Положительный результат мокроты на туберкулез

Анализ мокроты на туберкулез: отрицательный и положительный.

Туберкулез и пути распространения инфекции.

Туберкулез – инфекционное заболевание, которое вызывается микобактериями туберкулеза, кислотоустойчивыми грамположительными палочками.

В наше время эта болезнь настолько распространена, что приобрела характер эпидемии.

Туберкулез – это болезнь, которая поражает не только органы дыхания, как мы привыкли думать, под прицелом микобактерий также могут оказаться почки, кости, кишечник, мозг.

Заболеваемость среди людей, которые имели непосредственный длительный контакт с бактериовыделителями, в 3-5 раз больше, чем среди людей, у которых таких контактов не наблюдалось.

Также большая заболеваемость обнаруживается среди детей, которые имели постоянные контакты с бактериовыделителями.

Микобактерии туберкулеза способны проникать в организм человека различными путями, а именно — воздушно-капельным и пылевым – так называемым « аэрогенным», алиментарным (с продуктами питания, которые получили от животных, болеющих туберкулезом), контактным и герминативным (внутриутробно).

Как известно, основной путь передачи возбудителей туберкулеза — аэрогенный, что составляет 95-97% всех заражений туберкулезом.

То есть, микобактерии от больного человека могут распространяться с его слюной во время разговора, чиханья, кашля.

Но не стоит бояться таких людей, нет необходимости ездить в общественном транспорте в марлевой маске и избегать любых контактов, ведь вероятность заражения зависит от формы туберкулеза, а также количества возбудителей в единице объема воздуха и восприимчивости вашего организма.

Ведь наш иммунитет для того и существует, чтобы быть на страже и уничтожать всех патогенных микробов, которые атакуют организм.

К тому же попадание возбудителя в организм обуславливает заражение, но не во всех случаях вызывает заболевание.

Как известно, для передачи инфекции необходимо, чтобы туберкулезный больной выделял заразные частички в воздух, это возможно, как правило, при туберкулезе органов дыхания.

Но не все больные одинаковой мерой могут распространять болезнь.

Прежде всего это будет зависеть от количества микобактерий в бронхиальном секрете больного.

Причем существует прямая корреляция между количеством микобактерий туберкулеза в мокроте и контагиозностью, то есть, степенью заражения.

Мокрота больного – это смесь бронхиального секрета, слюны, а также некротизированной легочной ткани.

Для получения адекватных результатов анализа, необходимо правильно собрать мокроту.

Обычно она собирается утром, после полоскания рта, путем откашливания содержимого верхних дыхательных путей в стерильную емкость. Если мокроты мало, ее собирают на протяжении дня.

Начинают анализ мокроты с макроскопического исследования, то есть, оценивают ее количество, характер (слизистый, гнойный, слизисто-гнойный, кровянистый), запах, гомогенность.

У туберкулезных больных мокрота обычно слизистая, без запаха и патологических примесей.

После макроскопического анализа, проводят микроскопический анализ мокроты.

Каким же методом можно определить наличие или отсутствие возбудителей туберкулеза в мокроте больного?

Прежде всего это бактериоскопическое исследование. Готовят мазок мокроты больного, проводят окрашивание по Цилю-Нильсену, высушивают и исследуют под микроскопом.

Этот метод помогает выявить микобактерии при том условии, что в 1 мл мокроты содержится от 5000 до 10000 бактерий.

При незначительном содержании микробов, этот метод не является достаточно эффективным.

Бактериоскопию проводят на протяжении трех дней, после чего применяют метод флотации.

Данный метод основывается на том, что готовят суспензию углеводородов (ксилол, бензол) и мокроты больного.

Таким образом, на поверхности оказывается пена с микобактериями, ее снимают и наносят на предметное стекло около 5-6 раз, затем окрашивают по Цилю-Нильсену и исследуют под микроскопом.

Этот способ увеличивает чувствительность метода бактериоскопии на 10-13%.

Большей эффективностью обладает метод люминисцентной бактериоскопии, суть которого состоит в том, что микобактерии окрашивают специальными красителями — флюорохромами, после чего первые приобретают способность светиться в ультрафиолетовом свете.

Такой метод, как фазово-контрастная микроскопия, позволяет обнаруживать и исследовать палочки туберкулеза и их формы в нативном состоянии.

Для выполнения этого исследования необходимо специальное фазово-контрастное оборудование.

Цитологический метод исследования делает возможным выявление в мокроте нейтрофилов, мононуклеаров, казеозного некроза и гигантских клеток Лангханса, которые свидетельствуют о специфическом типе воспаления в легочной ткани.

В случае недостаточного количества мокроты, или ее отсутствия, больному показаны раздражающие ингаляции 15 %-ного раствора хлорида натрия в 1%-ном растворе соды, либо смыв с бронхов.

В последнем случае больному выполняют анестезию корня языка и задней стенки глотки раствором анестетика, затем шприцем вливают в трахею 10-15 мл 0,9%-ного раствора хлорида натрия.

У больного рефлекторно начинается кашель, и он выкашливает изотонический раствор в чашку Петри.

Затем проводят бактериоскопию и дальнейшее изучение биоматериала.

Следующий метод, который используют для анализа мокроты – бактериологический.

Его суть состоит в посеве исследуемого материала на питательные среды с дальнейшей дифференциацией микобактерий, определением чувствительности выделенных микробов к противотуберкулезным препаратам.

Его недостаток состоит в том, что первые колонии на питательной среде могут появиться лишь спустя 2-3 месяца, что значительно затрудняет диагностический поиск.

Как бактериоскопический, так и бактериологический анализ мокроты проводят трехкратно (3 дня подряд) до начала противотуберкулезной терапии.

Еще одним методом анализа является биологический метод. При этом патологический материал от больного прививается лабораторным животным, например в брюшную полость.

Если в материале присутствовали микобактерии, животные заболевают туберкулезом и гибнут через несколько месяцев.

К более быстрым методам определения возбудителей туберкулеза в исследуемого материале является метод индикаторной пробирки BBL MGIT (Micobacteria Growth Indicator Tube).

Такие пробирки содержат питательный бульон и флюоресцентное вещество, микобактерии поглощают кислород с бульона, соединение реагирует на уровень кислорода в пробирке и наблюдается явление флюоресценции.

Изначальный уровень кислорода в пробирке свечения не вызывает.

Сегодня достаточно эффективными являются методы молекулярной диагностики, такие как ПЦР-диагностика и метод ДНК-зондов.

Основаны на выявлении мельчайших частиц ДНК возбудителей в исследуемом материале. Эти методы имеют наибольшую чувствительность и позволяют выявить микроорганизмы в течение короткого времени (от 2 часов до 2 суток).

Так же в стадии исследований сейчас находятся методы выявления возбудителей туберкулеза с помощью моноклональных антител, что так же является более быстрым способом, чем тот же бактериологический метод.

На сегодняшний день методы, позволяющие определять наличие микобактерий в организме человека, постоянно разрабатываются и совершенствуются, что в скором времени приведет к улучшению диагностики, а таким образом и лечения туберкулеза.

источник

В здоровом организме бронхи вырабатывают слизь без цвета и запаха, которая необходима для того, чтобы очищать дыхательные пути от попадающих туда микроскопических частичек пыли, вдыхаемого мусора и микробов. Механизм очищения органов дыхания очень прост: реснички эпителия, устилающего их, поднимают слизь наверх вместе с чужеродными частицами. В норме такой мокроты вырабатывается очень мало, поэтому здоровый человек не замечает ее отделения, и она проглатывается вместе со слюной.

Но на фоне любого воспалительного процесса, сопровождающего, какое-либо заболевание дыхательных путей, в том числе и туберкулеза, количество продуцируемой бронхами мокроты значительно возрастает. Это связано, в первую очередь, с раздражением бокаловидных клеток, а также, при присоединении воспалительного процесса, когда клетки иммунной системы организма начинают поглощать патогенные микроорганизмы, образуются гнойные массы. Они также формируют отделяемое в виде мокроты при заболеваниях дыхательных путей. С помощью кашля организм выводит эту жидкость – именно с помощью нее диагностируются многие бронхо — легочные патологии и выявляется степень и характер течения воспалительного процесса.

Количество выделяемой при влажном кашле мокроты также указывает на некоторые особенности течения заболевания. При этом она может, не выводится посредством кашля совсем (трудноотделяемая мокрота) или, наоборот, биоматериал можно собрать без каких-либо трудностей. Два самых распространённых исследования этого отделяемого – это бактериоскопия и посев: именно эти два этапа позволяют провести точную диагностику заболевания, вызвавшего повышенное отделение мокроты и как следствие, влажный кашель с рядом сопутствующих симптомов.

1. Для начала необходимо позаботиться о контейнере – его можно купить в любой аптеке. Это специализированная емкость для сбора мокроты: она стерильна, с широким горлышком и крышкой. Также контейнер могут выдать в медицинском учреждении. Необходимый объем биоматериала для исследования – 5мл, поэтому емкость должна быть соответствующая.
2. Самым подходящим временем для сбора мокроты являются утренние часы, поскольку за время ночного сна скапливается достаточное количество и собрать ее гораздо легче. Однако бывают такие обстоятельства, когда мокрота забирается в любое время суток.
3. Перед тем, как приступить к сбору мокроты на анализ, тщательно прополоскать ротовую полость, при этом чистить зубы перед этим нельзя.
4. Биоматериал для анализа собирается следующим образом: сделав максимально глубокий вдох, задержать дыхание, после чего медленно выдохнуть – повторить еще раз. Сделав третий глубокий вдох, резко выдохнуть, как бы выталкивая воздух из лёгких, и как следует откашляться. Во время этого рот должен быть прикрыт марлевой повязкой.
5. Контейнер необходимо придерживать у нижней губы — сплюнуть в него все содержимое, которое получилось откашлять и плотно закрыть стерильную баночку крышкой.
6. Если после одного раза мокроты отошло очень мало, то процедуру следует повторить, для того чтобы собрать необходимое для исследования количество(5-7 мл.)

Для начала можно попробовать поменять положение тела при откашливании: облегчают отхождение мокроты наклоны вниз, положения, лежа на боку или на животе.

Если такие меры не привели к положительному результату, то можно принять отхаркивающие средства или сделать ингаляцию. Отхаркивающие препараты назначает лечащий врач, и начинать принимать их необходимо за сутки до сбора мокроты (бромгексин, амбробене и другие традиционные препараты). Совместно с приемом таких препаратов необходимо употреблять достаточно большое количество жидкости для облегчения отхождения мокроты.

Ингаляцию для этой цели делают на основе раствора соды и соли. Вдыхать такую смесь следует через небулайзер 10-15 минут(40-60 мл.). Если начинается усиленное слюноотделение, то ее нужно сплюнуть, только потом собирать мокроту.

Если не удается собрать мокроту всеми вышеперечисленными способами, то пациенту назначается процедура бронхоскопии. Еще такое исследование проводится в случаях, когда необходимо собрать секрет мокроты с бронхов, без примесей слюны и носоглоточной микрофлоры.

Процедура проводится посредством двух методик:

• В бронхи вводится 100-200 мл. физ. раствора через вставленный катетер, после чего полученная жидкость посредством аспирации выводится обратно.
• В просветы бронхиального дерева вводят катетер для прямой аспирации слизи.
  Пациенту необходимо пройти подготовку к этой процедуре: не употреблять пищу и жидкость в течение 6 часов, как правило, она назначается на утреннее время, чтобы пациенту было легче выдержать такой интервал времени. А после нее не употреблять аспириносодержащие препараты, которые обладают способностью разжижать кровь.
  И промывные воды, и непосредственно мокрота, полученные таким способом, используются для всех видов исследований на данном биоматериале.

Если сдача мокроты проводится в условиях стационара, то медицинский работник предоставляет пациенту специально оборудованную процедурную, консультирует по поводу процедуры сдачи и контролирует весь процесс. Также медработник подписывает контейнер с биоматериалом и отправляет его на исследование.

Анализ мокроты на туберкулез позволяет выявить легочный тип развития заболевания. Основными показаниями для его проведения являются:

• Кашель затяжного характера (влажный или сухой);
• Выявленные затемнения на снимках рентгена;
• Повышенная температура тела.

Для постановки диагноза туберкулез легких, анализ мокроты является обязательным в спектре исследований, проводимых при подозрении на данное заболевание. Обязательным исследование на инфицирование туберкулезом считается в тех случаях, когда больной больше трех месяцев страдает от сухого кашля, который не поддается никаким видам лечения.

В связи с тем, что биоматериал для исследования на микобактерии берется не только при помощи непосредственного отхаркивания, но и путем бронхоскопии, данное исследование имеет противопоказания. При процедуре бронхоскопии вводится трубка в верхние органы дыхания под общей или местной анестезией. Поэтому, такая методика забора анализа противопоказана:

• пациентам, страдающим аллергией на обезболивающие медикаменты;
• людям с тяжелой дыхательной недостаточностью;
• с нарушениями свертываемости крови;
• пациентам, в ближайшие пол года перенесшим инфаркт миокарда или инсульт;
• с такими заболеваниями, как эпилепсия и шизофрения.

Детям до 18 лет процедура бронхоскопии назначается и делается только с согласия родителей. Сама процедура является безопасной и осложнения вызывает крайне редко, но препараты, предназначенные для общей и местной анестезии, могут вызывать непереносимость и аллергические реакции. Этот вопрос необходимо обязательно обсудить перед процедурой с лечащим врачом.

Самым весомым плюсом этого анализа является стопроцентная точность диагностики и возможность выявления туберкулеза на ранних этапах заражения. Тест включает в себя забор нескольких проб, которые способны однозначно указать присутствие или отсутствие возбудителя в легких пациента.

Сам анализ вариативен, и проводить его можно удобным для пациента способом; данная методика выполняется в короткие сроки, и доставляет минимум дискомфорта пациенту.

Такой метод сбора анализа на микобактерии не имеет побочных воздействий на организм пациента. Нет необходимости вводить медицинские препараты или сдавать анализы крови, мочи. По сути, сбор анализа на микобактерии происходит естественно, без особых трудностей и дискомфорта для пациента. Часто это становится актуально, когда речь идет о малолетних детях, которые весьма негативно переносят такие диагностические процедуры.

С помощью такого информативного метода, как бронхоскопия, медики имеют возможность выявить и другие патологии небактериального характера на ранних сроках (бронхиальная астма, рак легких и т.д.). Расширенное исследование качественного состава мокроты позволяет произвести диагностику на любом этапе развития заболевания . Таким образом, анализ может не только подтвердить или опровергнуть диагноз туберкулез, но и установить причину возникновения тревожной симптоматики.

К минусам можно отнести достаточно долгое ожидание результата анализа. На это есть две главные причины: многостороннее обследование биоматериала, включающее в себя бактериологический анализ и посев мокроты на питательные типы сред, который и является самым долгосрочным видом исследования. Время ожидания может растянуться от 3 недель до двух месяцев.

К отрицательной стороне также можно отнести многократное проведение бронхоскопии при подозрении на заражение туберкулезом, при отсутствии главного симптома – кашля.

После того как биоматериал поступил на исследование в лабораторию, специалист в первую очередь, занимается его визуальной оценкой. При тяжелых формах туберкулеза, например, в мокроте наблюдаются вкрапления крови или кровяные сгустки. Но такое отделяемое не является стопроцентным показателем заражения туберкулезом – наличие крови в мокроте может говорить и о крупозной пневмонии, и об опухолевых процессах, о бронхоэктатической болезни.

Если все же речь идет о туберкулезном заражении, то при дальнейшем исследовании в мокроте будут обнаружены микобактерии. В современной медицине используются две основных проверенных временем методики лабораторного исследования мокроты: бактериоскопическая и культуральная (биологическая).

Бактериоскопия применяется в диагностике туберкулеза уже более ста лет. Она включает в себя макроскопическое описание, микроскопическое исследование – при нем выявляются эритроциты, волокна легочной ткани, коралловидные, спириллы Куршмана и т.д. В мокроте зараженного туберкулезом пациента обнаруживаются, помимо микобактерий, темные фрагменты (зерна) – это частицы старых, распадающихся очагов.

Этот метод используется не только для выявления и диагностики такого коварного заболевания, как туберкулез, также он помогает в выборе рациональных схем химиотерапии и оценке их клинической эффективности.

Бактериологическая диагностика проводится в таком порядке:

1. Обработка материала, поступившего в лабораторию.
2. Микроскопическое исследование мокроты.
3. Посев мокроты на туберкулез.
4. Идентификация микроорганизма при помощи бактериологического и биохимического тестирования.
5. Определение лекарственной чувствительности туберкулезной палочки.

Проводится исследование мокроты на туберкулез с помощью двух методов: обычная (простая) бактериоскопия и метод флорации. Простой метод включает в себя приготовление мазков из комочков мокроты – их помещают между двумя предметными стеклами. Затем одна часть биоматериала окрашивается по Грамму на общую флору, а другая – на микобактерии туберкулеза.

С начала 90-х годов многие современные лаборатории стали использовать в диагностике туберкулеза флюоресцентную микроскопию, основанную на кислотоустойчивости микобактерии. Под воздействием ультрафиолетового излучения туберкулезные палочки проявляются в ярко-желтом цвете на черном фоне.

Культуральный метод включает в себя такие диагностические процедуры:

1. Удаление белковых масс путем обработки мазка разжижающими веществами.
2. Удаление сопутствующей бактериальной формы с помощью деконтаминации образца.
3. Встряхивание.
4. Отстаивание смеси.
5. Помещение в холодную центрифугу.
6. После этого содержимое пробирки отбирается на посев:
   • агаровой среды,
   • плотной яичной среды,
   • бульонного культивирования автоматизированного типа.

Культуральный посев мокроты повышает точность исследования в разы — при более легких степенях развития заболевания, при которых бактериологический метод может показать отрицательный результат. Однако работа таким методом требует хорошо оснащенных, современных лабораторий, которых, к сожалению, не имеют многие небольшие города и поселки городского типа.

Самыми быстрыми и точными видами анализов на обнаружение туберкулезной палочки являются молекулярно-генетические методы диагностики. Это современные комплексы анализов, включающие в себя расшифровку генома микобактерии туберкулеза. Такие молекулярно-диагностические методы открыли в современной медицине хорошие перспективы на последующее развитие эффективных методик борьбы с этим коварным заболеванием. Наиболее часто используется способ полимеразной цепной реакции – это тест предназначен для выявления микобактерии в мокроте или установления вида бактерий в культуральных средах.

Что имеет первостепенное значение в постановке диагноза — это время: вместе с обработкой материала, идентификация туберкулезной палочки занимает всего 5-6 часов. Кроме того, реакция ПЦР обладает высокой чувствительностью и специфичностью, что является залогом стопроцентно точного результата.

источник

Туберкулез — серьезное инфекционное заболевание, передающееся воздушно-капельным путем. Чаще всего заражение происходит, когда человек вдыхает болезнетворные бактерии.

Первыми признаками болезни являются снижение веса, повышение температуры и регулярный кашель с усиленным выделением мокроты (в норме секрет лишь смазывает слизистую, обильно не выделяясь).

В мокроте заболевшего присутствуют микробактерии туберкулеза, поэтому исследование слизистых выделений легких позволяет быстро выявить инфицирование.

Кроме того, при данной форме можно обнаружить так называемые рисовые тельца (линзы Коха), представляющие беловатые или желтоватые вкрапления, в составе которых дендрит, эластичные волокна и зараженные микробактерии.

Выделения происходят обильные, могут иметь неприятный, гнилостный запах.

Макроскопическое обследование. Секрет больного, зараженного туберкулезом, имеет гнойный характер, в нем присутствуют бактерии Коха, наблюдается небольшое вкрапление кровяных прожилок. Кровяные примеси возникают в случае нарушения целостности сосудов и чаще всего отмечаются у больных с кавернозной формой.

Кроме того, при данной форме можно обнаружить так называемые рисовые тельца (линзы Коха), представляющие беловатые или желтоватые вкрапления, в составе которых дендрит, эластичные волокна и зараженные микробактерии. Выделения происходят обильные, могут иметь неприятный, гнилостный запах.

Бактериоскопическое обследование. Готовится специальный препарат, который окрашивают методом Циля-Нельсона карболовым раствором фуксина. После осветления добавляют 3% раствор солянокислого спирта, 5% раствор серной кислоты, после чего окрашивают 0, 25% раствором метилена синего. По результатам определяют наличие палочки Коха. Все материалы препарата, кроме бацилл туберкулеза, приобретают синий цвет.

Данный метод анализа мокроты при туберкулезе легких чрезвычайно чувствителен. При первом обследовании чувствительность составляет около 80%, при повторном: 85-90%. Если образцы исследуются более трех раз, чувствительность возрастает до 97%. Для определения вируса в 1 мл материала должно быть более 100 000 микробактерий.

Фото 1. Врач проводит исследование мокроты на туберкулез: это быстрый и точный способ определить наличие микобактерий

Если имеются признаки и симптомы заболевания мокроту лучше тестировать не менее трех раз

Важно! Первый отрицательный результат не означает полного исключения диагноза. Часто образцы могут содержать меньше бактерий, чем необходимо для исследования.

Обследование начинается с внешнего осмотра. При наличии инфекции в слизистых выделениях встречаются инородные вкрапления или тромбы, части кальцинированных камней бронхов. При разрушении легочной ткани обнаруживаются эластичные волокна.

При обнаружении микробактерий секреция клеток дыхательных путей повторно исследуется, в клинику отправляется утренний сбор (как минимум, на протяжении трех дней). Обследование проводится как до начала лечения, так и во время.

Количество микробактерий в образцах должно уменьшаться, что свидетельствует о ремиссии заболевания.

Количество обнаруженных микобактерий позволяет разделить пациентов на две группы:

Первая группа классифицируется как активные выделители зараженных бацилл, имеющие прогрессирующий воспалительный процесс в легких.

Внимание! Эта группа опасна для окружающих и требует немедленной изоляции в условиях тубдиспансера.

После соответствующей противотуберкулёзной терапии и подтверждения того, что человек не является бактериостатическим агентом, пациент ставится на учет в поликлинику и тубдиспансер. При получении нескольких стерильных образцов без болезнетворных бактерий, после повторного и дополнительного обследования, пациент снимается с учета.

При отсутствии в выделениях болезнетворных бактерий или их незначительном количестве человек причисляется к группе BК-. Не представляя опасности для других, пациент должен быть также изолирован для предотвращения развития болезни и ее перехода в открытую форму.

Лечение осуществляется курсом. Назначается комплекс препаратов различного воздействия на палочку Коха, которые имеют одну общую цель: уничтожить её.

Дополнительно показаны физиотерапия, дыхательная гимнастика, иммунопрофилактика. Пациент регулярно сдает анализы.

источник

Туберкулез является одним из самых массовых заболеваний в мире. Это трудноизлечимая инфекционная болезнь, которая не проходит без последствий для организма и может привести к смертельному исходу. Основные клинические проявления туберкулеза – субфебрильная температура тела на протяжении нескольких недель и кашель, который сопровождается выделением мокроты, зачастую кровавой.

Анализ мокроты на выявление бактерий туберкулеза является одним из важнейших диагностических методов болезни. В случае туберкулезного воспаления, как и многих других воспалительных заболеваний дыхательной системы, «мокрый» кашель является защитным механизмом организма. При помощи этого процесса организм пытается избавиться от инфекции.

Выявлением пациентов, заболевших туберкулезом, занимаются врачи первичных лечебных заведений. Но подтверждается диагноз в специализированном противотуберкулезном учреждении. Сбор мокроты на микобактерии туберкулеза относится к обязательным диагностическим минимумам.

Симптоматика туберкулезной инфекции может не проявляться длительное время. При развитии патологии появляется сухой кашель, на смену которому приходит мокрый, с выделением патологической слизи.

Характер самого секрета может быть разным:

Изначально это вязкая, бело-гнойная мокрота, в последующем ее вязкость увеличивается.

Иногда в нем могут обнаруживаться прожилки крови, как проявление кавернозного процесса в легочной ткани.

В редких и тяжелых случаях слизистые выделения из легких могут быть представлены сплошной кровавой массой.

При активном туберкулезном инфекционно-воспалительном процессе не встречается пенистый секрет, как при бронхите или простуде.

Количество мокроты за сутки в течение всей болезни также изменяется. На пике болезни оно может достигать 300-400 мл за сутки. При этом постепенно отделение бронхиального секрета затрудняется, кашель приобретает спазматический характер. Первоначально мокрота преимущественно отходит утром, далее – в течение всего дня.

Основные методы выявления микобактерии туберкулеза в биологических жидкостях:

Согласно рекомендациям ВООЗ, забор проводят не меньше двух раз. Исследование назначают при обращении к врачу пациента с жалобами на кашель, который длится более 3 недель. После чего проводят бактериоскопическое исследование и выявляют наличие кислоустойчивых бактерий.

Существует определенная последовательность сдачи анализа мокроты при подозрении на туберкулез:

1. Всем пациентам, которые подвергаются клиническому обследованию, производят забор двух образцов секрета для микроскопии.
2. Контейнеры для сбора должны быть одноразовые с широкой горловиной, объемом не меньше 5-7 мл.

Первую порцию бронхиального секрета пациент собирает и сдает при посещении лечебного учреждения в день обращения с соответствующими жалобами.

Вторую порцию пациент собирает дома самостоятельно утром. Медицинский сотрудник должен разъяснить правила забора секрета.

При диагностическом исследовании важно знать правила сбора мокроты на туберкулез:

1. Забор материала производят в утреннее время до приема пищи – за ночь во время сна образуется большое количество мокроты, что облегчает непосредственно проведение забора выделений и повышает информативность исследования.
2. Нужно провести все гигиенические процедуры ротовой полости: почистить зубы и пополоскать слизистую рта – это проводится с целью предотвращения попадания в патологический материал остатков пищи и микрофлоры ротовой полости.
3. Перед самой процедурой не следует принимать противокашлевые лекарственные препараты, так как угнетение кашля может затруднить отхождение слизи.
4. Вечером перед сном накануне забора материала назначают препараты, которые облегчают отхождение секрета (муколитики). Если отхождение мокроты затруднено, то в таком случаем применяют ингаляционное введение разжижающих или отхаркивающих лекарственных средств.

Нужно приготовить стерильную герметическую емкость для материала.

Помещение, где проводится забор, должно быть хорошо проветрено, соответствовать санитарным нормам, быть отдаленным от большого собрания людей.

Для облегчения отхождения секрета можно выпить теплой воды. После этого хорошо откашливаются и сплевывают мокроту в контейнер. Необходимо проследить, чтобы не была сплюнута слюна.

Забором материала занимаются работники лечебных медицинских учреждений. Лучше всего сдавать мокроту под контролем медика, который определит правильность выполнения процедуры. Изучением патологического материала занимается лаборант, задача которого заключается в точном и правильном исследовании мокроты.

Мокроту для исследования на туберкулез необходимо доставить сразу же после ее забора. В крайнем случае, она хранится не более семи дней в холодильнике при температуре +3°С. При транспортировке все контейнеры плотно упаковывают в специальные биксы, фиксируя их в вертикальном положении. Должна быть защита от УФ лучей. К каждому боксу прикрепляют описание образцов ТБ-05(а), дату и номер забора.

Бактериоскопическое исследование заключается в создании мазка на предметном стекле, который проходит определенные этапы обработки. Одним из них является окрашивание по методу Циля-Нильсена. Далее проводят пересмотр 100 полей зрения. Если не обнаруживаются МБТ, то просматривают еще дополнительно 200.

Также исследуемый материал окрашивают карболовым фуксином. Затем обесцвечивают 5% раствором серной кислоты или 3% солянокислым спиртом. Затем мазок окрашивают метиленовым синим и просматривают в микроскопе с применением имерссионного масла.

Важно! Всем пациентам с подозрением на туберкулез проводят микроскопию трех различных образцов мокроты. Это может выполнить любая клиническая лаборатория. Данное исследование входит в диагностический минимум на предмет туберкулезной инфекции.

Микроскопическим методом обычно выделяют около 75% всех бактериовыделителей среди впервые заболевших туберкулезом. Важно придерживаться кратности диагностических мероприятий – это повышает выявляемость и информативность.

При своевременно проведенном бактериоскопическом исследовании можно выявить больного на начальной стадии заболевания, изолировать его, и уже в ближайшее время начать специфическую химиотерапию, что, в свою очередь, снизит вероятность возникновения осложнений.

Бактериологический метод исследования проводят при помощи таких способов, как:

• люминесцентная микроскопия мазков;
• посев мокроты на туберкулез;
• биологический способ (заражение морских свинок);
• иммуноферментное исследование;
• молекулярно-генетический способ;
• ВАСТЕС 460 – жидкостно-культуральная система;
• MGTT 960;
• амплификация нуклеиновых кислот – ПУР.

В основном эти методы относят к высоко специализированным и проводят в специальных лабораториях.

Расшифровка результатов анализа на наличие микобактерии туберкулеза заносится в форму ТБ-05 (заполняется на каждого пациента). Данное заключение содержит следующие пункты:

• название ЛПУ;
• дата заполнения;
• ФИО, возраст, пол, адрес пациента;
• причина проведения анализа (диагностика, контроль);
• номер образца и районный идентификационный номер пациента;
• дата забора мокроты;
• результаты диагностики (лабораторный порядковый номер, внешний вид мокроты, микроскопический анализ, ФИО лаборанта с подписью и датой).

Несмотря на то, что результат исследования может быть положительным, установлением окончательного диагноза занимаются фтизиатры в туберкулезном диспансере. Как правило, требуется проведение еще нескольких методов исследования, одним из которых является рентгенологический.

В зависимости от результатов микробиологического исследования, существует 4 варианта тактических действий:

1. При нахождении КУБ (кислотоустойчивых бактерий) в двух мазках бронхиального секрета больного необходимо направить в противотуберкулезный диспансер.
2. Если КУБ найдены в одном мазке из двух, необходимо провести рентгенологическое исследование. После этого больно отправляют в противотуберкулезный диспансер для уточнения диагноза.
3. Если КУБ не выявлены ни в одном из мазков, но тем не менее есть клинические проявления туберкулезной инфекции, а рентгенологически определяются очаговые или инфильтративные изменения в легких – проводят тест-терапию антибиотиками широкого спектра действия в течение двух недель. При этом нельзя назначать специфические к туберкулезному возбудителю препараты. Если терапия успешна – диагноз туберкулеза снимается. Но если терапия не дала результата, то в таком случае больного отправляют на дообследование в туберкулезный диспансер.

Мазок мокроты при туберкулезе

Если КУБ не найдены ни в одном из образцов бронхиального секрета, но в легких на рентгенограмме найдены очаги диссеминации, круглая или кольцевидная тень – то в таком случае пациента также отправляют на дообследование в диспансер.

Результаты считаются положительными и имеют определенную степень, если:

1. В каждом поле зрения определяется больше 10 КУБ – степень 3+. При этом проверяют не меньше 20 полей зрения.
2. В каждом поле зрения определяется от 1 до 10 кислотоустойчивых бактерий – степень 2+. При этом просматривают от 50 полей зрения.
3. На 100 полей определено от 10 до 99 КУБ – степень 1+. Проверяют при этом не меньше 100 полей.
4. На 300 полей определено 4-9 КУБ – недостаточно позитивный результат степень 1+. В соответствующей графе записывают конкретную цифру, например, 6/300.

Негативным считается результат, если:

1. При исследовании не меньше чем 300 полей зрения определено от 1 до 3 КУБ.
2. При исследовании 300 полей зрения не найдено ни одного КУБ.

Повторный забор проводят через несколько дней для постановки точного диагноза. Самый оптимальный вариант – трехразовая сдача. Иногда могут потребоваться дополнительные пробы. Результаты бактериологического исследования можно получить на следующий день после сдачи мокроты.

При соблюдении всех правил забора материала, техники безопасности и своевременном обращении за медицинской помощью диагностика и лечение туберкулеза не вызовет никаких затруднений.

источник

• Сбор мокроты на микобактерии туберкулеза
• Обследование на туберкулез: как собрать мокроту
• Различные методики обследования на туберкулез
• Диагностика с помощью ПЦР
• Подводим итоги

Заболевания дыхательной системы наверняка знакомы каждому. Врачи часто для постановки диагноза берут анализ мокроты на туберкулез.

У всех было такое состояние, когда появлялся сухой кашель, незначительно повышалась температура тела, имелась слабость во всем теле. Данные симптомы характерны для многих заболеваний, однако одним из тяжелых видов такой патологии является туберкулез.

Туберкулез легких широко распространен в таких странах, как:

Это заболевание зачастую имеется у лиц без определенного места жительства, заключенных, малообеспеченных людей. Оно характеризуется тяжелым поражением легких с образованием полостей распада (каверн), очагов уплотнения в легких. Они поражаются, в частности, из-за того, что легочная ткань обильно снабжена кровеносными и лимфатическими сосудами. А это обуславливает распространение туберкулеза на другие системы органов.

Заболевание передается воздушно-капельным путем, что существенно увеличивает риск заражения при контакте с больным человеком. Для того чтобы выявить наличие туберкулеза у пациента, создано множество методов, одним из которых является анализ мокроты.

Мокрота — секрет слизистой оболочки бронхов, при нормальном состоянии организма не образующийся. Во время заболевания наблюдается повышение секреции данной субстанции. Она начинает образовываться даже в самых мелких бронхах, что существенно увеличивает риск попадания микобактерий (основной возбудитель туберкулеза) в мокроту. Во время кашля частицы мокроты несколько рассеиваются в выдыхаемом воздухе. При вдыхании подобного воздуха происходит попадание микобактерий в незараженный организм , в котором, при соблюдении определенных условий, развивается инфекционный процесс, и туберкулез начинает прогрессировать.

При появлении вышеуказанных симптомов паниковать не стоит, так как вполне возможно, что место имеет банальная простуда. Однако туберкулез следует заподозрить , когда данные симптомы имеются уже довольно долгое время (не менее двух недель), пациент похудел за это время, а также если не делалась контрольная флюорография (нет данных минимум за полгода). Если же симптомы развились за несколько дней, есть стопроцентная уверенность в том, что это не туберкулез.

Если все же состояние здоровья ухудшилось, а кашель стал постоянным, следует обязательно сделать флюорографию. Без нее не всегда врачи согласятся провести анализ мокроты на микобактерии.

При подозрении на туберкулез (наличие на снимке очаговых уплотнений до 1 см в диаметре, затемнения доли или сегмента легкого, чаще всего, верхних его частей) немедленно стоит обратиться к фтизиатру за консультацией. Если же и у него возникнет подозрение на туберкулез, то сразу же будет назначен анализ мокроты.

В первую очередь следует взять чистую и стерильную баночку или плевательницу для слюны, чтобы избежать неправильной интерпретации анализа. Перед сплевыванием мокроты обязательно нужно почистить зубы, так как чаще всего неправильные результаты обусловлены попаданием микроорганизмов из ротовой полости.

Мокрота лучше всего отходит после длительного периода покоя (ночной сон). Она сплевывается в баночку. Лучше всего сразу же закрыть баночку. Хранить ее до исследования нужно в темном и прохладном месте. Оптимальное время для доставки мокроты на исследование — 2 часа. Каким же образом проводится само исследование мокроты?

Самыми примитивными методиками определения микобактерий являются бактериоскопический и бактериологический методы. Бактериоскопия основывается на выявлении под микроскопом специфических микробных тел, однако нельзя судить о наличии туберкулеза только по наличию данных микроорганизмов. Для более достоверного исследования обязательно проведение таких процедур, как ИФА, ПЦР.

Интерпретация анализа двояка. Без проведения специальных методик врач-лаборант вправе написать на бланке направления только “КУБ (кислотоустойчивые бактерии) положительны» или «КУБ отрицательны”. Если в мазке имеются похожие на микобактерию палочки, выставляется КУБ+. Если же их нет (КУБ-), то это исключает диагноз туберкулеза. В редких случаях анализ может быть ложноположительным или ложноотрицательным.

В первом случае имеет место перекрестная реакция антигенов. Ложноотрицательный результат возможен, когда в среду было внесено мало реагента и его просто не хватило для полноценной реакции между антигеном и вносимым компонентом.

Для лучшего выявления бактерий мазок окрашивают специфическими красителями (окраска по Цилю-Нельсену).

Если для бактериоскопии мокроты мало или больной ее не выделяет, лучше всего накануне перед сном прописать пациенту амброксол или бромгексин.

Если же все-таки имеется пометка КУБ+, то следует продолжить исследование.

В первую очередь необходимо провести иммуноферментный анализ (ИФА).

Суть его заключается в следующем:

1. К раствору, содержащему исследуемый антиген, добавляют специфические антитела. Их имеется две разновидности — меченые и немеченые.
2. Немеченые вносятся в среду на первом этапе, а на втором — меченные определенными ферментами.
3. При присоединении данных антител к антигенам образуется комплекс антиген-антитело. Концентрации вносимых компонентов известны.
4. После связывания компонентов определяют ферментативную активность среды, по которой судят о количестве антигена и возможном диагнозе.

ИФА методика позволяет довольно быстро определить наличие специфических антигенов и поспособствовать постановке диагноза.

Еще одним из часто использующихся методов исследования является определение микобактерий на ВАСТЕС.

Под ВАСТЕС понимают специализированные аппарат, в котором возможно определение многих видов микроорганизмов. Суть исследования такова:

1. Мокроту, полученную от пациента, разбавляют специальной средой, для каждого микроорганизма подбирают собственную.
2. Пробирку с полученным раствором помещают в аппарат, где в определенных условиях проводится выращивание штамма бактерий.
3. По мере их роста за счет содержащихся в среде веществ начинает вырабатываться углекислый газ, который соединяется со специальным красителем.
4. Он воспринимается определенными датчиками.
5. По тому, какой имеется индекс флюоресценции, судят о том, какие микроорганизмы находятся в исследуемом образце.

Более простой разновидностью этой методики является бактериологический метод или, как его называют, культуральный. Проводится посев мокроты на специальную среду, и в течение месяца наблюдают за тем, какие колонии растут. Если они приобретают специфический вид для микобактериальной культуры, то диагноз туберкулеза можно считать подтвержденным и доказанным. Однако этот метод используется крайне редко, так как занимает довольно много времени.

К более сложным методам относят диагностику микобактерий при помощи ПЦР. Эта методика доступна не во всех учреждениях здравоохранения и проводится обычно как минимум на районном или областном уровнях.

Полимеразная цепная реакция основывается на образовании в исследуемой среде участков генетического материала, сходного с таковым у микобактерии. Мокрота подвергается термической и химической обработке, после чего в определенных условиях в нее вносят необходимые реагенты. На основании имеющегося генетического материала происходит достраивание цепей молекул, которые впоследствии исследуются. Если генетический материал соответствует таковому, как у микобактерии, то диагноз можно считать подтвержденным.

Если диагноз туберкулеза положительный, пациента необходимо сразу же изолировать от других людей с целью исключения риска заражения окружающих.

Согласно исследованию количества микобактерий в мокроте, больных туберкулезом можно подразделить на две группы — БК+ и БК- К группе БК+ относят активных выделителей микобактерий, у которых имеется прогрессирующий процесс в легких. Такой контингент и представляет наибольшую опасность для окружающих.

Если же было подтверждено, что мокрота не содержит микобактерий или они единичны, то такой человек относится к группе БК- Он не представляет опасности для окружающих, однако с целью профилактики прогрессирования заболевания и перехода его в открытую форму такого человека тоже необходимо изолировать.

При проведении соответствующего лечения и подтверждении, что человек не является бактериовыделителем, больные становятся на учет к фтизиатру. При наличии нескольких отрицательных результатов на КУБ и БК (т.е. при получении стерильной мокроты при повторных методиках обследования типа ИФА или ПЦР) пациента снимают с учета.

Как видно, туберкулез является довольно значимой проблемой современного общества. Никогда нельзя знать заранее, отчего кашляет человек и может ли контакт с ним привести к тяжелым последствиям. Именно из-за этого, методика выявления микобактерий туберкулеза совершенствуется. Создаются новые экспресс-методы, позволяющие по наличию мокроты и ее характеру сразу же определить наличие туберкулеза у пациента. Однако все они играют важную роль на ранних стадиях заболевания, когда процесс еще не стал активным.

источник

Из книги: TB/HIV A CLINICAL MANUAL ( Second Edition)./ Anthony Harries, Dermot Maher и Stephen Graham. World Health Organization, Geneva, 2004

Самым высоким приоритетом для борьбы с туберкулезом является идентификация и излечение заразных случаев, т.е. пациентов с легочным туберкулезом с выделением БК в мокроте. В связи с этим все пациенты (вне зависимости от статуса ВИЧ) с клиническими признаками, позволяющими предположить наличие легочного туберкулеза, должны сдать мокроту для проведения диагностической микроскопии. Большинство людей с подозрением на туберкулез (люди с симптомами и признаками, позволяющими предположить наличие туберкулеза у них) находятся в амбулаторных условиях, поэтому у них диагностика легочного туберкулеза обычно производится на амбулаторной основе. Некоторые пациенты с подозрением на легочный туберкулез тяжело больны и/или прикованы к постели, в связи с этим они должны быть обследованы как амбулаторные пациенты.

Клинический скрининг на основании оценки симптомов идентифицирует лиц с подозрением на легочный туберкулез среди пациентов, которые обращаются в учреждения здравоохранения.

Наиболее стоимостно-эффективным методом выявления случаев туберкулеза среди лиц с подозрением на легочный туберкулез в странах с высокой распространенностью туберкулеза, является микроскопия мокроты. Человек, у которого имеется положительный результат микроскопии, имеет легочный туберкулез с бацилловыделением. Окружной фтизиатр регистрирует пациента с туберкулезом и начинается лечение. В большинстве случаев при наличии легочного туберкулеза с обнаружением БК в мокроте проведение рентгенологического исследования грудной клетки не является необходимым.

Иногда пациенты могут иметь отрицательный результат микроскопии мокроты, но при этом их состояние не улучшается при применении антибиотиков широкого спектра. Если вы все еще подозреваете наличие туберкулеза, надо заново переоценить ситуацию с данным пациентом и выполнить рентгенологическое исследование грудной клетки. Если рентгенологическое исследование грудной клетки показывает результаты типичные для легочного туберкулеза, пациента регистрируют у окружного фтизиатра и начинают лечение туберкулеза. Если существует сомнение в диагностике туберкулеза при помощи рентгенологического исследования грудной клетки, например, если рентгенологическое исследование грудной клетки демонстрирует неспецифический легочный инфильтрат, необходимо провести пациенту другой курс антибактериальной терапии. Если не наступает клинического улучшения, или если кашель исчезает, а затем вскоре возобновляется вновь, необходимо повторить микроскопию мокроты. Если, несмотря на отрицательный результат пробы с мокротой, вы все еще считаете, что пациент может иметь туберкулез, необходимо проанализировать ситуацию у данного пациента и повторить рентгенологическое исследование грудной клетки, а затем следует решить, является ли туберкулез правильным диагнозом или нет. В случаях, когда существуют диагностические сомнения, если имеются соответствующие возможности можно использовать посев мокроты.

В популяциях с высокой распространенностью туберкулеза туберкулиновый тест имеет очень маленькое значение в диагностике заболевания у взрослых. Положительный туберкулиновый кожный тест сам по себе не позволяет отличить инфицирование M . tuberculosis от заболевания туберкулезом. Предшествующее воздействие и контакт с микобактериями, находящимися в окружении, также может приводить к ложно положительным результатам теста. С другой стороны, туберкулиновый кожный тест может быть отрицательным даже в том случае, если у пациента имеется туберкулез. Состояния, которые часто связаны с ложно отрицательным туберкулиновым кожным тестом, включают в себя ВИЧ-инфекцию, кахексию и милиарный туберкулез.

Наиболее важными симптомами для диагностики легочного туберкулеза являются следующие:

• Кашель на протяжении более чем 2-3 недель
• Выделение мокроты
• Потеря массы тела

Свыше 90% пациентов с легочным туберкулезом и выделением ВК-положительной мокроты начинают страдать кашлем вскоре после начала заболевания. Однако для туберкулеза легких кашель не является специфичным симптомом. Кашель является часто встречающимся симптомом у курильщиков и у пациентов с острыми инфекциями верхних или нижних дыхательных путей. Большинство острых респираторных инфекций проходят в течение 2-3-х недель. Поэтому пациент с кашлем, продолжающимся свыше 2-3 недель, должен рассматриваться как человек с подозрением на легочный туберкулез, и он должен сдать мокроту для диагностической микроскопии.

Пациенты с легочным туберкулезом могут также иметь и другие симптомы, это могут быть симптомы со стороны органов дыхания или конституциональные симптомы (общие или системные).

Со стороны органов дыхания: боль в груди, кровохарканье, одышка.

Конституциональные симптомы: лихорадка, ночная потливость, усталость, потеря аппетита, вторичная аменорея.

Потеря массы тела и лихорадка чаще встречаются у ВИЧ — положительных пациентов с легочным туберкулезом, чем у ВИЧ — негативных пациентов. С другой стороны кашель и кровохарканье менее часто встречаются у ВИЧ — положительных пациентов с легочным туберкулезом, чем среди ВИЧ — негативных. Это по всей вероятности связано с тем, что у ВИЧ — положительных пациентов реже происходит образование каверн в легких, воспаление и идет меньшее эндобронхиальное раздражение.

Физикальные признаки у пациентов с легочным туберкулезом являются неспецифическими. Они не помогают отличить легочный туберкулез от других заболеваний органов дыхания. Они могут быть общими признаками, такими как лихорадка, тахикардия или появление синдрома часовых стекол. Признаки со стороны органов дыхания могут включать в себя хрипы, бронхиальное дыхание и амфотерическое дыхание. Часто при обследовании органов грудной клетки вообще не удается обнаружить никаких аномальных признаков.

Пациент с подозрением на туберкулез легких должен сдать три образца мокроты для микроскопии. Вероятность обнаружения туберкулезных бацилл выше с тремя образцами, по сравнению с двумя образцами или одним образцом. Секрет в дыхательных путях обычно накапливается в течение ночи, поэтому образцы мокроты, взятые ранним утром, с большей вероятностью содержат туберкулезные бациллы, чем образцы, взятые позднее в течение дня. Для амбулаторного пациента может оказаться сложным предоставить три образца мокроты, собранных рано утром. Поэтому на практике амбулаторные пациенты предоставляют образцы мокроты следующим образом:

Пациент предоставляет образец мокроты при обращении в учреждение здравоохранения под наблюдением врача «на месте». После этого пациенту предоставляется контейнер для сбора мокроты, который он забирает с собой для того, чтобы собрать мокроту с раннего утра на следующее утро.

Пациент приносит образец мокроты, которую он собрал рано утром.

Пациент предоставляет другой образец мокроты «на месте» под наблюдением врача.

Некоторые пациенты не могут собрать мокроту для анализа. Медсестра или физиотерапевт могут помочь им откашляться, для того чтобы появилась мокрота. Пациенты, находящиеся в стационаре, могут следовать тому же самому методу, что и амбулаторные пациенты.

Микобактерией называется «устойчивая к кислоте и спирту бацилла», что часто сокращается, как кислотоустойчивые бациллы (КУБ). Восковая оболочка микобактерии задерживает анилиновую краску (например, карболовый фуксин) даже после попытки обесцвечивания ее кислотой и спиртом.

Это простая методика окраски позволяет выявить КУБ. Вот как выполняется окраска по Цилю-Нильсену:

• Фиксировать мокроту на стекле
• Инкубировать фиксированный образец мокроты с карболовым фуксином на протяжении 3-х мин.
• Нагреть. Промыть водой и обесцветить смесью кислоты и спирта на протяжении 3-5 сек
• Провести дополнительное окрашивание метиленовым голубым на протяжении 30 сек.
• Снова промыть водой
• Проанализировать под микроскопом (используя масляную инверсию с увеличением на 100 и объективом на 10)
• Бациллы выглядят под микроскопом как красные палочки, связанные друг с другом, длинной 2-4 микрометра и шириной 0.2 – 0.5 микрометров.

Использование этой окраски для обнаружения туберкулезных бацилл требует специального флуоресцентного микроскопа. Флюорохромная окраска – это фенольный ауронин или ауронин-радонин. После деколоризации с кислотой и алкоголем и окраской метиленовым голубым, бациллы флуоресцируют ярким желтым цветом на темном фоне. Преимуществом этого метода является то, что образцы мокроты могут быстро просматриваться даже при маленьком увеличении. Чрезвычайно важно проверить положительные результаты, полученные флюорохромной окраской с использованием окраски по Циллю — Нильсону.

Количество бацилл, которое обнаруживается на образце, отражает тяжесть заболевания и заразность пациента. В связи с этим чрезвычайно важно оценить количество бацилл, которое обнаруживается в каждом мазке. Приведенная ниже таблица демонстрирует стандартную методику отчета с использованием увеличения в 1000 раз.

источник