводить разными методами, каждый из которых имеет свои плюсы и минусы. При исследовании желательно сочетать сразу несколько технологий, чтобы повысить достоверность.

источник

Исследование мокроты на МБТ имеет важное клиническое и эпиде­миологическое значение. Обнаружение в мокроте микобактерий свидетель­ствует о том, что больной является бацилловыделителем, т.е. может выде­лять микобактерий во внешнюю среду. Такие больные представляют по­вышенную опасность для окружающих здоровых людей.

Мокроту лучше собирать утром, предварительно прополоскав рот, чтобы в ней было меньше слюны. При малом количестве мокроты ее соби­рают в течение суток. При отсутствии мокроты используют раздражающие ингаляции аэрозолями гипертонических растворов (например, поваренная соль с содой) для ее появления.

Исследование мокроты начинают с ее осмотра. При кровохарканье в мокроте обнаруживают прожилки или сгустки крови. Также в мокроте могут обнаруживаться кусочки бронхиолитов — обызвествленных камней бронхов.

При микроскопии мокроты в ней могут выявляться эритроциты, лей­коциты, эпителий, альвеолярные клетки, пылевые клетки, цилиндрический и плоский эпителий, известковые соли, кристаллы холестерина, эластиче­ские волокна.

Наибольшее значение имеет обнаружение в мокроте эластических во­локон. Эластические волокна выделяются из легких в виде пучков различ­ной величины, сохраняющих очертания альвеол, без сохранения альвео­лярного строения или в виде небольших обрывков. Кроме того, в мокроте могут обнаруживаться так называемые коралловидные волокна (волокна Коппена-Джонса) — толстые, шероховатые образования, которые образу­ются в результате отложения на эластических волокнах жирных кислот. Могут также выявляться обызвествленные волокна.

Наличие эластических волокон в мокроте указывает на разрушение легочной ткани. При свежем распаде пучки волокон сохраняют альвеоляр­ное строение, при пролиферативных формах туберкулеза альвеолярное строение не сохраняется. Коралловидные волокна появляются в основном в случаях старого туберкулеза, обызвествленные волокна — при распаде обызвествленных очагов во время обострения процесса.

В мокроте больных туберкулезом можно обнаружить известковые со­ли (в основном карбонаты и сульфаты). Они попадают в мокроту чаще всего из старых, распадающихся обызвествленных очагов.

Кристаллы холестерина, как правило, свидетельствуют о наличии в легких старых каверн.

В ряде случаев в мокроте может обнаруживаться так называемая «тетрада Эрлиха»:

Обызвествленные эластические волокна

Известь в виде кристаллических и аморфных образований

Обнаружение в мокроте тетрады Эрлиха свидетельствует об обо­стрении старого туберкулезного процесса.

Исследование мокроты также проводится бактериоскопическим, бак­териологическим и биологическим методами — см. предыдущий вопрос.

Исследование плевральной жидкости в основном применяется для диагностики туберкулезного плеврита.

Прозрачный светло-желтого цвета, с нитями фибрина экссудат назы­вают серозным. Содержание белка в нем колеблется в пределах 40-60 г/л. В начальном периоде острой фазы серозного плеврита в клеточном составе 50.-60% нейтрофилов, 15-25% лимфоцитов, также обнаруживаются эритро­циты, базофилы, мезотелиальные клетки.

При стабилизации или стихании воспаления в экссудате превалируют лимфоциты (90-95%). Увеличение в экссудате количества нейтрофилов и уменьшение лимфоцитов свидетельствует о нагноении экссудата.

Исследование ликвора имеет важное значение в диагностике туберку­лезного менингита.

В норме При туберкулезном менингите

Прозрачная, бесцветная, может слегка опалесцировать, при стоя­нии через 12-24 ч образуется паутинообразная пленка

Характер истече­ния при пункции

50-60 капель в минуту (при нор­мальном давлении в спинномозговом канале — 120-200 мм вод. ст.)

Вытекает очень частыми каплями или струей (вследствие повыше­ния давления)

Реакции Панди и Нонне-Апельта

Количество кле­ток в 1 мкл (цитоз)

Значительно повышено — 100-150 и больше. Вначале цитоз ней-трофильно-лимфоцитарный, поз­же — лимфоцитарный

Резко снижено. Степень сниже­ния пропорциональна тяжести менингита

источник

Ф.В. Шебанов

Начиная с открытия Коха, длительное время основным и наиболее распространенным методом выявления микобактерии туберкулеза являлась бактериоскопия. В настоящее время метод бактериоскопии считается недостаточным для диагностики туберкулеза. В практической работе противотуберкулезных учреждений необходимо чаще применять посев исследуемого материала на питательную среду, т. е. бактериологический метод. Кроме бактериоскопии и метода посева, необходимо в ряде случаев использовать и прививки лабораторным животным, т. е. биологический метод.

Микобактерии туберкулеза можно обнаружить в различном материале, полученном от больного. Таким материалом является прежде всего мокрота. С усовершенствованием лабораторных методов удается обнаружить микобактерии туберкулеза в мокроте при незначительных изменениях в легких, а в ряде случаев — и без видимых на рентгенограмме туберкулезных поражений в легких.

При отсутствии мокроты или невозможности получения мокроты исследуют промывные воды желудка. Этот способ после работ Арман-Делилля [Armand-Delill, 1927] имеет широкое применение в практике противотуберкулезных учреждений. Предполагали, что микобактерии туберкулеза попадают с мокротой в желудок как у взрослых, так и особенно у детей, страдающих легочным туберкулезом. Исследования и клинические наблюдения, проведенные в СССР и за рубежом, показали, что микобактерии туберкулеза в промывных водах желудка можно обнаружить не только при легочном, но и при внелегочном туберкулезе (кожи, костей, глаз, лимфатических узлов). Эти наблюдения доказывают возможность поступления микобактерии туберкулеза в желудок лимфогематогенным путем независимо от локализации туберкулезного процесса.

При отсутствии мокроты можно исследовать, кроме промывных вод желудка, слизь из гортани, а также промывные воды бронхов. Для этого больному натощак после предварительной анестезии дыхательных путей 1% раствором дикаина орошают гортань подогретым изотоническим раствором хлорида натрия (10—15 мл) с помощью гортанного шприца. При этом необходимо создать такое положение больного, которое способствовало бы попаданию раствора в бронхи пораженного легкого. Изотопический раствор хлорида натрия, раздражая слизистую оболочку бронха, вызывает усиленное отделение слизи. Выделяемые при откашливании больным промывные воды бронха собирают в стерильный сосуд и подвергают дальнейшему исследованию.

Можно исследовать микобактерии туберкулеза, выделенные в фекальных массах, но при обнаружении в них микобактерий туберкулеза трудно решить вопрос, из каких органов последние выделяются. Исследовать можно также мочу, спинномозговую жидкость, другие биологические жидкости и патологический материал.

Бактериоскопические методы выявления микобактерий включают: обычную бактериоскопию мазков, окрашенных по Цилю — Нильсену, флотацию и люминесцентную микроскопию.

Обычная бактериоскопия. В мазках, окрашенных по Цилю — Нильсену, микобактерии туберкулеза могут быть обнаружены только при наличии не менее 50000 бактериальных клеток в 1 мл патологического материала (предел чувствительности метода), причем тогда, когда микобактерии не изменены тинкториально или морфологически под влиянием антибактериальных препаратов (при лечении больного).

Для приготовления мазков мокроту выливают в чашку Петри и заостренными деревянными палочками из 5—6 участков выбирают гнойные комочки на два предметных стекла для приготовления мазков. Один препарат используют для исследования на эластические волокна. На другом стекле комочки мокроты растирают третьим стеклом и получают таким образом два препарата, один из которых окрашивают по Цилю — Нильсену, а второй, например, флюорохромными красками, если имеется возможность произвести люминесцентную микроскопию. При окраске по Цилю — Нильсену на препарат наливают карболовый фуксин, подогревают до появления паров, обесцвечивают 6% раствором серной кислоты или 3% солянокислым алкоголем и докрашивают 0,25% раствором метиленового синего.

Окрашенные мазки микроскопируют с иммерсионной системой. При этом микобактерии туберкулеза выглядят красными на синем фоне. Типичные микобактерии имеют вид тонких, прямых или слегка изогнутых зернистых палочек. Количество микобактерий туберкулеза, обнаруживаемых методом бактериоскопии в мокроте больного, зависит от многих причин и может колебаться в различных пределах. Учитывая возможные случайности и затруднения для определения количества микобактерий туберкулеза, мокроту больного рекомендуется исследовать повторно.

С введением в практику бактериостатических средств, препятствующих росту и размножению микобактерий туберкулеза в организме больного, определение количества их в мокроте в период лечения может быть относительным критерием эффективности антибактериальной терапии, учитывать который необходимо в комплексе с клиническими, рентгенологическими и другими лабораторными исследованиями. При отрицательных результатах бактериоскопии мокроты больных туберкулезом или лиц, подозрительных на туберкулез, рекомендуется производить повторные исследования мокроты 4—5 дней подряд или гомогенизировать мокроту при помощи химических веществ, т. е. превращать в однородную массу, и центрифугировать ее с целью концентрации микобактерий туберкулеза в небольшом объеме.

В мокроте могут быть различные форменные элементы: лейкоциты, эритроциты, эпителий, альвеолярные клетки, пылевые клетки, цилиндрический мерцательный эпителий, эластические волокна, известковые соли, кристаллы холестерина. Плоский эпителий может исходить из полости рта, глотки, гортани. У лиц, вдыхающих угольную пыль и дым, в мокроте обнаруживаются пылевые клетки. Цилиндрический эпителий может включаться в мокроту при прохождении последней через бронхи и трахею. Эритроциты, единичные и неизмененные, могут попадать в мокроту из поврежденных десен и носоглотки, но наличие эритроцитов в мокроте может быть и вследствие кровохарканья.

Большое значение имеет обнаружение в мокроте эластических волокон. Эластические волокна выделяются из легких в виде петлистых пучков разной величины, сохраняющих очертания легочной альвеолы, остов стенок которой они составляют, в виде паучков разной величины, не имеющих петлистого строения («без сохранения альвеолярного строения»), или в виде небольших обрывков. В мокроте могут быть, кроме описанных, эластические волокна Коппена— Джонса, или коралловидные. Они представляются толстыми, шероховатыми образованиями, заканчивающимися колбасообразно. Можно обнаружить и обызвествленные эластические волокна.

Наличие эластических волокон в мокроте указывает на разрушение легочной ткани. При свежем распаде пучки волокон сохраняют альвеолярное строение, при пролиферативных формах туберкулеза эластические волокна выделяются в виде пучков без сохранения альвеолярного строения. Волокна могут выделяться при всех формах туберкулеза, волокна Коппена — Джонса появляются преимущественно в случаях старого туберкулеза. Обызвествленные волокна можно видеть при распаде обызвествленных очагов во время обострения процесса. Необходимо иметь в виду, что эластические волокна также можно обнаружить и при ряде нетуберкулезных заболеваний легких, например при абсцессе легких.

Для исследования мокроты на присутствие эластических волокон выбирают из разных мест мокроты маленькие гнойные частицы, кладут их на середину предметного стекла, не размазывая, и сейчас же покрывают покровным стеклом, чтобы они не высохли. Надавливая на середину покровного стекла тупым инструментом, мокроту распределяют тонким слоем, причем после надавливания мокрота не должна выступать за края покровного стекла. Просматривать препараты следует при малом увеличении, а изучать «подозрительные» места после установки их в центре поля зрения необходимо при большом увеличении.

В мокроте больных туберкулезом можно обнаруживать известковые соли (карбонаты и сульфаты), имеющие под микроскопом вид темных зерен разной величины. Попадают они в мокроту чаще всего из старых, распадающихся обезвествленных очагов. Известковые соли от прибавления разведенной азотной кислоты растворяются. Кристаллы холестерина в мокроте имеют вид нежных пластинок разной величины, большей частью с обломанными краями. Эти кристаллы обнаруживаются при наличии в легких старых каверн.

Тетрада Эрлиха. С. Д. Эрлих при патологоанатомических исследованиях обнаружил в ткани легких элементы, совокупность которых он назвал «тетрадой», т. е. наличием четырех признаков, а именно:

1. обызвествленные эластические волокна;
2. кристаллы холестерина;
3. известь в виде кристаллических и аморфных образований;
4. микобактерии туберкулеза.

Обнаружение в мокроте тетрады Эрлиха свидетельствует об обострении старого туберкулезного процесса в легких.

Метод флотации. Этот метод применяется в случаях скудного содержания микобактерий туберкулеза в исследуемом материале и при отрицательном результате бактериоскопии. По сравнению с обычной бактериоскопией микобактерии туберкулеза обнаруживаются методом флотации в патологическом материале примерно на 10—15% чаще. Для исследования методом флотации мокроту в количестве 12—15 мл помещают в колбу емкостью 250 мл, добавляют примерно равное количество 0,5% раствора едкого натра или кали и для лучшей гомогенизации встряхивают в течение 5—-10 мин, затем до половины емкости колбы наливают дистиллированную воду с добавлением 0,5 мл ксилола или бензина.

Все содержимое встряхивают 5—10 мин, после чего доливают дистиллированную воду до окончательного объема — 250 мл. Спустя 30—60 мин капельки бензина (ксилола) всплывают на поверхность, увлекая за собой микобактерии туберкулеза, концентрируя их в небольшом объеме образовавшегося на поверхности кольца. Полученное флотационное кольцо пипеткой переносят на два предметных стекла. Один препарат окрашивают по Цилю — Нильсену. При флотации промывных вод, гноя, экссудата, спинномозговой жидкости и другого материала, не требующих гомогенизации, к ним добавляют меньшее количество раствора щелочи (от 1—2 капель до 1—2 мл в зависимости от количества материала). В дальнейшем поступают так же, как при флотации мокроты.

Люминесцентная микроскопия. Метод люминесцентной микроскопии основан на способности микобактерий туберкулеза, окрашенных флюорохромами, светиться под воздействием сине-фиолетовых лучей. Этот метод позволяет дополнительно выявлять микобактерии туберкулеза на 17% чаще по сравнению с обычной бактериоскопией и на 8% чаще по сравнению с методом флотации. При люминесцентной микроскопии исследование производится при малом увеличении, что расширяет поле зрения и способствует обнаружению микобактерий туберкулеза, содержащихся в исследуемом материале в небольшом количестве.

Для люминесцентного исследования пользуются либо специальным микроскопом (МЛ-1 и МЛ-2), либо обычным микроскопом типа МБИ-1 с добавочным осветителем. Ко всем комплектам осветительной аппаратуры прилагаются наборы необходимых светофильтров. Люминесцентным методом исследуют различный патологический материал. Фиксированные над пламенем препараты окрашивают при легком подогревании в течение 15 мин специальной смесью: аурамин 00—0,5 г, радомин С —0,05 г на 1000 мл дистиллированной воды. Затем мазок промывают водой и в течение полминуты обесцвечивают 3% солянокислым спиртом, снова промывают водой и докрашивают для гашения фона 0,25% раствором метиленового синего. При люминесцентной микроскопии микобактерии флюоресцируют золотисто-желтым цветом на темпом нефлюоресцирующем фоне. Этот метод в настоящее время находит широкое применение.

Больной туберкулезом в процессе антибактериального лечения может выделять микобактерии туберкулеза, измененные морфологически и в небольшом количестве, что не позволяет обнаружить их бактериоскопическими методами (обычная бактериоскопия, метод флотации, люминесцентная микроскопия). Поэтому в комплекс исследований, направленных на обнаружение микобактерий туберкулеза, в настоящее время обязательно включается посев патологического материала. Выделение культур микобактерий туберкулеза позволяет определить жизнеспособность возбудителя, его лекарственную чувствительность, ферментативную активность и вирулентность. Для бактериологического исследования может быть использован любой патологический материал.

Поскольку обычно в посевном материале содержится и неспецифическая микрофлора, требуется его так обработать, чтобы уничтожить сопутствующую микрофлору и сохранить при этом жизнеспособность микобактерий туберкулеза. В последние годы в связи с широким применением противотуберкулезных препаратов в 19—20% случаев наблюдается диссоциация между обнаружением микобактерий туберкулеза при бактериоскопическом исследовании и ростом их при посеве патологического материала. Это явление заключается в том, что видимые под микроскопом, они не растут на питательных средах. Такая диссоциация обусловлена воздействием на микобактерии туберкулеза лекарственных препаратов.

Биологическая проба. Наиболее чувствительным методом обнаружения микобактерий туберкулеза является заражение морских свинок. Однако не всегда удается получить развитие генерализованного туберкулеза в тех случаях, когда в патологическом материале содержатся микобактерии туберкулеза, устойчивые к препаратам гидразида изоникотиновой кислоты. В таких случаях микобактерии оказываются невирулентными для этих животных, и тогда при положительном результате посева патологического материала имеет место отрицательный исход заражения. При развитии туберкулезного процесса после подкожного заражения в области введения материала к концу месяца прощупываются увеличенные лимфатические узлы. Аллергические реакции определяются при внутрикожном введении 0,1 мл АТК 1:Ю. При положительной биологической пробе у морских свинок развивается генерализованный туберкулез.

Определение лекарственной чувствительности производится путем посева выделенной от больного культуры микобактерий туберкулеза на питательные среды (полусинтетические, кровяные или плотные), содержащие различные концентрации антибактериальных препаратов. Если в патологическом материале имеется значительное количество микобактерий (определяемое бактериоскопически), рекомендуется прямое определение чувствительности, т. е. непосредственный посев на среды с антибактериальными препаратами соответственно обработанного патологического материала. Лекарственно-чувствительные микобактерии растут лишь в определенных для того или иного препарата пределах концентраций. Микобактерии, растущие при большем содержании препарата в питательной среде, относятся к лекарственно-устойчивым.

источник

Мокрота является секретом, выделяющимся при воспалении трахеи, бронхов и легких. Ее появление отмечается не только при поражении дыхательных органов, но и при нарушениях сердца и сосудов. Методы исследования мокроты подразумевают макроскопическое, химическое и микроскопическое определение ее характеристик.

Исследование мокроты дает возможность обнаружить микроорганизмы, вызывающие патологический процесс, обозначить наличие микобактерии при туберкулезе, выявить раковые клетки, кровяные и гнойные примеси, а также определить резистентность бактерий к антибиотикам.

Исследование мокроты на общий анализ проводится при следующих состояниях:

• кашель;
• воспаление легких;
• воспаление бронхов;
• нагноение легкого;
• туберкулез;
• бронхоэктатическая болезнь;
• легочная гангрена;
• опухоль в легких;
• бронхит в острой форме;
• бронхит в хронической форме;
• тонзиллит в хронической форме;
• туберкулез;
• коклюш;
• силикоз;
• острая форма обструктивного бронхита;
• воспаление легких;
• сибирская язва.

Слизь будет лучше выделяться, если накануне перед сдачей анализа принять средство для отхаркивания или же употребить большое количество теплого питья. Перед сбором рекомендуется почистить зубы и ротовую полость, прополоскав ее теплой вскипяченной водой.

Сбор мокроты на бактериологическое исследование желательно производить в утренние часы (она скапливается за ночь до приема пищи) в стерильный контейнер, который выдается лабораторией. Для анализа достаточно количества 5 мл. Анализ секрета производится не позднее, чем через 2 часа после его сбора. До момента отправки на исследование контейнер с содержимым должен храниться закрытым в холодильнике.

Количество выделяемого секрета разнится в зависимости от характера патологического процесса. Обычно оно варьируется от нескольких плевков до 1 л за сутки. Малое количество выделяется при воспалении бронхов, застойных процессах легких и при начале приступа бронхиальной астмы. В конце приступа объем возрастает. Он может составлять до 0,5 л, а также выделяться в большом количестве, если имеется отек легких.

Много слизи выделяется при гнойном процессе в легких при сообщении с бронхами, при нагноении, бронхоэктазе и гангрене.

Исследование мокроты на туберкулез показывает распад тканей легких. В особенности такой процесс провоцирует каверна, которая сообщается с бронхами.

Увеличение количества выделяемого секрета может быть сопряжено с ухудшением состояния пациента и наблюдаться в период обострения. Увеличение может относиться и к положительной динамике развития болезни.

Уменьшение количества выделяемой слизи может свидетельствовать о регрессе воспаления или же нарушении в области дренирования полости, наполненной гноем. При этом отмечается ухудшение самочувствия больного.

Слизистый секрет выделяется при бронхитах в острой или хронической форме, бронхиальной астме, пневмонии, онкологической опухоли легкого, бронхоэктатической болезни, эхинококкозе легкого, сопровождающемся нагноением, актиномикозе.

Мокрота с примесью гноя наблюдается при абсцессе легкого, эхинококкозе и бронхоэктатической болезни.

Слизь с примесью крови или же состоящая полностью из крови присуща туберкулезу. Появление крови может свидетельствовать о наличии онкологии, бронхоэктатической болезни, нагноении легкого. Также такое явление наблюдается при синдроме средней доли, инфаркте в легком, травме, актиномикозе и сифилитическом поражении. Кровь может выделяться и при крупозном и очаговом воспалении легких, застойных процессах, сердечной астме и отечности легких.

Серозная мокрота отмечается при отечности легких.

Исследование мокроты выявляет ее различную окрашенность. Слизистые и серозные выделения не обладают цветом или же имеют беловатый оттенок.

Присоединение гноя придает секрету зеленоватый оттенок, что характеризует такие патологические процессы, как абсцесс легкого, гангрена, бронхоэктатическая болезнь, актиномикоз легкого.

Выделения с оттенком ржавчины или коричневого цвета указывают на то, что в них содержится не свежая кровь, а продукт ее распада — гематин. Такой секрет может выделяться при крупозном воспалении легких, сибирской язве, инфаркте легкого.

Зеленоватый цвет с примесью грязи или же желтый секрет свидетельствует о патологии органов дыхания в сочетании с желтухой.

В ярко-желтый цвет мокрота окрашивается при эозинофильной пневмонии.

Слизь цвета охры встречается при сидерозе легкого.

Черноватый или сероватый секрет отмечается при наличии примеси пыли от угля. При отеке легких серозная мокрота наблюдается в большом количестве. Как правило, она окрашена равномерно в розоватый цвет, что объясняется наличием эритроцитов. Такие выделения похожи на жидкий клюквенный морс.

Окрашиваться секрет может и от некоторых лекарственных препаратов. К примеру, антибиотик «Рифампицин» может придать ему красный цвет.

О характере патологического процесса в органах дыхания может свидетельствовать и запах секрета. Мокрота отдает запахом гнили при гангрене легкого или гнилостном поражении бронхов, онкологических новообразованиях, осложнившемся некрозе бронхоэктатической болезни.

Зачастую исследование выделений выявляет наличие слоев. При застойном характере мокрота с примесью гноя наблюдается при нагноении легкого и бронхоэктатической болезни.

Секрет с примесью гнили содержит в себе три слоя. Верхний слой похож на пену, средний серозный, а нижний с примесью гноя. Такой состав характеризует гангрену легкого.

Примесь пищи может отмечаться при наличии злокачественной опухоли в пищеводе при сообщении его с бронхами и трахеей. При попадании эхинококка в бронхи в мокроте могут быть обнаружены крючья или сколекс паразита. Очень редко обнаруживаются взрослые особи аскарид, которые проникают в органы дыхания у ослабленных людей.

Яйца легочной двуустки появляются при разрыве кисты, которая образуется в легких при наличии паразитов.

Гангрена и нагноение легких вызывают появление кусочков некрозов легких. При опухоли в выделениях могут присутствовать их фрагменты.

Свертки, содержащие фибрин, встречаются у пациентов с фибринозным бронхитом, туберкулезом и пневмонией.

Рисовые тельца, или линзы Коха, присущи туберкулезу.

Пробки Дитриха, включающие в себя продукты распада бактерий и ткани легких клеток жирных кислот, встречаются при гнилостном бронхите или же гангрене легкого.

Хроническая форма тонзиллита предполагает выделение из миндалин пробок, схожих с пробками Дитриха.

Исследование мокроты химическим способом предполагает определение:

• Показателя белка, который может помочь в дифференциальной диагностике хронической формы бронхита и туберкулеза. При бронхите хронической формы в секрете отмечаются следы белка, а при туберкулезном поражении количество белка в мокроте будет намного выше, и оно может быть обозначено цифрами (до 100—120 г/л).
• Пигментов желчи. Они обнаруживаются в мокроте при поражении органов дыхания в сочетании с гепатитом. В этом случае печень сообщается с легкими. Желчные пигменты присущи пневмонии, что обусловлено распадом внутри легких эритроцитов и последующим изменением гемоглобина.

Для дифференциальной диагностики туберкулеза и многих других поражений легких широко применяется цитологический способ, который включает два этапа: клиническое и микроскопическое исследование мокроты.

Клиническое исследование помогает определить, каким методом должен быть собран материал для получения правильного результата анализа.

Существует два основных вида материала, которых требует микроскопическое исследование мокроты: спонтанный и редуцированный. Второй вид секрета получают воздействием разнообразных раздражителей (средства для отхаркивания, ингаляции и т. д.).

Цитологическое исследование мокроты предполагает изучение макроскопического и микроскопического анализа ее клеток.

Больше всего информации для цитологического анализа несет мокрота, взятая утром на голодный желудок. До исследования она должна храниться не больше 4 часов.

• В мокроте встречаются клетки плоского эпителия, которые исследуются микроскопически. Но для постановки диагноза они не имеют никакого значения. Клетки цилиндрического эпителия — как единичные, так и в группе — могут отмечаться при таких заболеваниях, как бронхиальная астма, бронхит и рак легких. Следует отметить, что цилиндрический эпителий может появиться и по причине проникновения слизи из носоглотки.
• Альвеолярные макрофаги представляют собой клетки ретикулоэндотелия. Макрофаги, которые содержатся в протоплазме (фагоцитирующие частицы или пылевые клетки), можно встретить у пациентов, которые длительное время вдыхали пыль.
• Макрофаги протоплазмы (образуются при распаде гемоглобина) называют клетками сердечного порока. Они могут встречаться во время застойных процессов в легких, стенозе митрального клапана, инфаркте легких.

• Небольшое количество лейкоцитов содержится в любой мокроте. Их повышенное содержание отмечается в секрете с примесью гноя.
• Эозинофилы. Такими клетками богата мокрота у астматиков. Клетки могут отмечаться при эозинофильной форме воспаления легких, поражении организма гельминтами, туберкулезе и инфаркте легкого.
• Эритроциты. Единичные эритроциты не отображают картины заболевания. Появление повышенного количества свидетельствует о наличии кровотечения в легких. В свежей крови определяются неизменные эритроциты. Если же есть примесь крови, которая застоялась в легких в течение долгого времени, то обнаруживаются выщелоченные эритроциты.
• Раковые клетки. Их можно обнаружить в секрете группами. Они свидетельствуют о наличии опухоли. При нахождении единичных клеток часто возникает трудность при диагностике. В таких случаях проводится повторный анализ мокроты.
• Эластические волокна, появление которых вызвано распадом легочной ткани, спровоцированным туберкулезом, абсцессом, гангреной, опухолью. Гангрену такие клетки характеризуют не всегда, так как из-за действия ферментов, находящихся в секрете, они могут быть растворены.
• Спирали Куршмана. Это особые тела, похожие на трубки. Они обнаруживаются при исследовании под микроскопом. Иногда заметны и глазом. Обычно спирали присущи таким заболеваниям, как бронхиальная астма, туберкулез легких и пневмония.
• Кристаллы Шарко-Лейдена обнаруживаются в мокроте с повышенным содержанием эозинофилов при таких поражениях, как бронхиальная астма, эозинофильная пневмония. Вскрытие очага туберкулеза в просвете бронхов может характеризоваться наличием в секрете эластических волокон-кристаллов ХС, МБТ и аморфной извести (так называемая тетрада Эрлиха) — 100%.

Сбор мокроты для исследования бактериоскопическим методом подразумевает анализ секрета на предмет обнаружения в нем микобактерий, характерных для туберкулеза. Они похожи на тонкие, утолщенные по бокам или же посередине кривые палочки разной длины, которые располагаются как поодиночке, так и группами.

Обнаружение микобактерии туберкулеза не является доминантным признаком для диагностики и требует подтверждения бактериологическим способом. Туберкулезные микобактерии при норме в секрете не обнаруживаются.

Основой для анализа служат гнойные частицы, которые берутся из сорока шести различных областей и тщательно растираются до однородной массы двумя стеклами. Далее они сушатся на воздухе и фиксируются пламенем горелки.

Бактериологическое исследование мокроты методом Циля-Нильсена предполагает ее окрашивание в красный цвет. При этом все частицы секрета, за исключением микобактерии, приобретают синий оттенок, а микобактерии приобретают красный цвет.

При подозрении на поражение организма туберкулезом после трехкратного исследования на наличие микобактерий с отрицательным ответом прибегают к применению метода флотации (анализ Поттенджера).

Обычный способ исследования окрашенного мазка на МТБ дает положительный результат только при количестве МТБ не менее 50 000 единиц в 1 мл мокроты. По числу микобактерий судить о наличии туберкулеза нельзя.

Лабораторные исследования мокроты при наличии неспецифических заболеваний легких при бактериоскопии могут выявить следующие бактерии:

• При воспалении легких — пневмококки, диплококки Френкеля, бактерии Фридлендера, стрептококки, стафилококки (100%).
• При гангрене легких можно обнаружить веретенообразную палочку в сочетании со спирохетой Венсана (80%).
• Дрожжеподобные грибы (70%), для выяснения вида которых требуется посев секрета.
• Друзы актиномицета (100%) при актиномикозе.

Объем слизи, выделяемой трахеей и бронхами у человека, не страдающего никакими патологиями, колеблется от 10 до 100 мл/сут.

В норме уровень лейкоцитов невысок, а исследование окрашенного мазка на микобактерии дает отрицательный результат.

источник