Пцр диагностика туберкулеза вместо манту

Полимеразная цепная реакция: особенности метода
Возможна ли взаимозаменяемость диагностических методов?

Актуальной для родителей проблемой является правомерность и эффективность использования метода ПЦР на туберкулез вместо Манту.

Каждый год туберкулез поражает все большее количество населения, и дети в этом списке не являются исключением. Эффективность лечения напрямую зависит от быстрой и достоверной диагностики, позволяющей определить микобактерии заболевания. Не менее важным является определение наличия латентного (не проявляющегося внешне) туберкулеза, что позволяет вовремя начать профилактическое лечение и предотвратить таким образом активный этап в его течении.

Традиционно в профилактических целях используется вакцина БЦЖ, а в диагностических — проба Манту. Однако в последнее время в связи с возникающими после процедур осложнениями и неточностью диагностических результатов ставится вопрос о современной, более точной и эффективной альтернативе популярным ранее методам.

Один из прогрессивных методов диагностики туберкулеза — ПЦР. Возникает вопрос, является ли его применение вместо Манту оправданным и правомерным.

Полимеразная цепная реакция (понятие «цепной» реакции в данном контексте употребляется для обозначения серии процессов, связанных продуктом или энергией, которые одновременно являются участниками предыдущего и последующего этапа и приводят к ускорению или поддержанию реакций), открытие которой считается одним из наиболее значимых событий микробиологической науки последнего времени, позволяет ученым имитировать естественное самовоспроизведение ДНК с целью выявления специфических болезнетворных молекул.

Результаты этого доказательного и высокочувствительного метода можно получить уже через 1-2 дня. Для сравнения, результаты распространенного культурального метода с применением тестов готовы минимум через 6 недель, а в среднем процедура длится до 15 недель.

БЦЖ не позволяет определить, в каких случаях речь идет о поствакцинальной аллергии, а в каких — о сенсибилизации организма болезнетворными микобактериями туберкулеза. Культуральный метод не дает возможности отличить дикие штаммы и вакционные (M. bovis и M. bovis BCG соответственно).

Со всеми этими задачами прекрасно справляется ПЦР, однако этот факт не является свидетельством того, что она может быть использована вместо Манту.

Следует обратить внимание на то, что Манту и ПЦР применяются для разных целей, поэтому по поводу взаимозаменяемости этих методов до сих пор продолжаются дискуссии.

Распространено мнение, что полимеразной реакцией выявляются возбудители среди множества микробов, для чего достаточно биологической жидкости (например, крови, мочи либо слюны) в объеме 1 мл. Следует учитывать, что микобактерия может пребывать в клетке или в очажке, тогда в анализируемой жидкости фрагментов ДНК возбудителя не найдется: ПЦР даст отрицательный результат.

При клинически подтвержденном туберкулезе легких, что означает наличие возбудителя в организме ребенка, ПЦР дает положительные результаты в 25-80%, при этом ориентировочно 10% результатов будут ложноположительными.

Становится понятно, что даже при отрицательных результатах ПЦР вполне возможна постановка диагноза туберкулез. Иными словами, полимеразная цепная реакция не может быть рекомендована в качестве самостоятельного метода для диагностики туберкулеза.

Однако вследствие того, что данный способ позволяет определить не антитела, а антиген, его успешно применяют тогда, когда организм ребенка не вырабатывает иммунитета при наличии возбудителя заболевания.

ПЦР незаменима в случаях с диагностикой тяжелых или внелегочных форм туберкулеза, при сопутствующем иммунодефиците.

В таких ситуациях диагноз другими методами не устанавливается.

Эффективность метода ПЦР для выявления микобактерий туберкулеза и определения их видов была доказана в результате исследования (отображено в журнале «Туберкулез и болезни легких» №6 за 2013 год), проведенного в МГНПЦБТ.

Впрочем, проблема связана с тем, что родители, переживая из-за негативных последствий Манту, отказываются от этого вида исследования профилактической пробы и, естественно, сталкиваются с проблемами документации при оформлении детей в учебные учреждения.

При отказе родителей от пробы Манту врач может посоветовать выполнить рентгеновское обследование или диагностическое исследование ПЦР.

источник

Ольга, Вы большая молодец, что у вас дошли руки почитать эти приказы. Вот сижу сейчас и думаю, чтобы нас никто не обломал сейчас фразой, типа все это является лишь дополнительными методами диагностики ТБ. Вот, к примеру в 109 приказе от 2003 года, есть такая хрень:
«В качестве методов, альтернативных классическому культуральному исследованию, возможно использование автоматизированных и полуавтоматизированных систем ускоренной культуральной диагностики, основанной на использовании жидких питательных сред и различных способах индикации роста микобактерий.

С целью быстрой идентификации микобактерий туберкулезного комплекса в качестве дополнительных допускается использование методов, основанных на амплификации фрагментов генома микобактерий (полимеразная цепная реакция — ПЦР), других молекулярно-биологических методов. ПЦР-анализ может быть применен для исследования материала от больного (мокроты, промывных вод бронхов, мочи и спинномозговой жидкости), а также культур микроорганизмов.»

Наталья, вот. Держите. Это я только 2 пункта разжевывала.

А теперь подробнее.
5.6. В течение 6 дней с момента постановки пробы Манту (внимание. У ребенка отказ от манту) направляются на консультацию в противотуберкулезный диспансер (зачем? Если они не делали манту!) по месту жительства следующие категории детей:

— с впервые выявленной положительной реакцией (папула 5 мм и более), не связанной с предыдущей иммунизацией против туберкулеза;

— с длительно сохраняющейся (4 года) реакцией (с инфильтратом 12 мм и более);

— с нарастанием чувствительности к туберкулину у туберкулиноположительных детей — увеличение инфильтрата на 6 мм и более;

— увеличение менее чем на 6 мм, но с образованием инфильтрата размером 12 мм и более;

— с гиперреакцией на туберкулин — инфильтрат 17 мм и более;

— при везикуло-некротической реакции и лимфангите.

5.7. Дети, направленные на консультацию в противотуберкулезный диспансер (почему они направлены описано в пункте 5.6), родители или законные представители которых не представили в течение 1 месяца с момента постановки пробы Манту (опять 25! Манту то не ставили) заключение фтизиатра об отсутствии заболевания туберкулезом, не допускаются в детские организации.

Дети, туберкулинодиагностика которым не проводилась (это походу те 5%, которые не отказались, но у них медицинские противопоказания для постановки манту) допускаются в детскую организацию при наличии заключения врача-фтизиатра об отсутствии заболевания.
Т.е. отказ от медвмешательства — от пробы манту, отказ от противотуберкулезной помощи и есть основание не ходить по фтизиатрам и доказывать кому-то что он не верблюд.

Елена, Внимание! Человеческая просьба не писать вопросы в ЛС к автору темы. Все необходимые образцы отказов, а также советы и пути ведения диалогов имеются в теме и группе.

Постановление Главного государственного санитарного врача РФ от 22 октября 2013 г. № 60 “Об утверждении санитарно-эпидемиологических правил СП 3.1.2.3114-13 “Профилактика туберкулеза”
(НЕ ВСТУПИЛО В СИЛУ!)
Зарегистрировано в Минюсте РФ 6 мая 2014 г.
Регистрационный № 32182

Текст обращения в ГенПрокуратуру по несоответствию с другими законами:
http://www.1796kotok.com/forum/viewtopic.php?f=26..

Наиболее интересующие нас пункты: V и VI
V. Организация раннего выявления туберкулеза у детей

5.1. В целях раннего выявления туберкулеза у детей туберкулинодиагностика проводится вакцинированным против туберкулеза детям с 12-месячного возраста и до достижения возраста 18 лет. Внутрикожную аллергическую пробу с туберкулином (далее — проба Манту) ставят 1 раз в год, независимо от результата предыдущих проб.

Ежегодный охват пробой Манту детей до 14 лет включительно должен составлять не менее 95%. В обязательном порядке обследуются дети из социально неблагополучных семей и проживающие на территории Российской Федерации дети иностранных граждан, прибывшие из неблагополучных по туберкулезу стран.

5.2. Проба Манту проводится 2 раза в год:

— детям, не вакцинированным против туберкулеза по медицинским противопоказаниям, а также не привитым против туберкулеза по причине отказа родителей от иммунизации ребенка, до получения ребенком прививки против туберкулеза;

— детям, больным хроническими неспецифическими заболеваниями органов дыхания, желудочно-кишечного тракта, сахарным диабетом;

— детям, получающим кортикостероидную, лучевую и цитостатическую терапию;

5.3. Постановка пробы Манту осуществляется средними медицинскими работниками детских, подростковых, амбулаторно-поликлинических и оздоровительных организаций, прошедших обучение в противотуберкулезных медицинских организациях и имеющих справку- допуск.

Средние медицинские работники детских, подростковых, амбулаторно-поликлинических и оздоровительных организаций проходят обучение в противотуберкулезных медицинских организациях не реже 1 раза в 2 года.

5.4. Не допускается проведение пробы Манту на дому, а также в детских и подростковых организациях в период карантина по инфекционным заболеваниям. Постановка проб Манту проводится до профилактических прививок.

5.5. Интервал между профилактической прививкой, биологической диагностической пробой и пробой Манту должен быть не менее одного месяца. В день постановки туберкулиновых проб проводится медицинский осмотр детей.

5.6. В течение 6 дней с момента постановки пробы Манту направляются на консультацию в противотуберкулезный диспансер по месту жительства следующие категории детей:

— с длительно сохраняющейся (4 года) реакцией (с инфильтратом 12 мм и более);

— увеличение менее чем на 6 мм, но с образованием инфильтрата размером 12 мм и более;

— с гиперреакцией на туберкулин — инфильтрат 17 мм и более;

— при везикуло-некротической реакции и лимфангите.

5.7. Дети, направленные на консультацию в противотуберкулезный диспансер, родители или законные представители которых не представили в течение 1 месяца с момента постановки пробы Манту заключение фтизиатра об отсутствии заболевания туберкулезом, не допускаются в детские организации.

Дети, туберкулинодиагностика которым не проводилась, допускаются в детскую организацию при наличии заключения врача-фтизиатра об отсутс

источник

Туберкулез — опасное заболевание, которое успешно лечится при своевременной диагностике.

Одно из наиболее информативных исследований, позволяющих выявить недуг на ранней стадии, носит название метод ПЦР (полимеразной цепной реакции).

Анализ ПЦР — не только самое информативное, но и одно из самых доступных исследований, которое позволяет выявить туберкулез на ранних стадиях.

Все живые микроорганизмы, включая вирусы и бактерии, содержат в своей структуре молекулы РНК и ДНК. Выделив эти кислоты, можно с большой достоверностью сказать, какие чужеродные агенты присутствуют в крови человека, и поставить точный диагноз.

Суть метода ПЦР заключается в особой обработке образцов биологических жидкостей, в результате чего можно определить, к какому виду относятся присутствующие в нем микроорганизмы.

Методика ПЦР применяется у людей с тяжелыми поражениями легких в тех случаях и респираторными проявлениями (сильный кашель, кровохаркание), когда точно диагностировать болезнь по клиническим симптомам невозможно.

Рекомендуется пройти исследование и после непосредственного контакта с носителем заболевания. В число преимуществ, которыми он обладает, входят:

скорость выполнения — для получения результата не нужно выращивать культуру возбудителя или проводить другие сложные процедуры;
высокая информативность — при диагностике туберкулеза точность анализа достигает 90% и выше;
высокая чувствительность и специфичность — для выявления возбудителей болезни в материале может содержаться всего одна клетка вируса;
универсальность — для анализа подходят практически любые биологические жидкости: мокрота, кровь, смывы бронхов.

Для сравнения: точность микроскопии мазков мокроты, которая используется для выявления туберкулеза, составляет всего 40-50%, а при низком количестве возбудителей снижается до 10% и меньше. Культуральные исследования мокроты более информативны, но для получения результатов требуется от 2 до 8 недель.

Можно использовать ПЦР на туберкулез вместо Манту, если у человека имеются какие-либо противопоказания к пробе.

К недостаткам методики относится риск получения ложноотрицательного результата. Иными словами, отсутствие в мокроте, крови или моче специфического ДНК еще не говорит об отсутствии туберкулеза у больного.

Важно. При диагностике туберкулеза у детей чувствительность анализа ПЦР ниже, чем у взрослых, и составляет около 25-83%.

Фото 1. Делать ПЦР вместо Манту ребенку, это хороший вариант, если он аллергик или часто болеет.

Процедура проведения анализа ПЦР проводится посредством специального прибора под названием амплификатор, и состоит из четырех этапов. Для проведения исследования необходимы участки ДНК, с которых начинается синтез молекул, нуклеотиды (основы молекул ДНК), а также полимераза, или фермент, ускоряющий проведение процедуры.

Забор биологического материала (мокрота, кровь, смывы бронхов).
Прогревание образца до температуры около 98% для разрушения первичной структуры цепочки ДНК.
Отжиг, или снижение температуры на несколько градусов, чтобы связать праймер с нитью ДНК.
Синтез молекул, необходимых для получения результата.

После проведения 25-30 подобных циклов образуется определенное количество копий ДНК вирусов, по которым легко определить возбудителя заболевания.

Внимание: анализ ПЦР не отличает «мертвые» микроорганизмы от «живых», поэтому результат может быть положительным в течение определенного времени после проведенного лечения.

Если сдается анализ крови ПЦР на туберкулез, то нет необходимости в специальной подготовке, но больным рекомендуется придерживаться общих правил: воздержаться от приема пищи не менее чем на 8 часов, исключить алкоголь и прием медикаментозных препаратов, не курить в течение часа перед забором материала.

Мокроту собирают в утреннее время после чистки зубов и тщательного полоскания полости рта.

Если экссудат выделяется плохо, накануне вечером следует принять отхаркивающий препарат или сделать ингаляцию. Диагностическую ценность имеет мокрота со слизью, гноем, белыми или желтоватыми вкраплениями.

Если взять мокроту на анализ невозможно, для выявления возбудителей заболевания используются смывы из бронхов. Такой анализ не требует подготовки, а забор материала выполняется следующим образом. С помощью гортанного шприца больному вливают в трахею раствор хлорида натрия, который вызывает сильный кашель — выкашлянная жидкость используется для исследования.

Внимание. Результат анализа искажают антибиотики, гепарин и другие препараты, использующиеся для местного лечения, поэтому исследование рекомендуется проводить через 10-14 дней после приема.

источник

Туберкулез социально опасное заболевание. Широкое распространение среди людей всех возрастов делает необходимым проведение скрининговых (быстрых и дешевых) обследований на это заболевание. Тест, который многие годы использовался для определения этого заболевания – это проба Манту. Тест является диагностическим выбором для максимального охвата населения. Отличается простотой проведения, дешевизной и достаточно высокой информативностью. Особенно активно ее применяют в детских коллективах. Однако, при ее проверке возможна фиксация ложноположительных результатов, поэтому и на смену этой пробе пришел новый ПЦР анализ. Для его проведения нужно сдавать кровь на туберкулез. Анализ крови на туберкулез вместо Манту называется полимеразная цепная реакция (ПЦР).

Манту – это проба, которую проводят с помощью подкожного введения малых дозировок туберкулина для проверки наличия у человека заболевания туберкулез или же предрасположенности к нему. Туберкулином называется антиген-вытяжка из бактерий туберкулеза. То есть проба Манту — это анализ на антитела к туберкулезу.

Чаще всего данную пробу проводят, чтобы проверить есть ли туберкулез у детей дошкольного и школьного возрастов.

Это исследование не является прививкой, как думают многие, так как она не создает иммунитет организма к бактериям туберкулеза, а проверяют его наличие. После проведения в месте прокола проявляется припухлость. По прошествии 3 дней результат анализируется. При этом специалист осматривает место прокола, оценивает характер уплотнения: цвет, размер и рисунок. Важно, чтобы человек соблюдал определенные правила ухода в эти дни. Самым важным является то, что уплотнение нельзя мочить и т.д.

Если уплотнение от 4 до 16 мм, то это считается нормой. Показатель при туберкулезе легких – это 17 мм и больше. Но уже доказано, что часто проявляются ложные результаты. Поэтому все популярнее стает ПЦР анализ вместо Манту. Иногда назначают совместную диагностику, то есть нужно сдавать кровь после Манту.

Сегодня во многих клиниках можно пройти анализ крови на туберкулез вместо манту. Что это такое? Исследование называется ПЦР – полимеразная цепная реакция, оно является высокочувствительным. Это обусловлено тем, что с его помощью можно выявить даже 1-2 микробактерии возбудителя. Достоверность ПЦР очень высокая– в 98% происходит выявление патологических клеток. Поэтому ученые считают полимеразную цепную реакцию важным открытием в микробиологической науке за последнее время. ПЦР диагностика — это метод выбора Всемирной организации здравоохранения при туберкулезе.

Диагностика ПЦР на туберкулез эффективна и при контроле качества лечения, так как с помощью исследования врач может определить устойчивость бактерий к лекарствам. Устойчивость к лекарственным препаратам при лечении является очень серьезной проблемой, она снижает эффективность лечения в разы, поэтому так важно для врача-фтизиатра знать о ней у конкретного пациента. Это помогает правильно определить тактику лечения.

Также анализ крови на туберкулез просто необходим для людей, которые уже перенесли это заболевание, для выявления рецидивов. Исследование дает возможность диагностировать рецидив на раннем этапе, что позволяет вовремя начать лечение и предупредить развитие серьезных осложнений. Свою эффективность анализ на туберкулез доказал и в тех случаях, когда его локализация внелегочная.

К анализу крови ПЦР, так же как и к иммуноферментному исследованию не нужны особые подготовки. Иногда требуется перед исследованием отменить на некоторое время прием определенных лекарств. Об этом предупредит лечащий врач, который и направит на исследование.

Никаких возрастных ограничений для проведения исследования на микробактерии туберкулеза нет. Анализ крови ПЦР делают взрослым и детям. Так как он абсолютно безопасен. Но все же в школах и садиках чаще детям делают пробу Манту, а ПРЦ диагностику больше используют для взрослых людей. Особенно для тех, у кого ранее был туберкулез.

Сдать свою кровь на туберкулез можно в специализированной лаборатории. Кровь при анализе на туберкулез собирается в пробирку с веществом, которое не дает ей сворачиваться. Важно соблюдать все условия стерильности, а также запрещено взбалтывать пробирки с кровью на туберкулез при анализе, так как будет затруднен процесс отделения ее клеток от плазмы.

Далее происходит лабораторный процесс, при котором отделяется плазма от клеток, и лаборант через микроскоп определяет есть ли клетки возбудителя в биологическом материале. Заключительный этап исследования основывается на создании определенных условий для клеток. То есть в осадочный материал добавляются вещества, которые спровоцируют реакцию, также при этом должны быть определенные температурные показатели. Таким веществом является фермент транскриптаза. В результате этих действий получается обновленный материал ДНК, который должен расшифровываться специалистом. После этих действий лаборант может дать точное заключение о наличии или отсутствии туберкулеза у человека.

Биологическим материалом для приведения анализа ПЦР может быть, как кровь, так и моча. Для проведения анализа мочи на ПЦР необходима утренняя порция в количестве 20-30 мл. Для проведения исследования крови потребуется 1 мл венозной крови.

Расшифровки анализов ПЦР можно получить в довольно короткий срок – 1-2 дня. А в некоторых случаях его проводят всего за 4-5 часов. Это уместно если результаты нужны срочно, перед экстренной операцией и т.д.

ПЦР расшифровка может быть простой и сложной. В первом случае результат будет отрицательным и никаких патологических клеток обнаружено не будет, или же их будет очень мало. Сложная ПЦР расшифровка нужна при высоком содержании клеток, так как при этом необходимы точные расчеты. Есть определенные нормы, по которым квалифицированный специалист расшифровывает анализ крови на туберкулез. При этом он может диагностировать стадию и причины заболевания.

Проба Манту – это процедура, для проведения которой должны быть соблюдены определенные условия, так как есть ряд противопоказаний. Ее запрещено проводить детям в таких случаях:

Если в данный момент у ребенка есть хронические заболевания, которое обострились;
На теле есть какие-либо высыпки, кожные заболевания;
Аллергические реакции любого проявления;
Эпилепсия.

Если провести исследование в этих случаях, то реакция может быть разной, и даже непредсказуемой. Также иногда есть индивидуальная хроническая несовместимость, при этом сдавать кровь на ПЦР – это оптимальная альтернатива Манту.

Главным отличием пробы Манту от анализа ПЦР является то, что у человека может развиться аллергическая реакция и другие осложнения после введения антигена вплоть до анафилактического шока, а анализ крови абсолютно безвреден.

Особых недостатков анализа на микробактерии нет. Но все же специалисты отмечают, что не всегда отрицательные результаты ПЦР исследования является 100% гарантией отсутствия заболевания. Также ПЦР не всегда назначают людям с тяжелым поражением легких, так как в некоторых случаях диагноз не определяется. Малоэффективным анализ крови при туберкулезе будет у больных с иммунодефицитами разных типов.

Можно сделать вывод, что новый метод диагностики — полимеразная цепная реакция является более информативным и безопасным, чем проба Манту, которая уже многие годы используется в медицинской практике. Не смотря на то, что новое исследование дороже и более трудоемкое при проведении, его информативность выше, поэтому оно более оправдано для диагностики.

Если лечение врачей не помогает полностью избавиться от туберкулеза. Таблеток приходится пить все больше. К туберкулезу присоединились осложнения от антибиотиков, а результата нет. Узнайте, как наши читатели победили туберкулез. Читать статью >>

источник

Каждый год детям проводят пробу Манту, которая может определить начальную стадию туберкулеза. Но имеется специальный анализ крови на туберкулез вместо Манту.

Показанием к проведению Манту является возможность выявить инфицирование туберкулезом. Пробу делают детям для профилактики болезни. Но этот тест не назначают для диагностики.

Анализ крови ИФА выявляет способность туберкулеза прогрессировать. Этот тест не назначают, чтобы обнаружить инфицирование туберкулезом, т.к. у него плохая эффективность при диагностировании.

Исследование крови, которое называется ПЦР, не позволяет выявить инфицирование, но установить болезнь тест может с высокой точностью. Поэтому в некоторых ситуациях бывает необходимо заменить Манту на тестирование крови при диагностировании и терапии болезни. Поскольку сейчас 40% населения планеты инфицировано туберкулезом, надо принимать меры для защиты людей от заражения этим заболеванием.

Чтобы предупредить болезнь, назначают лабораторные анализы.

Основными противопоказаниями к Манту являются:

кожные болезни;
повышенная чувствительность к компонентам вакцины;
хронические болезни в острой форме;
эпилепсия.

Анализ крови вместо Манту пациентам детского возраста назначают при наличии противопоказаний к пробе Манту. Противопоказанием к назначению тестирования крови является ее плохая свертываемость.

Чтобы результат исследования был точным, к нему необходимо подготовиться. Перед проведением теста нужно прекратить прием антибиотиков, т.к. они могут исказить результаты. Сдавать анализ нужно утром натощак. После последнего приема пищи должно пройти более 5 часов. За несколько суток до теста нельзя употреблять спиртные напитки. Перед сдачей теста следует избегать жирной пищи, физических и эмоциональных перегрузок.

Во время лабораторного тестирования ПЦР кровь смешивают в пробирке с туберкулезной палочкой. Затем в содержимое пробирки добавляют ферменты и определяют реакцию. Для ИФА взятие материала осуществляется из вены.

Медики не рекомендуют заменять Манту исследованием крови. Пациента направляют сдавать кровь, если проба Манту у него положительная. Но если из всех методов диагностики выбирать лучший, то можно остановиться на этом исследовании. Материал для тестирования должен быть чистым, поэтому проводить тест надо в специальной лаборатории. В таком учреждении могут спросить, какое обследование вам необходимо. Поэтому, чтобы сдать кровь на туберкулез, надо иметь при себе направление от лечащего врача.

Существуют методы тестирования крови, которые назначают вместо Манту:

Метод ИФА (иммуноферментный анализ) является альтернативой Манту, потому что помогает выявить скорость распространения существующего заболевания и не применяется для профилактического исследования. Врачи считают его информативным и несложным в проведении. Его часто используют, чтобы уточнить результаты Манту.

Поскольку в отдаленных регионах нет качественного оборудования для проведения такого теста, то для определения заражения лучше там его не делать.

Обследование при помощи ПЦР (полимеразная цепная реакция) является наиболее точным. При проведении анализа ПЦР на туберкулез результат на 100% считается достоверным, если тест назначают для выявления болезни.

Методика проведения исследования заключается в следующем:

небольшое количество материала помещают в вещество, которое предупреждает свертываемость крови;
после этого отделяют плазму;
под микроскопом определяют возбудителя;
затем осадок перемешивают со специальным веществом и помещают смесь в помещение с необходимой температурой.

Происходит образование обновленного ДНК. Его наличие дает возможность установить диагноз и назначить лечение. Это обследование могут назначать пациентам любого возраста. Тестирование крови является эффективной заменой Манту при осуществлении своевременной диагностики. ПЦР выявляет наличие инфекции и характеристики бактерии. Этот метод используют для диагностирования туберкулеза различных органов.

Расшифровка теста осуществляется лечащим врачом. Результат бывает положительным или отрицательным. Если в крови не обнаружили бактерии, то результат считают отрицательным. При этом снимается подозрение на наличие болезни. Если были найдены бактерии, вызывающие заболевание, то результат считают положительным.

Такой результат показывает, что пациент может быть больным туберкулезом. Результат ИФА может быть положительным при выявлении иммуноглобулина AMG. Это говорит о том, что заражение возможно. При этом могут отсутствовать симптомы и наличие активной стадии болезни.

Отрицательный результат бывает тогда, когда врач не смог выявить иммуноглобулины. Если человек болен, то общий анализ покажет увеличение скорости оседания эритроцитов СОЭ больше на 50 единиц. При заболевании будет увеличен показатель эозинофилов. Таким образом можно отметить, что исследование крови — это более точная процедура, чем реакция Манту.

источник

ПЦР на туберкулез проводится в тех случаях, когда нет возможности сделать пробу Манту. Метод диагностики является одним из основных способов установления наличия антител или частичек ДНК вируса. Но о взаимозаменяемости исследований продолжаются споры, так как методы имеют различную цель.

Туберкулез – опасное вирусное заболевание, которое характеризуется поражением легких. Патология может протекать скрытно на начальных этапах и для диагностики используются различные методы. Основным из них является лабораторное исследование, позволяющее выявить наличие клеток вируса. С целью диагностики заболевания проводится проба Манту. Но в некоторых случаях у детей могут возникать определенные осложнения. Также анализ не всегда бывает точным. В результате требуется проведение более эффективного исследования.

Одним из подобных лабораторных исследований является полимеразная цепная реакция (ПЦР). Метод достаточно эффективен и высокочувствителен. Результаты можно будет получить уже спустя 1-2 дня. В отличие от него, более распространенный культуральный способ установления заболевания занимает около 6 недель. За этот период времени патологический процесс распространятся на большие участки, возрастает риск развития осложнений.

ПЦР имеет ряд преимуществ перед пробой Манту. Но это не является свидетельством того, что данный метод может быть использован для выявления антител туберкулеза.

ПЦР перед пробой Манту имеет еще одну отличительную особенность. Способ диагностики позволяет выявить внелегочную форму патологии. Использование ПЦР также оправдано в тех случаях, когда нужно установить не только наличие вируса туберкулеза, но и источник заражения. Это необходимо тем, кто уже перенес заболевание. Так как повторное развитие наблюдается спустя год после окончания периода реабилитации. Анализ крови на туберкулез также незаменим пациентам, у которых установлен иммунодефицит или с целью уточнения установленного диагноза при сильном поражении легких.

ПЦР анализ проводится с помощью забора биологической жидкости человека. Чаще всего используется кровь. Но также могут быть использованы:

Перед процедурой специалист подготавливает предметное стекло, нанося на его поверхность специальный раствор для предотвращения свертываемости крови. Затем обрабатывает место прокола на пальце с помощью ватного тампона, смоченного в спиртовом растворе.

Первую каплю крови убирают ватой, а остальную в нужном количестве набирают в пробирку. Место прокола снова обрабатывают с помощь ватки и спиртового раствора.

Затем специалист наносит на предметное стекло небольшое количество крови. И направляет анализ в лабораторию. Там клетки отделяют от плазмы и рассматривают материал под микроскопом с целью выявления наличия возбудителя.

Заключительный этап процедуры проводится для выявления наличия туберкулеза. Для этого к осадочному составу добавляют специальные вещества, которые создают нужную температуру. В результате получается обновленный ДНК-материал.

Данная методика диагностирования позволяет выявить туберкулез и определить верную методику терапии. Анализ проводится как детям, так и взрослым и незаменим для быстрого выявления заболевания. На основе результатов удается установить источник заражения. ПЦР проводится вместо пробы Манту в экстренных случаях, когда у врача появляются подозрения на значительное поражение легких.

ПЦР и проба Манту ребенку проводят для различных целей и по поводу их взаимозаменяемости ученые до сих пор ведут споры.

Ведь микроорганизмы могут находиться в клетках. В этом случае анализ ПЦР не будет эффективен и даст отрицательный результат.

Полимеразная реакция может дать и ложноположительные результаты. Это происходит в 10% всех случаев.

Поэтому многие врачи придерживаются мнения, что ПЦР на туберкулез не может быть использована вместо пробы Манту. Несмотря на то, что метод имеет множество преимуществ, он не может определить наличие вируса в клетках организма. В этом случае результат будет отрицательным. Но лабораторное исследование используется в тех случаях, когда требуется срочная диагностика патологии.

источник

Туберкулез или чахотка – одно из наиболее популярных инфекционных заболеваний 21 века. Возбудителями его являются специальные микробактерии – палочки Коха.

Распространяется заболевание не только на легкие, но головной мозг, пищеварение, суставы или позвоночник, мочеполовую систему, кожный покров.

Согласно данным ВОЗ, ежегодно туберкулезом болеет 10 миллионов человек, из которых 3 миллиона – с летальным исходом.

Особенно печальная ситуация на территории стран СНГ, здесь периодически случаются туберкулезные эпидемии. Россия, Казахстан, Украина возглавляют печальный рейтинг по распространению данной заразы.

Инфекция легко передается воздушно-капельным путем или через пищеварительную систему, поражает жизненно-важные органы, а также способна быстро приспосабливаться к полимерным лекарствам и химиотерапии.

Одним из главных факторов успешного излечения при туберкулезе является своевременное обнаружение инфекции.

Человечество придумало множество методов распознания опасной болезни. Диагностика туберкулеза разделяется на инструментальную и лабораторную.

В первом случае производится анализ крови на туберкулез, а также мокроты, мочи.

Вторая группа представляет собой исследование при помощи рентгена и эндоскопии. Инструментальные методы диагностики туберкулеза в свою очередь бывают лучевыми и хирургическими.

Флюорография — способ диагностирования заболевания, знакомый каждому жителю СНГ. При помощи рентгеновых лучей исследуются легкие и внутригрудные лимфатические узлы.
Рентгенография грудной клетки – похожий на флюорографию, но более качественный метод обнаружения инфекции. Снимок получается подробнее и в двух проекциях, но эта процедура примерно в шесть раз дороже. Обычно ей пользуются после того, как возникли серьезные подозрения на заболевание.
Компьютерная томография осуществляется как дополнительная диагностика, применяемая также после серьезных оснований на наличие инфекции.

К хирургическим способам диагностирования относят эндоскопию бронхов, а также медиастиноскопию и торакокоскопию.

Первый метод заключается в исследовании бронхиального дерева легких при помощи «зонда» в этот орган. Остальные два способа дают возможность изучить плевральную часть легкого при помощи прокола грудной клетки.

Все три метода являются серьезным хирургическим вмешательством и применяются чаще всего в процессе прогрессирования заболевания.

К лабораторным исследованиям относят:

Анализ мокроты на туберкулезную палочку.
Микроскопические исследования.
ПЦР диагностика туберкулеза

Одним из наиболее совершенных способов лабораторной диагностики инфекций специалисты называют полимеразную цепную реакцию.

Этот метод разработал знаменитый ученый из США Кэрри Муллис в 1983 году, за что получил Нобелевскую премию.

ПЦР анализ представляет собой выделение частиц ДНК из образцов мокроты, крови, спинномозговой жидкости, кала и т.д. для последующего их биосинтеза.

При помощи сложного молекулярно-генетического исследования определяется природа микробов, находящихся в теле пациента.

Проводится такого рода анализ на туберкулез в несколько этапов:

Вначале берутся биологические образцы. Материалы помещаются в специальные контейнеры и направляются в лабораторию.
В центре для исследований анализы нагревают до 97 градусов. Это дает возможность разрушить структуру генома ДНК микроорганизмов, который состоит из нескольких цепочек.
Температура специально понижается для того, чтобы праймеры (участники ДНК, с которых начинается процесс биосинтеза) могли соединиться с какой-нибудь цепью дезоксирибонуклеиновой кислоты.
После этого осуществляется биосинтез необходимых для обнаружения молекул.

После 25-30 повторенных циклов в процессе лабораторных исследований врачи имеют возможность распознать, имеются в теле пациенте или нет инфекционные микроорганизмы.

ПЦР на туберкулез является самой современной диагностической методикой. Способ дает возможность обнаружить инфекцию на любой стадии с высокой достоверностью. Преимущества:

Скорость – на исследование уходит не более пяти часов. О результатах проверки на микробактерии туберкулеза можно узнать в течение суток.
Безопасность – метод ПЦР не имеет возрастных противопоказаний.
Своевременность — данная методика позволяет обнаружить туберкулез на тех стадиях, когда болезнь не имеет симптомов.
Высокая степень точности – если в анализах находится всего несколько микроорганизмов, они будут найдены при помощи полимеразной цепной реакции. Также такая методика дает возможность легко определить возбудитель туберкулеза.
Универсальность — диагностика используется не только для обнаружения чахотки, но и других болезней, таких как хламидиоз, гонорея и т.д.

Несмотря на множество плюсов, использование данной методики в отечественной медицинской практике является скорее исключением, чем правилом. На это есть ряд оснований.

Недостатками данного метода являются:

Высокая стоимость обследования.
Метод не годится для тех, кто прошел курс терапии, так как наличие мертвых бактерий Коха может привести к ложноположительному результату.
В случае мутации инфекционных микроорганизмов их геном можно не распознать, сделав ложный вывод.
Важно правильно подобрать среду обнаружения. К примеру, результат анализа крови пцр на туберкулез(разбавочное вхождение) будет отрицательным, если инфицирована нервная система.
Не всегда получится применить этот метод к пациентам, у которых диагностировано поражение легких.

Кроме этого, для такого анализа на туберкулез необходимо современное оборудование, которым не обладает 90 процентов больниц. В СНГ такой анализ может осуществить сеть клиник Инвитро.

Рекомендации к пациентам, проходящим такой тест на туберкулез, различаются в зависимости от типа анализа, который они сдают.

При приеме крови на ПЦР необходимо за час до процедуры воздержаться от курения, за два – исключить прием алкогольных напитков и жирной еды.

Рекомендуют также воздержаться от физических нагрузок, нельзя также делать забор крови на туберкулез натощак.

При сдаче мазка из ротовой и носовой полости нельзя принимать пищу 2-4 часа до процедуры, иначе он не будет информативен. Также не следует употреблять алкоголь.

Для точных показаний анализа запрещено курить ранее, чем за час до процедуры. Накануне воздержитесь от чистки зубов и использования спреев и аэрозолей для рта.

При подозрении на туберкулез мочеполовой системы пациент за 2-3 дня до сдачи должен исключить секс, за 2-3 часа до процедуры не ходить в туалет «по-маленькому». Половые органы необходимо мыть обычной водой без специальных средств.

Женщинам советуют не использовать вагинальные таблетки, свечи, шарики, а также воздержаться от анализов в критические дни.

За 5 дней до сдачи результат необходимо отказаться от процедуры кольпоскопии, а также трансвагинального УЗИ,

Такую сложную диагностику имеет возможность провести далеко не каждая клиника, но все чаще врачи прибегают к таким способам исследования. Обычно такого рода анализы проводятся в особых ситуациях.

В случае сомнительных результатов манту может применяться анализ крови на туберкулез.
В случаях, когда пациент контактировал с инфицированным, но лечащий врач не может точно определить диагноз.
При срочной операции, когда необходимо в сжатые сроки выяснить, имеется ли у больного данная инфекция.
При беременности у пациентки, когда другие способы исследования не являются достаточно безопасными для новорожденного ребенка.

Стоит отметить, что данная диагностика из-за своей безвредности рекомендуется детям.

Если у школьника имеются противопоказания против туберкулиновой пробы, он может сдать анализ крови на туберкулез вместо манту методом ПЦР.

источник

Для ребенка как альтернатива реакции Манту — есть у нас в городе?

У меня только информация сроком давности год — по слухам ПЦР есть в НИИ фтизиопульмонологии (как вот туда еще попасть, когда у фтизиатров — все понаправлениям), а в частных клиниках — только мочеполовой системы.
Запарились с фтизиатром. Манту от 16 мм в год упала до 11 (налицо иммунитет от БЦЖ) — в этом году получаем 12. Кричат — «рост», хотя это бред полный, для виража нужно 6 мм роста.
В общем, очень бы хотелось найти ПЦР-диагностику, чтобы окончательно успокоить фтизиатра. Недавно еще узнала, что ПЦР рекомендован Минздравом и является «официальным методом».

[Сообщение изменено пользователем 23.12.2006 21:35]

похоже на то я все еще в процессе поиска информации

я действительно ничего в этом не понимаю, т.к. с образованием академии госслужбы я настолько далека от медицины. максимум (спасибо базовому юридическому) я более менее в их системе и инструкциях разобралась, что по крайней мере теперь позволяет требовать дополнительной диагностики

нам ведь умудрились в изониазид выдать на основании одной «плохой манту»

По ПЦР я нашла вот что:
Полимеразная цепная реакция (ПЦР), основанная на обнаружении участка ДНК, характерного только для данного возбудителя, может служить одним из методов экспресс-диагностики туберкулеза. Высокая чувствительность ПЦР позволяет обнаружить в исследуемом материале единичные клетки или даже фрагменты ДНК возбудителя в течение 4-5 часов.

Благодаря отсутствию перекрестных реакций с ДНК бактерий — возбудителей других легочных инфекций (L.pneuphila, M.pneumoniae, K.pneumoniae, Y.pestis, Y.pseudotuberculosis, S.aureus, E.coli, F.tularensis), а также с ДНК человека, ПЦР обладает высокой специфичностью (100%). Чувствительность ПЦР при тестировании образцов патологического материала полученного от больных с различными формами туберкулеза легких составляет: мокроты — 63,5-80,0%, мочи — 50,0-78,8%, плевральной жидкости — 45,8-54,5% и крови — 17,2-42,8%. Моча достаточно часто служит прекрасным материалом для выявления специфической ДНК у больных с распространенным туберкулезом легких, без сопутствующего специфического процесса в почках и мочевыделительной системе.

ПЦР дает возможность дифференциальной диагностики при ограниченных формах туберкулеза (очаговых инфильтратах, туберкулемах, туберкулезе внутригрудных лимфатических узлов), а также при диссеминированной форме туберкулеза, при которых дифференциальная диагностика с использованием только традиционных микробиологических методов весьма затруднена в связи с редким обнаружением возбудителя в мокроте. Обобщая результаты бактериоскопии, посева на плотные питательные среды и исследования методом ПЦР материала, полученного от больных ограниченными формами туберкулеза можно сделать вывод о том, что последняя обладает значительно более высокой чувствительностью по сравнению с традиционными методами. В частности при сравнительном исследовании одного и того же материала бактериоскопией было получено 11,2% положительных результатов, методом посева на питательные среды — 19,3%, и методом ПЦР — 51,6% таких результатов.

Практически полное совпадение результатов сравнительного исследования патологического материала микробиологическими методами и методом ПЦР отмечается только при хронических деструктивных формах туберкулеза легких: кавернозной и фиброзно-кавернозной. Такое совпадение результатов обусловлено наличием у пациентов постоянного массивного бактериовыделения, характерного для таких форм туберкулеза.

ПЦР достаточно информативна при необходимости подтверждения диагноза туберкулеза у детей и подростков при отрицательных результатах традиционных микробиологических методов исследования.
Использование ПЦР в диагностике туберкулеза рекомендовано Минздравом РФ (приказ от 21.02.2000 №64 «Об утверждении номенклатуры клинических лабораторных исследований», п. 9.4.5. приложения).

Использование ПЦР раскрывает возможности проведения, параллельно с традиционным бактериологическим способом определения лекарственной резистентности, экспресс-диагностики резистентности микобактерий туберкулеза к лекарственным препаратам методом выявления точечных мутаций в генах. В настоящее время известны следующие гены микобактерии туберкулеза, мутации в которых вызывают резистентность к лекарственным препаратам: rpoB — к рифампицину, katG, inhA, oxyR, ahpC, kasA — к изониазиду, rpsL — к стрептомицину, gyrA — к фторхинолонам, pncA — к пиразинамиду, embCAB — к этамбутолу. При этом, в большинстве случаев, исследованные клинические изоляты, устойчивые к рифампицину, оказались резистентными и к другим противотуберкулезным препаратам. Таким образом, устойчивость к рифампицину является маркером полирезистентности.

источник

В случае подозрения на заболевание лучше сразу сдать анализ ПЦР на туберкулез. Во время этого исследования берется кровь, которая проверяется под микроскопом. Полимерная цепная реакция все чаще стала заменять пробу Манту, чтобы выявить туберкулез.

Данный анализ уже через несколько часов определяет наличие возбудителя. Кроме того, если в организме будет присутствовать малое количество бактерий, данный метод все равно сможет их выявить.

Основным достоинством теста ПЦР являются следующие положительные моменты:

Болезнь выявляется в 100% случаев.
Специфичность ДНК МБТ высока.
Анализ выявляет возбудителя за 4-4,5 часа.
Успешно диагностируется туберкулез легких, с чем не могут справиться другие методы.
Возможность выявления определенного фрагмента, который содержится в данном возбудителе.

Полимерная цепная реакция дает возможность не только своевременно выявить возбудителя и начать лечение больного, она позволяет вовремя изолировать человека от общества в случае заражения. Палочка Коха — возбудитель туберкулеза — может находиться в организме где угодно. И лишь ПЦР анализ позволяет выявить ее в месте нахождения.

Исследование ПЦР также дает возможность подобрать лекарственный препарат в зависимости от чувствительности микроорганизмов.

В ХIХ веке туберкулез называли чахоткой. Болезнь представляет собой инфекционное поражение внутренних органов, преимущественно легких. Туберкулез передается воздушно-капельным путем при чихании и кашле. Объектом заражения может быть как человек, так и животное.

После проникновения бактерий туберкулеза в организм болезнь длительное время может протекать в скрытой форме.

В зависимости от степени воздействия заболевшего человека на окружающих различают 2 формы заболевания:

Закрытая форма туберкулеза. Она не является опасной, т.к. человек не может заразить окружающих. Даже в анализах, в т.ч. и ПЦР, микобактерии заболевания не выявляются. Но все же опасность при данной форме присутствует, т.к. в любой момент закрытая форма может перейти в открытую. Такая активная форма туберкулеза может быть опасна не только для самого больного, но и для окружающих.
Открытая форма инфекции. При ней в биологических жидкостях человека выявляется палочка Коха. Больной туберкулезом на этой стадии несет особую угрозу для окружающих. Заразиться можно даже в том случае, если носитель тщательно следит за собой в плане гигиены.

К наиболее распространенным методам исследований, проводимых для выявления болезни, относятся:

Флюорография.
Томография грудной клетки или других пораженных мест.
Рентгенографическое исследование.
Исследование биологических материалов больного.
Туберкулиновая проба (Манту).

К наиболее эффективным способам выявить палочку Коха относится молекулярно-генетический анализ полимеразной цепной реакции — ПЦР диагностика туберкулеза.

Полимеразная цепная реакция — это наиболее точный молекулярно-генетический анализ. Если произошло заражение туберкулезной инфекцией, полимерный тест исследования позволяет точно выявить ДНК или РНК возбудителя болезни. Для этого необходимо сдать кровь или другую биологическую жидкость.

Чтобы определить наличие туберкулеза, достаточно минимального количества бактерий, подойдет даже 1 клетка.

К другим преимуществам ПЦР диагностики относятся следующие:

При проведении данного анализа используется особый фермент, благодаря которому выявляется точное присутствие туберкулезной инфекции.
Анализ ПЦР особо чувствителен к микобактериям инфекции, поэтому точность диагностики приравнивается почти к 100%.
Уже через 3,5-5,5 часов после того, как тест проведен, можно будет узнать результаты анализов.

При таком заболевании, как туберкулез, очень важно выявить патологию на ранних ее стадиях. Поэтому тест на полимеразную цепную реакцию является наиболее информативным в этом случае. Когда бактерии только начинают атаковать, следует выявить их как можно раньше, пока их воздействие не затронуло жизненно важные функции внутренних органов.

Анализ ПЦР имеет еще 1 преимущество перед другими видами исследования: методика определяет чувствительность микроорганизмов к тому или иному лекарственному препарату, что позволяет терапии быть наиболее эффективной.

Если сдается слюна, то требуется подготовка к этому. За 12 часов перед процедурой необходимо отказаться от курения, алкоголя, приема лекарств и еды. Чистка зубов, полоскание рта различными освежителями и даже применение зубной нити запрещены. Также нельзя использовать губную помаду и жить половой жизнью. Следует ополаскивать ротовую полость кипяченой водой.

Не только туберкулез выявляется при помощи метода ПЦР. Тем же способом можно обнаружить и такие не менее серьезные недуги, как герпес, хламидии, мононуклеоз, пневмонию, бароллеоз, ВИЧ, гепатит, краснуху.

Чаще всего берется кровь из вены, но в некоторых случаях может понадобиться совершенно другой биологический материал:

Слюна.
Анализ мочи.
Соскоб из любой части тела.
Половые выделения.
Кал.
Спинномозговая жидкость.
Взятие мокроты из бронхов при отхаркивании.
Анализ слизи.

Но самым информативным методом ПЦР все-таки является анализ крови на туберкулез.

Несмотря на то что процедура выявления возбудителя по методу ПЦР занимает всего 4-4,5 часа, она относится к наиболее сложным видам диагностики. Многие факторы могут повлиять на точность результатов. Например, собирать образцы на исследование необходимо по определенным правилам. Основным из них является повышенная стерильность при сборе биологического материала. Поэтому данный анализ сложно проводить маленькому ребенку.

Если берется образец в качестве крови из вены, то специалист проводит анализ крови на ПЦР на туберкулез не только стерильным шприцем, но и по всем правилам соблюдения общей гигиены.

Кровь собирается в специальную пробирку и на протяжении всего исследования хранится в таких условиях, которые препятствуют ее свертываемости.

Если это анализ ПЦР мочи на туберкулез, то жидкость собирается рано утром, когда человек только проснулся. Перед походом в туалет больной принимает душ и после этого берет стерильную емкость для сбора урины.

В случае взятия соскоба с половых органов, как у женщин, так и у мужчин, вся процедура проводится в условиях медицинского учреждения.

Существуют и более сложные анализы, например взятие жидкости из спинного мозга. В этом случае все действия проводятся в условиях стационара опытными врачами.

Чаще всего прохождение анализа полимерной цепной реакции назначается в таких случаях:

Чтобы диагностировать болезнь в легочной ткани.
Чтобы выявить источник заболевания.
Чтобы определить болезнь за пределами легких.
С целью диагностики рецидивов болезни.

Диагностика туберкулеза у детей и взрослых при помощи полимерной цепной реакции проходит следующие этапы:

В определенных ситуациях берется различный материал на исследование. Это может быть кровь, мокрота или промывная жидкость из бронхов.
После этого взятый биологический материал в течение определенного времени (чаще всего это несколько минут) подвергают воздействию высоких температур (до +97°С). В результате разрушается первоначальная структура ДНК микроорганизма, которая состоит из 2 цепей.
После этого температура начинает снижаться, это действие называется отжигом. В это время праймер соединяется с 1 из разъединенных цепей.
В завершение проводится элонгация. Во время нее происходит необходимый биологический синтез существующих молекул.

Понадобится 25-30 циклов, чтобы получилось необходимое количество копий ДНК на микобактерии туберкулеза.

Для процедуры необходимо дорогостоящее оборудование, поэтому не во всех медицинских учреждениях имеется возможность проводить тест ПЦР на туберкулез вместо Манту.

Благодаря прививкам и исследованию ПЦР (вместо Манту) можно предотвратить развитие такого опасного недуга, как туберкулез. Теперь не понадобится дожидаться начала проявления болезни или делать снимки на рентгеновском аппарате. Если появляются подозрения на инфицирование, для исключения страшных последствий болезни всегда можно сделать тест ПЦР, который с максимальной точностью определяет состояние организма. В условиях реального времени такие формы диагностики, как проба Манту и флюорография, постепенно отходят на второй план по сравнению с методом ПЦР.

источник