Симультанная проба на туберкулез у животных

Туберкулёз (лат. наименование — Tuberculosis) — это хронически протекающее, инфекционное заболевание животных и человека. Характеризуется оно образованием туберкулов, специфических гранулём казеозного характера, внешне похожих на узелки. Большой восприимчивостью к возбудителю отличаются:

• крупный рогатый скот;
• свиньи;
• из птиц — куры;
• из пушных зверей — норки.

Менее восприимчивы — козы, собаки, утки, гуси. Редко болеют — овцы, кошки, лошади. Болезнь несёт большой экономический ущерб для сельскохозяйственного животноводства и регистрируется во многих странах мира.

Возбудитель заболевания — микобактерия (Mycobacterium tuberculosis). Болезнь известна с древних времён, а возбудителя в 1882 г открыл Р. Кох. С тех пор его называют палочкой Коха.

Микобактерии принято делить по такому принципу:

M. bovis — у большинства млекопитающих и человека, наиболее часто у крупного рогатого скота;

M. avium — у птиц;

M. africanum – промежуточный между M. tuberculosis и M. bovis, в основном регистрируется в Африке.

Существует множество атипичных микобактерий, которые не являются патогенными для животных.

Микобактерия — это палочка, иногда согнутая под углом или принимающая форму зерна поставленного по одной линии. Анаэроб, неподвижная, не образующая спор, кислотоупорная (важный фактор для дифференциации). Окрашивается фуксином в красный цвет и не обесцвечивается при воздействии раствором серной кислоты. При окраске по Цилю — Нильсену в мазках располагается одиночно или группами.

Микобактерии очень устойчивы во внешней среде благодаря липидной оболочке. В мокроте сохраняет жизнеспособность — до 10 месяцев, в навозе — до 7, в почве — более 4-х лет, M. Avium — до 10 лет, в трупах КРС патогенность сохраняется до 12 месяцев. В продуктах, полученных от инфицированных животных возбудитель сохраняется:

• в замороженном мясе — до 12 месяцев;
• молоке — 20 суток;
• сливочном масле — 1 год.

Нагревание до 80 ᵒC убивает через 30 минут, кипячение через 3-5. 5% раствор карболовой кислоты убивает через 12 часов, 5% раствор хлора через 3 часа.

Источник инфекции — больное животное или человек (обслуживающий персонал). Микобактерия выделяется с молоком, мокротами, фекалиями, спермой. Больные животные подвергают заражение помещений, пастбищ, мест водопоя, выгульные дворы. При этом фактором передачи служат корма, подстилка, вода, навоз.

В стойловый период, при скученном содержании заражение происходит чаще (аэрогенный путь). Молодняк КРС заражается через молоко от больных животных, а также внутриутробно. В сухое лето на пастбищах риск заражения минимальный, а вот во влажное и холодное риск увеличивается в разы (алиментарный путь).

Собаки и кошки заражаются от больных или переболевших людей либо при поедании необеззараженного мяса и молока от больных животных.

Неполноценное кормление, плохие санитарные условия, скученность при содержании, чрезмерная физическая нагрузка понижает резистентность организма, и микобактерия приобретает высокую вирулентность.

Инкубационный период может длиться от нескольких недель до нескольких месяцев. Крупный рогатый скот чаще поражается с задействованием в процесс лёгких, лимфатических узлов, вымени, печени. Животное теряет в весе, при этом аппетит может быть сохранён, наблюдается кашель при аускультации чёткие хрипы в лёгких.

В зависимости от локализации процесса предлопаточные, заглоточные или надвыменные лимфатические узлы увеличены, бугристы, имеют малую подвижность.

У больных коров изменяется органолептика молока, оно становится жёлтым, водянистым, содержит сгустки. При микроскопии находят возбудителя. Поражённые участки вымени атрофированы, бугристы, деформированы.

Кожа КРС и шерсть теряет эластичность и блеск.

Свиньи реагируют профузными поносами, которые не поддаются классическим методам лечения. Животные быстро теряют вес.

Норки заражаются при кормлении отходами переработки туш. Чаще болезнь проявляется у молодняка. Наблюдается истощение, кашель, жажда, истечения из носовых отверстий, абсцессы в области шеи и головы, поносы, тусклость и ломкость меха, снижение рождаемости и аборты.

У собак отмечают понижение аппетита, вялость, исхудание, кашель.

У котов характерным являются гнойное воспаление околоушных, предлопаточных и подчелюстных лимфатических узлов. Часто отмечают поражение шерстного покрова на голове, шее, веках, спинке носа.

Козы и овцы блеют без специфических признаков, отмечается медленная потеря веса.

Куры при сохранении аппетита теряют вес. Становятся малоподвижными, вялыми. Яйценоскость снижается. Гребень и серёжки теряют интенсивность цвета и становятся сморщенными. Наблюдается понос, отмечается хромота.

Прижизненная диагностика входит в план обязательных ежегодных мероприятий.

Проведение внутрикожной туберкулиновой пробы (туберкулинизация) осуществляется методом введения туберкулина для млекопитающих. В средней трети шеи, безигольным инъектором вводят 0, 2 мл препарата. При этом образовывается горошина. Учёт аллергической пробы проводят через 72 часа. Реагирующее животное считается в том случае, если толщина кожной складки более 3 мм.

В хозяйствах, которые идут на оздоровление, проводят комплексную диагностику внутрикожной и глазной пробой.

Животное, при введении туберкулина, может дать реакцию и при инфицировании нетипичными микобактериями, которые распространены во внешней среде. Для дифференциации проводится контрольный забой (5-10 голов) с ветеринарно-санитарным обследованием туш и органов, постановкой симультанной пробы, постановкой реакции ПЦР (полимеразная цепная реакция), ИФА (иммуноферментный анализ), бактериологическим анализом с постановкой биопробы.

Диагноз туберкулёз считается установленным если:

• при забое или патолого-анатомическом вскрытии обнаружены характерные для заболевания гранулёмы;
• при бактериологических исследованиях выделены из материала микобактерии бычьего, человеческого или птичьего видов;
• если биопроба положительная.

Для сельскохозяйственных животных лечение туберкулеза не разработано, они подлежат убою. Домашних животных лечат симптоматически.

При установлении диагноза хозяйство объявляется неблагополучным. Реагирующие животные сдаются на убой. Молоко подвергают обеззараживанию пастеризацией или кипячением.

Помещение дезинфицируют раствором натрия гидроокиси, формальдегидом, хлорной извести. Навоз биотермически обеззараживают.

Инфицированные пастбища пригодны для использования только через год.

Туберкулинизация проводится через каждые 45 дней до получения отрицательных реакций двукратно.

Рождённых телят выращивают изолированно. В 4-х месячном возрасте подвергают туберкулиновой пробе. При положительной реакции проводят убой.

Снимают ограничение с хозяйства при проведении заключительных мероприятий.

Во избежание занесения инфекции при формировании стада следует проводить карантинизацию животных с исследованием на туберкулёз.

Соблюдение мер предосторожности при перевозках, содержании, кормлении, поении, выпасе животных — обязательные меры профилактики. Необходимо строго следить за прохождением медосмотров обслуживающего персонала.

Все виды обследования, вакцинации и лечения Вашего питомца, в том числе экстренная помощь и госпитализацию Вашего питомца.

КРУГЛОСУТОЧНО:
+7 495 532 89 00
(многоканальный)
WatsApp / Viber
+7 925 584 75 71

Токсокароз — зоонозное заболевание, вызванное паразитированием круглых червей и характеризующееся…

Саркома — новообразование, которое характеризуется инфильтративным ростом клеток соединительной…

Фавус (парша) — заболевание грибковой природы, характеризующееся поражениями кожных покровов,…

Травмы головного мозга — патологическое состояние животного, проявившееся в результате механических…

Лишай — собирательное понятие заболеваний наружного покрова тела животного вызванного микроскопическими…

Тепловой удар и солнечный — острое расстройство функций центральной нервной системы в результате…

Тонзиллит — воспалительный процесс, проходящий в нёбных миндалинах, лимфоидных образованиях…

Туляремия — инфекционная болезнь бактериальной природы. Заболеванию подвержены сельскохозяйственные…

Хориоптоз — инвазионное заболевание вызываемое клещами-кожеедами рода Chorioptes. Заболеванию…

Чума крупного рогатого скота — вирусное, высоко контагиозное заболевание, имеющее острое течение…

Блефарит — заболевание воспалительного характера затрагивающее края век. Подвержены болезни…

Синовит — воспалительный процесс проходящий в синовиальной мембране выстилающей капсулу сустава.…

Все виды обследования, вакцинации и лечения Вашего питомца, в том числе экстренная помощь и госпитализацию Вашего питомца.

КРУГЛОСУТОЧНО:
+7 495 532 89 00
(многоканальный)
WatsApp / Viber
+7 925 584 75 71

Опасны проблемы с ушными раковинами у собак и тем, что в запущенных случаях питомец может полностью…

Не выпавшие молочные зубы у собаки одна из самых частых стоматологических причин обращения…

Псевдобешенство представляет собой инфекционный процесс, провоцируемый вирусным агентом. Подвержены…

Возникновение воспаления спровоцировано различной инфекционной микрофлорой, которая приводит…

По мере развития гингивита, питомец ощущает выраженную болезненность, наблюдается кровоточивость…

источник

Найманов А.Х., Овдиенко Н.П., Помыканов Н.П., Канеев Н.Х., Целуева Н.И.

На современном этапе борьбы с туберкулёзом животных основой профилактических и оздоровительных мероприятий была и остаётся диагностика этой болезни. При диагностике туберкулёза крупного рогатого скота основным, массовым и общепринятым методом является внутрикожная проба с применением ППД-туберкулина для млекопитающих. Одной из важных проблем при диагностике данной болезни внутрикожной туберкулиновой пробой является проблема неспецифических или парааллергических реакций на туберкулин. И, что важно отметить, актуальность этой проблемы увеличивается из года в год. Так, по данным официальной ветеринарной статистики, в 1994 году в благополучных хозяйствах РФ выявлялось в два с половиной раза больше реагирующих животных, чем в неблагополучных по туберкулёзу хозяйствах, а в настоящее время выявляется в 5,3 раза больше реагирующих животных.

Массовые выявления неспецифических реакций на туберкулин приводят к необоснованному убою большого количества здоровых животных, что увеличивает размеры экономического ущерба и вызывает сомнения в правильности диагностики туберкулёза утверждёнными методами.

Со времени возникновения проблемы неспецифических реакций на туберкулин многими авторами были предложены различные методы их дифференциации: применение малых доз туберкулина, переисследование реагирующих животных глазной пробой, внутривенной пробой, пальпебральной пробой, реакция бластрансформации лимфоцитов, реакция специфического лизиса лейкоцитов, надплевральная новокаиновая блокада, метод подавления неспецифических реакций раствором хлористого кальция, симультанная туберкулиновая проба с различными аллергенами, РСК с КТА УНИИЭВ, РНГА с полисахаридным антигеном ВИЭВ, ИФА с соникатом из M. bovis, ПЦР-метод, g-ИФН ИФА и т.д.

Однако из всех известных методов дифференциации аллергических реакций, наибольшее признание и распространение во всём мире получил метод симультанной (одновременной) туберкулиновой пробы с ПП-туберкулином для млекопитающих и ППД-туберкулином для птиц.

Так, в настоящее время, во всех зарубежных странах для дифференциации неспецифических реакций применяют симультанную пробу с ППД-туберкулином для млекопитающих и ППД-туберкулином для птиц. Отличаются лишь дозы применяемых аллергенов).

В нашей стране для дифференциации неспецифических реакций с 1978 года использовалась только симультанная проба с ППД-туберкулином для млекопитающих и комплексным аллергеном из атипичных микобактерий (КАМ), а с 2002 года применяется и симультанная проба с ППД-туберкулином для млекопитающих и ППД-туберкулином для птиц.

Известно, что симультанная туберкулиновая проба имеет свои определённые недостатки. Так, по данным многих авторов, применение симультанной пробы с ППД-туберкулином для млекопитающих и КАМ позволяет дифференцировать аллергические реакции по степени проявления самих реакций на тот или иной аллерген в 25-77% случаях. Кроме того, в соответствии с наставлениями по применению этой пробы, симультанная проба с ППД-туберкулином для млекопитающих и КАМ является групповой и даёт возможность ориентироваться в ситуации по туберкулёзу лишь в целом по стаду или группе (не менее шести голов) исследуемых животных.

В соответствии с этим наставлением, проведение симультанной туберкулиновой пробы допускается через 30 дней после последней туберкулинизации животных.

В практических условиях всех реагирующих животных сдают на убой (в случаях, если это единицы), или реагирующее особи остаются в общем стаде на неопределённое время.

Следует отметить, что в любом случае указанные решения или экономически не выгодны, или опасны в эпизоотическом плане.

Тем не менее, учитывая, что при диагностике туберкулёза нет ни одного идеального метода диагностики, мы считаем, что, исходя из специфических особенностей, следует совершенствовать известные методы, и на их основе, подбором, предлагать комплекс методов диагностики туберкулёза в благополучных и неблагополучных хозяйствах, а также специальный комплекс методов исследований для индивидуальных хозяйств.

Целью нашей работы является изучение ускоренной симультанной пробы с ППД-туберкулином для млекопитающих и КАМ при дифференциальной диагностике туберкулёза крупного рогатого скота.

Ускоренную методику применения симультанной пробы мы сравнивали с традиционной симультанной пробой, применяемой по утверждённой методике. Исследования провели на 8637 головах крупного рогатого скота, в 14 благополучных по туберкулёзу хозяйствах, где постоянно выявлялись реагирующие на туберкулин животные и была установлена сенсибилизация животных атипичными микобактериями.

Исследования в этих хозяйствах провели вначале традиционной симультанной пробой, затем, через 35-60 дней в этих хозяйствах это же поголовье КРС исследовали ускоренной симультанной пробой.

Динамику проявления аллергических реакций на туберкулины при применении симультанной пробы провели в восьми благополучных по туберкулёзу хозяйствах, где установлена сенсибилизация животных атипичными микобактериями, на 3739 головах крупного рогатого скота. Учёт аллергических реакций проводили через 24 часа, 48 часов, 72 часа, 96 и 120 часов после введения аллергенов.

Оптимальное время учёта аллергических реакций при ускоренной симультанной пробе изучали методом учёта реакций через 24 часа, 48 часов и 72 часа после повторного введения туберкулинов.

В 14 благополучных по туберкулёзу хозяйствах было исследовано обычной симультанной пробой с применением ППД-туберкулина для млекопитающих и КАМ 8581 голова крупного рогатого скота. Из 14 исследованных хозяйств в четырёх (28,5 %) случаях были получены достоверно более выраженные реакции на КАМ, в одном случае результаты симультанной пробы указывали на наличие в хозяйстве туберкулёза, а в остальных девяти хозяйствах были получены неопределённые результаты симультанной пробы.

В дальнейшем, через 35-60 дней, все поголовье КРС в этих 14 хозяйствах исследовали ускоренной симультанной пробой.

Получены следующие результаты. В 14 благополучных по туберкулёзу хозяйствах было исследовано 8637 голов крупного рогатого скота ускоренной симультанной пробой с применением ППД-туберкулина для млекопитающих и КАМ. Из всех исследованных хозяйств в шести (42,8 %) случаях были получены достоверно более выраженные реакции на КАМ, а в восьми остальных случаях были получены неопределённые результаты симультанной пробы.

Анализируя весь представленный материал по сравнительному изучению симультанной пробы и ускоренной симультанной пробы, можно сделать заключение, что при использовании традиционной симультанной пробы с ППД-туберкулином для млекопитающих и КАМ аллергические реакции дифференцировали по степени их проявления на различные аллергены в четырёх (28,5 %) случаях, а при применении ускоренной симультанной пробы – в шести (42,8 %) случаях.

Таким образом, проведённые нами исследования показывают, что ускоренная симультанная проба более эффективна. Кроме того, ускоряется и облегчается проведение симультанной пробы, так как переисследуются только реагирующие на внутрикожное введение туберкулина животные, сокращаются время проведения исследований и расход рабочей силы.

На основании проведённых исследований считаем, что, в целях дальнейшего совершенствования симультанной пробы, возможно её применение через 72 часа после внутрикожной туберкулиновой пробы, так как многочисленные литературные данные, а также ранее проведённые в лаборатории микобактериозов ВИЭВ исследования показывают, что частым внутрикожным введением туберкулина невозможно вызвать сенсибилизацию у здоровых животных. То есть, туберкулины не обладают сенсибилизирующими свойствами. Тем более, что по предлагаемой нами методике ускоренной симультанной пробы повторно аллергены вводятся на другой стороне шеи реагирующего на туберкулин животного.

Мы считаем, что главная и неоспоримая польза симультанной пробы в том, что при её применении резко сокращается количество реагирующих на туберкулин коров, многие реакции превалируют на КАМ или переходят на КАМ, то есть, в конечном итоге, как бы «сужается поиск» животных для диагностического убоя. Так, при применении симультанной пробы диагностическому убою подлежат особи, реагирующие с большей интенсивностью реакции на ППД-туберкулин для млекопитающих, а при отсутствии таковых – реагирующие в равной степени на туберкулин и КАМ.

Предлагаемая методика применения симультанной пробы исходит из запросов практических ветеринарных специалистов. Суть ускоренной методики применения симультанной пробы заключается в следующем. Первоначально исследуют животных внутрикожной пробой (на одной стороне средней трети шеи). После учёта реакции, то есть, через 72 часа после введения туберкулина, всем реагирующим животным на другой стороне шеи вводят внутрикожно ППД-туберкулин для млекопитающих и КАМ в обычных дозах, на расстоянии друг от друга в 10-15 см. Учёт результатов ускоренной симультанной пробы проводят через 72 часа после повторного введения аллергенов. Реагирующими считают животных с увеличением толщины кожной складки на 3 мм и более на ППД-туберкулин для млекопитающих.

В целях дифференциации неспецифических реакций на туберкулин у крупного рогатого скота возможно применение ускоренной симультанной туберкулиновой пробы.

источник

А.Х.Найманов, д.в.н., профессор, главный научный сотрудник с исполнением обязанностей заведующего лабораторией микобактериозов, labmyc@mail.ru

Г.И.Устинова, к.б.н., ведущий научный сотрудник лаборатории биохимии и молекулярной биологии

Н.Г.Толстенко, к.в.н., ведущий научный сотрудник лаборатории микобактериозов

Е.П.Вангели, к.б.н., ведущий научный сотрудник лаборатории микобактериозов

О.Д.Кучерук, к.в.н., старший научный сотрудник лаборатории биохимии и молекулярной биологии

В.М.Калмыков, к.в.н., старший научный сотрудник лаборатории микобактериозов

Всероссийского научно-исследовательского института экспериментальной ветеринарии имени К.И.Скрябина и Я.Р.Коваленко РАН, 109428, Москва, Рязанский пр-т, 24, к. 1, admin@viev.ru.

Представлено современное состояние диагностики туберкулеза у крупного рогатого скота. Указаны основные достоинства и недостатки аллергической диагностики, а также пути совершенствования дифференциальной диагностики неспецифических реакций в благополучных по туберкулезу хозяйствах.

На современном этапе борьбы с туберкулезом животных основой профилактических и оздоровительных мероприятий является диагностика болезни, а основным методом прижизненной диагностики – аллергический метод с применением внутрикожной пробы с ППД-туберкулином для млекопитающих.

Недостаток внутрикожной пробы в том, что аллергическая реакция на ее применение указывает только на сенсибилизацию организма животных различными видами микобактерий. А в связи с тем, что особи могут быть заражены не только микобактериями туберкулеза, но и разного вида близкородственными нетуберкулезными микобактериями, проба выявляет наряду с больными и здоровых животных с неспецифическими реакциями на туберкулин [5,6].

В итоге проявление неспецифических реакций делает внутрикожную пробу ориентировочной и вызывает необходимость применения патологоанатомических и лабораторных исследований с целью подтверждения диагноза на туберкулез.

В соответствии с санитарными и ветеринарными правилами от 1996 г. и наставлением по диагностике туберкулеза животных от 2002 г., в нашей стране контроль по данному заболеванию у крупного рогатого скота проводят внутрикожной пробой с ППД для млекопитающих два раза в год (весной и осенью). Реагирующими считают животных с увеличением толщины кожной складки на 3 мм и выше. Причем реагирующие животные считаются подозреваемыми в заражении. Решающим в диагностике является патологоанатомическое или лабораторное подтверждение туберкулеза у убитых с диагностической целью особей.

В неблагополучных по заболеванию хозяйствах реагирующими также считают животных с увеличением толщины кожной складки на 3 мм и выше, но при этом их считают больными и подвергают убою в течение 14 суток.

Проведенный нами анализ эпизоотической ситуации по туберкулезу крупного рогатого скота показывает, что в последние годы в Российской Федерации увеличивается количество реагирующих животных с неспецифическими реакциями на туберкулин.

Так, за 2001–2017 гг., то есть за последние 17 лет, в нашей стране было выявлено всего 824168 реагирующих животных, из них в благополучных хозяйствах – 748813, или 90,8%, а в неблагополучных хозяйствах – 76355, или 9,2%. В благополучных хозяйствах выявляется более 90% реагирующих животных.

В этой связи на современном этапе борьбы с туберкулезом крупного рогатого скота наиболее актуальной проблемой является выявление реагирующих животных с неспецифической реакцией на туберкулин и совершенствование дифференциальной диагностики аллергических реакций в благополучных хозяйствах.

Анализ доступной литературы показывает, что со времени возникновения проблемы неспецифических реакций были предложены различные методы их дифференциации. Однако наибольшее признание и распространение во всем мире получил метод симультанной туберкулиновой пробы.

Симультанная проба с применением туберкулинов для млекопитающих и для птиц нашла широкое применение во многих странах мира. На целесообразность ее использования в качестве теста определения видовой специфичности аллергических реакций указывалось в резолюциях XVI (1948 г.) и XVII (1950 г.) генеральных сессий МЭБ.

В нашей стране симультанную пробу с использованием ППД для млекопитающих и комплексного аллергена из атипичных микобактерий (КАМ) внедрил в производство А.Н.Шаров в 1978 г. Первое наставление по применению симультанной пробы с туберкулином и КАМ было утверждено ГУВ МСХ СССР 27.11.1978 г., впоследствии оно было пересмотрено и утверждено 04.07.1980 г. Методика проведения симультанной пробы с КАМ для практического применения при диагностике туберкулеза была утверждена ГУВ МСХ СССР 28.12.1981 г.

В настоящее время в нашей стране основным методом дифференциации неспецифических реакций является симультанная проба с ППД для млекопитающих и КАМ с учетом результатов симультанной пробы по группе реагирующих животных.

Основным недостатком симультанной пробы является ее небольшая эффективность. Кроме того, в соответствии с наставлением по применению, при выявлении реагирующих на туберкулин животных необходимо через 30 дней переисследовать все стадо симультанной пробой с ППД для млекопитающих и КАМ. При этом учет результатов симультанной пробы и оценку аллергических реакций следует проводить в целом по стаду или по группе исследуемых животных не менее шести голов.

Проведение комплекса этих исследований – довольно длительный и трудоемкий процесс, так как приходится повторно исследовать все стадо двойной внутрикожной пробой. Тем более, что в последние годы при групповом учете симультанной пробы все чаще стали получать неопределенные результаты.

Тем не менее, мы считаем, что главное достоинство симультанной пробы в том, что при ее применении значительно сокращается количество реагирующих на туберкулин коров, многие реакции превалируют на КАМ или переходят на КАМ, то есть, в конечном счете, «сужается поиск» животных для диагностического убоя. Так, при применении симультанной пробы диагностическому убою подлежат животные, реагирующие с большей интенсивностью реакции на ППД для млекопитающих, а при отсутствии таковых – реагирующие в равной степени на ППД и КАМ.

Проведенные нами многочисленные исследования по изучению возможности дифференциации неспецифических реакций показывают, что учет результатов симультанной пробы с ППД для млекопитающих и КАМ можно проводить по группе животных с оценкой реакции по реактивному числу, а при получении неопределенных результатов исследований – проводить индивидуальный учет по каждой корове.

Поэтому на основании представленных данных и собственных исследований мы предлагаем в целях контроля благополучия крупного рогатого скота по туберкулезу проводить ежегодные исследования поголовья два раза в год (весной и осенью) внутрикожной пробой с ППД для млекопитающих. При выявлении в стаде реагирующих особей дальнейшие исследования проводить симультанной пробой.

Методика проведения и оценка результатов симультанной пробы с ППД для млекопитающих и КАМ:

─ Проведение симультанной пробы допускается не ранее, чем через 30 дней после последней туберкулинизации животных.

─ ППД для млекопитающих и КАМ вводят каждому животному внутрикожно, в дозе по 0,2 мл, с правой и левой стороны тела животных: крупному рогатому скоту – в симметричные участки шеи; быкам-производителям – в правую и левую подхвостовые складки.

─ Предварительно места введения аллергенов выстригают и протирают ватными тампонами, смоченными 70 0 спиртом-ректификатом.

─ Учет и оценку результатов симультанной пробы проводят через 72 часа после введения аллергенов.

─ При учете результатов симультанной пробы у каждого исследуемого животного пальпируют место введения туберкулина. Реакцией считают любую припухлость в месте введения аллергена с увеличением толщины кожной складки на 3 мм и выше, независимо от характера этой реакции (консистенции, температуры, болезненности и т.д.)

─ Оценку результатов симультанной пробы проводят по индивидуальному учету.

Оценка результатов симультанной пробы по индивидуальному учету

Индивидуальную оценку интенсивности аллергических реакций проводят при наличии реагирующих животных на оба аллергена. Реакция на один из аллергенов считается более интенсивной, если при измерении утолщения кожной складки устанавливается разница не менее чем на 3 мм. Результаты оценки реакции на аллергены записывают в ведомость учета симультанной пробы. В случаях, когда интенсивность аллергической реакции более сильно выражена на ППД-туберкулин для млекопитающих, это животное считают подозреваемым в заражении возбудителем туберкулеза M.bovis или M.tuberculosis.

При более выраженной интенсивности аллергической реакции на КАМ животное считают сенсибилизированным нетуберкулезными микобактериями.

При отборе реагирующих особей для диагностического убоя в первую очередь убивают реагирующих с большей интенсивностью реакции на ППД для млекопитающих, а при отсутствии животных с такими реакциями диагностическому убою подвергают реагирующих животных с равными реакциями на оба аллергена.

Предлагаемая методика индивидуального учета симультанной пробы предназначается для отбора животных для диагностического убоя.

Преимущества этой методики применения симультанной туберкулиновой пробы заключаются в том, что нет необходимости переисследовать симультанной пробой все стадо. В конечном счете, диагноз на туберкулез ставится только при подтверждении результатов аллергических исследований результатами убоя реагирующих животных (при патологоанатомическом или лабораторном подтверждении). Так что следует считать, что симультанная проба применяется с целью отбора животных, которые наиболее характерно реагируют на ППД для млекопитающих, для диагностического убоя.

1. При групповом учете результатов симультанной пробы с ППД для млекопитающих и КАМ часто получают неопределенные результаты. Поэтому учет и оценку этих исследований необходимо проводить индивидуально по каждой реагирующей корове.

2. Индивидуальную оценку интенсивности проявления аллергических реакций необходимо проводить при выявлении реагирующих животных на оба аллергена.

3. Реакцию на один из аллергенов следует считать более интенсивной, если устанавливается увеличение толщины кожной складки не менее 3 мм, то есть, если реакция на ППД для млекопитающих на 3 мм и более выше, чем на КАМ, животное следует считать подозреваемым в заражении M. bovis или M. tuberculosis. При более выраженной реакции (на 3 мм и выше) на КАМ животное следует считать сенсибилизированным нетуберкулезными микобактериями.

Симультанную пробу с ППД для млекопитающих и КАМ следует применять в благополучных хозяйствах при выявлении реагирующих на туберкулин животных с целью отбора наиболее характерно реагирующих для диагностического убоя и последующих патологоанатомических и лабораторных исследований на туберкулез.

1. Гулюкин М.И. Методические наставления по проведению исследований при микобактериозах животных / М.И.Гулюкин, А.Х.Найманов, Н.П.Овдиенко [и др.]. – Москва, 2012. – 85 с.

2. Овдиенко Н.П. Совершенствование симультанной пробы с ППД туберкулином для млекопитающих и КАМ / Н.П.Овдиенко, А.Х. Найманов, П.Н. Помыканов [и др.] // Тезисы докл. науч. — практ. конф. «Основные научные иссл. по проблеме туберкулеза и бруцеллеза с.-х. ж-х». – Новосибирск, 1995. – С. 44.

3. Найманов А.Х. Проблема неспецифических реакций на туберкулин и совершенствование симультанной пробы для дифференциальной диагностики туберкулеза крупного рогатого скота / А.Х.Найманов, Г.И.Устинова, Н.Г. Толстенко [и др.] // Ветеринария. – 2015. – № 6. – С. 20 – 25.

4. Найманов А.Х. Совершенствование симультанной туберкулиновой пробы для дифференциации неспецифических реакций у крупного рогатого скота / А.Х.Найманов, Г.И.Устинова, Н.Г. Толстенко [и др.] // Ветеринария и кормление. – 2016. – № 1. – С. 11 – 13.

5. Найманов А.Х. Микобактериальные инфекции крупного рогатого скота (туберкулез и паратуберкулез) / А.Х.Найманов, М.И.Гулюкин. – Москва: Зооветкнига, 2014. – 235 с.

6. Найманов А.Х. Туберкулез животных / А.Х.Найманов, В.М.Калмыков. – Санкт-Петербург – Москва – Краснодар: Лань, 2018. – 504 с.

7. Помыканов Н.П. Совершенствование диагностики туберкулеза крупного рогатого скота в индивидуальных хозяйствах: автореф. дисс. канд. вет. наук. – Москва, – 2005. – 23 с.

8. Хасанов Н.Р. Совершенствование дифференциальной диагностики туберкулеза крупного рогатого скота: дисс. канд. вет. наук. – Душанбе, 2001. – 105 с.

9. Шаров А.Н. Аллергическая диагностика туберкулеза у животных: повышение ее эффективности: дисс. докт. вет. наук. – Москва, 1989. – 373 с.

источник

Диагностические исследования при антропозоонозных инфекциях (на примере туберкулеза крупного рогатого скота)

Туберкулез – широко распространенное инфекционное заболевание человека и жи-вотных, вызываемое микобактериями туберкулезного комплекса (Mycobacterium tubercu-losis complex – MTBC). От больных туберкулезом животных могут заражаться люди, для них наиболее опасны Mycobacterium bovis (микобактерии туберкулеза бычьего). От лю-дей, больных туберкулезом, микобактериями туберкулеза человека – Mycobacterium tu-berculosis может заражаться крупный рогатый скот. Диагноз на туберкулез у крупного ро-гатого скота ставят на основании результатов аллергических, патолого-анатомических, гистологических и бактериологических исследований с учетом эпизоотологических данных и клинических признаков.

На современном этапе обеспечение эпизоотического благополучия сельскохозяйственных организаций по туберкулезу крупного рогатого скота (КРС) является одной из актуальных задач ветеринарной науки и практики. В Российской Федерации мероприятия по профилактике туберкулеза и по борьбе с ним проводятся в соответствии с санитарными и ветеринарными правилами «Профилактика и борьба с заразными болезнями, общими для человека и животных», утвержденными Госкомсанэпиднадзором и Департаментом ветеринарии Минсельхоза России 18 июня 1996 года, и «Наставлением по диагностике туберкулеза животных», утвержденным Департаментом ветеринарии Минсельхоза России 18 ноября 2002 года [1]. Ключевым звеном в программе мероприятий по профилактике и ликвидации туберкулеза крупного рогатого скота и по оздоровлению КРС служат «…систематические ди-агностические исследования животных, выделение из стад больных живот-ных или целых неблагополучных групп с последующим их убоем…» [4]. Диагноз «Туберкулез» устанавливается на основании результатов комплексных исследований (рис. 1)

Рис. 1. Схема комплексных исследований крупного рогатого скота на туберкулез

Мониторинг эпизоотической ситуации по туберкулезу крупного рогатого скота в административно-территориальных субъектах осуществляется согласно пункту 1.3 раздела 1 «Инструкции о мероприятиях по профилактике и ликвидации туберкулеза животных» [4].

Прижизненная диагностика туберкулеза у крупного рогатого скота проводится аллергическим методом.
Аллергический метод – внутрикожная туберкулиновая проба с применением Пурифиед Протеин Дериватив – туберкулина (ППД-туберкулин) для млекопитающих. Туберкулин вводят крупному рогатому скоту в середину шеи (рис. 2). Учет и оценку реакции на введение туберкулина проводят через 72 часа. Животных считают положительно реагирующими на туберкулин при утолщении кожной складки на 3 мм и более. Толщину кожной складки в месте введения туберкулина измеряют кутиметром, а полученный показатель сравнивают с толщиной кожной складки рядом с местом введения препарата [3, 4].

Рис. 2. Туберкулиновая проба у крупного рогатого скота [6]

Для дифференциации парааллергических реакций у крупного рогатого скота используется симультанная проба с одновременным применением двух туберкулинов – для млекопитающих и для птиц или туберкулина для млекопитающих и комплексного аллергена из атипичных микобактерий (КАМ).

Симультанная проба проводится в том же порядке, что и туберкулиновая (рис. 3). Проба является групповой и дает возможность оценить ситуацию по туберкулезу лишь в целом по стаду или по группе (не менее 6 голов) обследуемых животных. Под достоверностью различия понимают такое различие в величине показателей интенсивности реакций на туберкулин и КАМ, которое дает возможность с уверенностью не менее чем на 95 % сделать заключение о состоянии по туберкулезу обследуемой группы животных [3].

Рис. 3. Симультанная аллергическая проба с использованием ППД-туберкулина и комплексного аллергена из атипичных микобактерий [11]

Офтальмопроба на туберкулез (глазной метод туберкулинизации).
Туберкулин в количестве 3–5 капель наносится на конъюнктиву нижнего века или на поверхность роговицы глаза животного. Проводится офтальмопроба двукратно с 5–6-дневным интервалом [2, 4, 5]. Результаты офтальмопробы оценивают через 6, 9, 12 и 24 часа после первого и через 3, 6, 9 и 12 часов после повторного введения туберкулина. Реакция считается положительной, если образуется гнойный или слизисто-гнойный секрет, который накапливается в конъюнктивальном мешке или вытекает в виде шнура из внутреннего угла глаза. Кратковременная гиперемия слизистых оболочек глаза и слезотечение с образованием небольшого количества слизистого секрета рассматриваются как отрицательная реакция [3].

Факторы, обуславливающие проявление неспецифических реак-ций на туберкулин у КРС
В многочисленных исследованиях было показано, что проявления неспецифических реакций на туберкулин у крупного рогатого скота обусловлены многочисленными факторами внешней среды и индивидуальными особенностями организма животного [2, 3, 5]. Неспецифические реакции подразделяются на две основные группы: парааллергические и псевдоаллергические (см. таблицу).

Причины возникновения неспецифических реакций у крупного рогатого скота на введение туберкулина

Причиной возникновения неспецифических реакций у крупного рогатого скота на введение туберкулина могут служить:
1)несоблюдение трехнедельного интервала между туберкулинизацией и вакцинацией (в этот период происходит сенсибилизация организма, и здоровые животные дают положительную реакцию на туберкулин);
2)«человеческий фактор» (диагностические исследования про-водят профессионально не подготовленные лица; наруша-ется методика проведения туберкулинизации и т. д.).

Лабораторные методы диагностики туберкулеза КРС
К лабораторным методам диагностики туберкулеза относятся бакте-риологическое исследование, серологическое исследование и молеку-лярно-биологическое исследование.
Бактериологическое исследование проводится с целью выделения возбудителя туберкулеза (рис. 4).

Отбор проб биоматериалов для бактериологического исследования производят как от животных с клиническими признаками туберкулеза, так и от животных, вызывающих подозрение на туберкулез. Исследуют молоко, мокроту, мочу. От павших и убитых животных для исследования отбирают пораженные участки органов на границе со здоровой тканью и измененные лимфатические уз-лы.

Рис. 4. Культура Mycobacterium bovis. Среда роста Гельберга [10]

При наличии характерных для туберкулеза изменений исследуются портальные, предлопаточные, надвыменные, поверхностные паховые лимфатические узлы и фрагменты внутренних органов – легких, печени, почек.

Бактериологическое исследование биоматериалов на туберкулез за-нимает срок до 3 месяцев. Заболевание животных туберкулезом считается установленным в случаях выделения микобактерий туберкулеза бычьего или человеческого из материала от убитых животных [3, 4, 8].

Серологическое исследование на туберкулез проводится в реакции связывания комплемента (РСК).
РСК применяется в двух вариантах:
1) для обнаружения в сыворотке больного животного специфических антител к возбудителю туберкулеза;
2) для выявления и идентификации в исследуемом материале антигена возбудителя туберкулеза.

Проводят серологическое исследование в сельскохозяйственной ор-ганизации в случаях, предусмотренных пунктом 2.7 раздела 2 «Инструкции о мероприятиях по профилактике и ликвидации туберкулеза животных», а именно «…в случаях выявления в благополучном по туберкулезу стаде (на ферме) крупного рогатого скота при плановом исследовании реагирующих на туберкулин животных…» [4].

Молекулярно-биологическое исследование на туберкулез.
Полимеразная цепная реакция (ПЦР) является одним из высокочувствительных и специфичных методов диагностики туберкулеза. Чувствительность метода ПЦР – от 10 до 100 микроорганизмов в пробе (чувствительность микроскопического метода – от 103 до 105 микроорганизмов). В основе метода лежит амплификация специфических участков ДНК возбудителя, которые содержатся в исследуемой пробе. В настоящее время в лабораторной практике применяются тест-системы как для выявления ДНК конкретного вида, так и для дифференцирования видов, входящих в Mycobacterium tuberculosis complex: микобактерий человеческого вида (M. tuberculosis), бычьего вида (M. bovis) и вакцинного штамма микобактерий бычьего вида (M. bovis BCG). Для проведения анализа используют следующие образцы биопроб от крупного рогатого скота: цельную кровь, молоко, фарингеальные смывы, мочу, фекалии, носовую слизь и биопсийные материалы, в том числе лимфатические узлы [3].

Молекулярно-биологическое исследование позволяет значительно ускорить раннюю диагностику туберкулеза, дифференцировать пара- и псевдоаллергические реакции на туберкулин, снизить количество подозреваемых в заражении туберкулезом и подвергаемых диагностическому убою животных [4, 5].

Патолого-анатомические исследования
Для убоя с диагностической целью отбирают животных по результатам вышеизложенных методов исследования.
Патолого-анатомические изменения в организме больного туберкулезом животного зависят как от его возраста, так и от стадии инфекционного процесса.
В начальных стадиях инфекционного процесса туберкулы имеют вид серых полупрозрачных узелков размером от булавочной головки до чечевичного зерна. Затем они становятся мутными, приобретают бело-желтый цвет, заполняются некротизированной сухой творожистой массой. В легких туберкулезные очаги поражения чаще выделяются над плеврой по тупому краю органа (рис. 5).

Рис. 5. Легкое крупного рогатого скота при туберкулезном поражении тканей [9]

Молочная железа, печень, селезенка и почки у крупного рогатого скота поражаются обычно при генерализованном процессе. «Жемчужница» (туберкулезное поражение серозных покровов) регистрируется с одновременным поражением паренхиматозных органов и региональных лимфатических узлов (рис. 6).

Рис. 6. Туберкулезные поражения серозных покровов («жемчужница») и регионар-ных лимфатических узлов у теленка [7]

Гистологические исследования проводят для дифференциации туберкулезных патолого-анатомических изменений от сходных изменений, наблюдаемых при других заболеваниях, например для дифференциации от гранулем паразитарного и микотического происхождения. В положительных случаях в гистологических препаратах, окрашенных по Цилю – Нильсену, находят гранулемы с некротизированным центром, окруженные зоной эпителоидных, отдельных гигантских лимфоидных клеток и соединительно-тканной капсулой.

Вместо заключения
Осуществление плановых профилактических диагностических иссле-дований на туберкулез способствует снижению риска инфицирования людей туберкулезом, ограничению распространения возбудителя из очагов инфекции, раннему выявлению неблагополучных по туберкулезу населенных пунктов.

источник

Купить бумажный документ с голограммой и синими печатями. подробнее

Цена на этот документ пока неизвестна. Нажмите кнопку «Купить» и сделайте заказ, и мы пришлем вам цену.

Распространяем нормативную документацию с 1999 года. Пробиваем чеки, платим налоги, принимаем к оплате все законные формы платежей без дополнительных процентов. Наши клиенты защищены Законом. ООО «ЦНТИ Нормоконтроль».

Наши цены ниже, чем в других местах, потому что мы работаем напрямую с поставщиками документов.

• Срочная курьерская доставка (1-3 дня)
• Курьерская доставка (7 дней)
• Самовывоз из московского офиса
• Почта РФ

2 Эпизоотологические данные

4 Аллергическое исследование

5 Патологоанатомическое исследование

6 Бактериологическое исследование

7 Молекулярно-генетический метод исследования (ПЦР)

8 Гистологическое исследование

9 Установление лабораторного диагноза на туберкулез

Приложение 1. Изготовление мазков и методы окраски микобактерий

Приложение 2. Приготовление и контроль качества питательных сред

Приложение 3. Основные свойства видов или комплексов микобактерий

Приложение 4. Дифференциация атипичных микобактерий

Приложение 5. Исследование проб объектов внешней среды на наличие микобактерий

Приложение 6. Меры безопасности при работе с патологическим материалом и культурами микобактерий

Чтобы бесплатно скачать этот документ в формате PDF, поддержите наш сайт и нажмите кнопку:

МИНИСТЕРСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ПО ДИАГНОСТИКЕ ТУБЕРКУЛЕЗА ЖИВОТНЫХ

Департаментом ветеринарии Министерства сельского хозяйства Российской Федерации

Всероссийским НИИ экспериментальной ветеринарии (ВИЭВ)

Всероссийским государственным НИИ контроля, стандартизации и сертификации ветеринарных препаратов (ВШКИ)

Центральной научно-методической ветеринарной лабораторией (ЦНМВЛ)

Институтом экспериментальной ветеринарии Сибири и Дальнего Востока (ИЭВС и ДВ)

Всероссийским НИИ бруцеллеза и туберкулеза животных

Прикаспийским зональным научно-исследовательским ветеринарным институтом

Дальневосточным зональным научно-исследовательским ветеринарным институтом

ФГУП «Курская биофабрика фирма «БИОК»

шпрадермоиальпебрально в верхнее веко;

дельфинам — н кожу спины в области переднего ласта; кошкам — в области внутренней поверхности уха; курам — в кожу бородки; индейкам — в подчелюстную сережку;

гусям, уткам — в межчелюстную складку или в складку кожи клоаки; страусам, кузуарам — в складку кожи клоаки;

фазанам (самкам), павлинам, попугаям, голубям, журавлям, цаплям, аистам, фламинго — в области наружной стороны голени на 1-2 см выше голеностопного сустава;

фазанам самцам — в пещеристое тело на голове птиц позади наружного угла глаза.

4.8.2. Перед введением туберкулина шерсть (волос) в месте иньскции выстригают, кожу обрабатывают 70%-ным этиловым спиртом. Вводить туберкулин в кожу, имеющую травматические повреждения, уплотнения и абсцессы. пораженную грибками, клещами или гельминтами, запрещается.

4.8.3. Учет и оценку реакции у крупного рогатого скота, буйволов, зебу-видных, яков, верблюдов, слонов, носорогов, бегемотов, оленей, маралов, антилоп, обезьян, сумчатых, дельфинов проводят через 72 часа после введения препарата; у коз, овец, свиней, собак, волков и других представителей хищных, кошек, пушных зверей — через 48 часов; у птиц — через 30-36 часов.

В неблагополучных по туберкулезу крупного рогатого скота пунктах допускается применение двойной туберкулиновой пробы. С этой целью животным, нс реагировавшим на первое введение туберкулина, препарат вводят повторно в день учета реакции в той же дозе и в то же место. Учет реакции на второе введение туберкулина проводят через 24 часа.

4.8.4. При учете реакции у каждого исследуемою животного пальпируют место введения туберкулина, у коз, овец, обезьян, сумчатых и пушных зверей сравнивают веки правого и левого глаза, у быков, слонов, носорогов,

бегемотов — левую и правую подхвостовые складки.

При обнаружении изменений в месте введения туберкулина у крупного рогатого скота (кроме быков), буйволов, зебувидных, яков, верблюдов, оленей, маралов, антилоп измеряют кутимстром толщину складки в миллиметрах и определяют величину ее утолщения в сравнении с толщиной складки неизмененной кожи рядом с местом введения препарата.

4.8.5. Животных счи тают реагирующими на туберкулин:

крупный рогатый скот (кроме быков), буйволов, зебувидных, верблюдов, оленей, маралов, антилоп — при утолщении кожной складки — на 3 мм и более независимо от характера припухлости (отечности, болезненности, повышения местной температуры); быков, слонов, носорогов, бегемотов, свиней, собак, волков и других представителей хищных, дельфинов, кошек, и птиц — при образовании припухлости в месте введения туберкулина; обезьян, сумчатых, овец, коз и пушных зверей — при видимом различии правого и левого века.

4.9. Симультанная аллергическая проба с применением туберкулина и комплексного аллергена из атипичных микобактерий (КАМ).

4.9.1. Симультанную аллергическую пробу применяют для диагностики зуберкулеза у крупного рогатого скота при первичной постановке диагноза, а также для контроля за благополучием животных но туберкулезу в хозяйствах, где реакции на туберкулин обусловлены сенсибилизацией атипичными микобактериями.

Проба является групповой и дает возможность ориентироваться в ситуации по туберкулезу лишь в целом по стаду или группе (нс менее 6 голов) исследуемых животных.

4.9.2. Симультанная проба заключается н одновременном (симультанном) введении животным двух аллергенов — ППД-тубсркулина для млекопитающих в стандартном растворе и комплексного аллергена из типичных микобактерий (КАМ) и определении достоверноеги различия в интенсивности

(степени проявления) реакций на эти аллергены.

4.9.3. Под достоверностью различия понимают такое различие в величине показателей интенсивности реакций на туберкулин и КАМ, которое дает возможность с уверенностью не менее чем на 95% сделать заключение о состоянии по губеркулезу исследуемой группы живот ных.

4.9.4. Проведение симультанной пробы допускается нс ранее, чем через 30 дней после последней туберкулинизации животных.

4.9.5. Туберкулин и КАМ вводят, соответственно, с левой и правой стороны тела животных строго симметрично в дозе по 0,2 мл: крупному рогатому скоту (кроме быков) — внутрикожно в середине шеи, быкам — также внут-рнкожно в левую и правую подхвостовую складки.

4.9.6. Учет и оценку реакций па туберкулин и КАМ проводят у крупного рогатого скота через 72 часа после инъекции аллергенов.

Реакцией считают припухлость в месте введения препарата, ощутимую при пальпации, независимо от ее характера (консистенции, температуры, болезненности и т.п.). При учете реакции у каждого исследуемого животного пальпируют место введения туберкулина. В случае обнаружения припухлости в место его инъекции, у этого животного прощупывают место введения КАМа и проводят измерение утолщения кожной складки.

Более выраженную реакцию на туберкулин при менее выраженной или отсутствующей на КАМ обозначают знаком «+» (плюс), менее выраженную реакцию на туберкулин — знаком «-» (минус), при одинаковых реакциях — знаком «-» (равенство).

Животных, нс реагирующих на туберкулин, нс учитывают независимо от наличия или отсутствия у них реакций на КАМ.

4.9.7. Результаты оценки реакции на туберкулин в сравнении с реакцией на КАМ в знаках («+», «-», «=») записывают в ведомость учета симультанной пробы (табл.1) и с помощью табл. 2 определяют достоверность различия в интенсивности реакций у животных на туберкулин и КАМ в целом по группе.

По ведомости подсчитывают общее количество животных, реагирующих на туберкулин с оценкой реакций «+» и «-» (животных, реагирующих на аллергены в равной степени, в расчет нс берут), и таким обратом определяют показатель А табл. 2 (например 14). Затем подсчитывают отдельно количество знаков «+» и знаков «-» и по табл. 2 сравнивают поочередно результаты с показателем Б, соответствующим установленному показателю А (в примере: соответствующий показатель Б равен 12).

4.9.8. Если количество знаков «+» равно или больше показателя Б, а также если при проведении пробы вообще не выявлено животных, реагирующих на КАМ, то это означает, что реакции на туберкулин выражены достоверно интенсивнее, чем на КАМ, и указывает на заражение животных возбудителем туберкулеза.

4.9.9. Пели количество знаков «-» равно или больше показателя Б, значит у животных реакции достоверно более выражены на КАМ. Если при этом у всех реагирующих на туберкулин животных реакции интенсивнее выражены на КАМ и получены отрицательные результаты бактсриолшичсских исследований, группу скота считают благополучной по туберкулезу. Также благополучным по туберкулезу считают поголовье животных, среди которых при проведении симультанной пробы нс выявлено реагирующих на туберкулин.

4.9.10. Могут быть случаи, когда при достоверно более интенсивной реакции на КАМ в целом по стаду (группе) у отдельных животных наблюдаются реакции на туберкулин при менее выраженной или совсем отсутствующей реакции на КАМ. Это может быть обусловлено парадоксальным проявлением реакций на аллергены или наличием туберкулезной инфекции на фоне сенсибилизации животных к туберкулину атипичными микобактериями. Для уточнения диагноза всех таких животных, а также реагирующих в равной степени на туберкулин и КАМ (при утолщении кожной складки па 3 мм и более), обязательно подвергают убою с патологоанатомичсскнм исследованием на туберкулез. При отсутствии характерных изменении проводят бактериологическое исследование и в случае получения отрицательного результата стадо (группу) животных считают благополучным но туберкулезу.

Ведомость учега симультанной пробы (пример)

Номер (кличка) животных, реагировавших на туберкулин

Оценка реакции на туберкулин в сравнении с реакцией на КАМ: большая (+), меньшая (-), равная (=).

Всего знаков «+» и «-» — 23 (показатель А табл. 2), в т.ч.: знаков «+» — 13 «- »- 10

В данном примере различие в интенсивности реакций на туберкулин и КАМ недостоверно, поэтому результаты симультанной пробы считают неопределенными.

Определение достоверности различия реакций на туберкулин и КАМ

Общее количество животных, реаги-руюших на туберкулин с оценкой реакции и *-я

Минимум животных с большей «-*■» или меньшей «-я интенсивностью реакции на туберкул ни, при котором различие ■ реакциях достоверно

Общее количество животных, ре а тирующих на туберкулин с оценкой реакции и «-»

Минимум животных с большей к+я или меньшей «-* интенсивностью реакции на туберкулин, при котором различие в реакциях достоверно

по диагностике туберкулеза

1.1. Туберкулез — инфекционная, хронически протекающая болезнь животных всех видов и человека, характеризующаяся поражением органов и тканей с образованием в них туберкулов.

Возбудитель — бактерии из рода Mycobacterium, в который входят более 38 самостоятельных видов. Болезнь у животных вызывают микобактерии туберкулеза бычьего (М. bovis), человеческого (М. tuberculosis) и птичьего (М. avium) видов. Каждый из них является патогенным для животных соответствующего вида или человека, возможно и перекрестное заражение.

Микобактерии туберкулеза бычьего вида патогенны для крупного рогатого скота. К ним также восприимчивы все млекопитающие животные и человек. К возбудителю туберкулеза человеческого вила восприимчивы, кроме человека, свиньи, козы, кошки, собаки. Этот вид, в основном, сенсибилизирует крупный рогатын скот к туберкулину и лишь иногда вызывает незначительные очаги в отдельных лимфатических ухзах.

М. avium — возбудитель туберкулеза домашних и диких птиц. Он может вызывать патологические изменения у свиней. У крупного рогатого скота возбудитель туберкулеза птичьего вида вызывает кратковременную сенсибилизацию организма к туберкулину.

Отдельные виды атипичных микобактерий или их ассоциации могут вызывать сенсибилизацию крупного рогатого скота, свиней и птиц к тубер-кулинам, и в отдельных случаях патоморфологические изменения в лимфатических узлах у свиней, неотличимые от туберкулезных изменений

1.2. При диагностике туберкулеза у животных используют эпизоото-

логический, клинический, патологоанатомический, гистологический, бактериологический, аллергический и молекулярно-генетический

(полимеразная цепная реакция — ПЦР) методы исследования.

Основными, обязательными методами исследования на туберкулез являются внутрикожная (у овец, коз и пушных зверей: норок, песцов, лисиц -пальпебральная, у лошадей — глазная) туберкулиновая проба, пато

логоанатомическое и бактериологическое исследование.

В благополучных по туберкулезу хозяйствах с целью отбора животных для диагностическою убоя из числа реагирующих на туберкулин применяют одну из следующих проб: симультанную аллергическую пробу, офтальмо-пробу, пальпебральную и внутривенную туберкулиновую пробу.

1.3. Диагноз на туберкулез считается установленным в следующих случаях.

1.3.1. У млекопитающих животных (за исключением свиней):

— при обнаружении на вскрытии изменений, характерных для туберкулеза;

— при отсутствии видимых изменений или возникших затруднениях в определении характера изменений — при положительных результатах ПЦР и положительных результатах биологического исследования.

— при выявлении бактериологическим исследованием возбудителя бычьего или человеческого вида;

— при положительных результатах биологического исследования.

— при положительных результатах ПЦР и выявлении бактсриологиче-

ским исследованием возбудителя туберкулеза бычьего или человеческого вида.

— при обнаружении на вскрытии характерных изменений, с подтверждением диагноза бактериоскопическим методом исследования;

— при отсутствии видимых изменений или возникших затруднениях в определении характера изменений — при положительных результатах ПЦР;

— при выделении культуры микобактерий птичьего вила (от попугаев -птичьего или человеческого видов).

1.4. Исследование животных на туберкулез проводят в порядке и сроки, предусмотренные Санитарными правилами СП 3.1.093-96 и Ветеринарными правилами ВП 13.3.1325-96, п.10 «Туберкулез», утвержденными Гос-комсанэпиднадзором и Минсельхозпродом России в 1996 г.

2. Эпизоогологическне данные

2.1. Контроль за эпизоотическим состоянием хозяйств по туберкулезу животных осуществляют по результатам ветеринарно-санитарной экспертизы убойного скота на мясокомбинатах и в хозяйствах, патологоанатомического вскрытия трупов павших животных, раулярного клинического обследования поголовья и аллергических исследований, проводимых по эпизоотологиче-ским и эпидемиологическим показаниям.

2.2. К туберкулезу восприимчивы животные всех видов и возрастов. Основным источником возбудителя туберкулеза являются больные животные, выделениями которых контаминируется среда обитания, являющаяся длительное время резервуаром инфекции.

2.3. Заражение туберкулезом животных происходит, в основном, через дыхательные пути или желудочно-кишечный тракт. Аэрогенное заражение чаще отмечают у взрослого скота в стойловый период. Телята, свиньи и птица заражаются чаще алиментарно при скармливании им необезэараженного мо-

лока, обрата и других кормов, контаминированиых возбудителем туберкулеза.

2.4. Возникновению и распространению болезни способствуют высокая концентрация поголовья, неполноценное кормление, сырые, темные, плохо вентилируемые помещения, стойловое безвыгульное содержание, контамини-рованные микобактериями туберкулеза объекты внешней среды, нарушение правил карантинирования вновь поступивших животных, перегруппировка поголовья без учета эпизоотического состояния, отсутствие ветеринарно-санитарных пунктов на фермах и при летне-лагерном содержании животных.

2.5. При диагностике болезни в первую очередь учитывают эпизоотическое состояние и степень распространения туберкулеза в районе, области (крас), эпизоотическое состояние хозяйства в прошлые годы, метод оздоровления, ввод нового поголовья, контакты благополучных стад с неблагополучными, завоз кормов и другие связи с неблагополучными хозяйствами, использование для выпойки нсобеззаражсиного молока и обрата, обнаружение патологоанатомических изменений, характерных для туберкулеза, у убитых или павших животных, выявление больных туберкулезом людей среди животноводов, наличие туберкулезных лечебно-профилактических учреждений на прилегающих территориях.

2.6. При появлении эпизоотологичсских иди эпидемиологических показаний. дающих основание подозревать заражение животных туберкулезом, проводят комплекс исследований в соответствии с разделами настоящем» Наставления.

При клиническом осмотре у крупного |югаiого скота определяют внешним кпд и унитлимоен. животного, ii|miiiivmmii.hdi |юж |1мнч1мыс лимфатические узлы ПОДЛОМИ иг ми.» |||Й*Т’||1|| «•••lill.it м.1 М О U’lMlMO. у коров-щами и млдвмменнмг •1ммф.н»*••«. i и ..пт признаки болезни

проявляются только при длительном течении процесса.

При туберкулезном поражении лимфоузлов может наблюдаться их увеличение и болезненность. Туберкулез легких проявляется кашлем, особенно но утрам. Туберкулез вымени характеризуется образованием горячих болезненных припухлостей и поражением налвммениых лимфоузлов. При туберкулезе кишечника возможна диарея.

У телок, заразившихся в раннем возрасте, признаки болезни могут проявиться лишь после первого-второго отела.

У кошек туберкулез может проявляться в виде язв » области головы, у порок — в вице язвенных поражений кожи головы, шеи, фудной и брюшной области.

У больных туберкулезом животных периодически повышается температура тела, волосяной покров становится тусклым, взъерошенным. Снижается упитанность — до полного истощения, падает аппетит.

Довольно часто больные животные не имеют никаких внешних признаков заболевания.

4.1. Сущность метода заключается в выявлении животных, инфицированных возбудителем туберкулеза или другими микобактериями, в аллергической пробе с туберкулином.

Основным методом исследования млекопитающих животных (за исключением лошадей, овен, коз и пушных зверей) и птиц является внутри-кожная туберкулиновая проба. В качестве дополнительных методов исследования у крупного рогатого скота применяют офтальмопробу, пальпебральное и внутривенное введение туберкулина, симультанную пробу с ППД-туберкулином для млекопитающих и комплексным аллергеном из атипичных микобактерий (КАМ) или ППД-туберкулином для птиц.

Применение симультанной пробы основано на видовой специфичности аллергии, проявляющейся более выраженными реакциями на аллерген, родственный но антигенному составу микобактериям, вызвавшим состояние сенсибилизации животных. При оценке реакций на туберкулин у животных необходимо учитывать, что проявление и характер внутрикожных реакций зависит от общего физиологического состояния организма, чувствительности животных к туберкулину и вида микобактерий, обусловившего сенсибилизацию организма.

Крупный рогатый скот, свиньи и другие животные, зараженные возбудителем туберкулеза бычьего вида, реагируют на ППД-туберкулин для млекопитающих. При этом у животных старых, а также с низкой упитанностью или при генерализованном туберкулезном процессе реакции на туберкулин могут быть слабо выражены или даже отсутствовать (анергия).

В благополучных по туберкулезу стадах крупного рогатого скота у животных может наблюдаться повыше«шая чувствительность к туберкулину для млекопитающих, обусловленная сенсибилизацией организма животных микобактериями туберкулеза птичьего вида, возбудителем паратуберкулеза или атипичными микобактериями (парааллергические реакции). По характеру проявления впутрикожные парааллергические реакции не отличаются от реакций на туберкулин у животных, зараженных возбудителями туберкулеза бычьего или человеческого видов, но более выражены на КАМ или туберкулин для птиц, что выявляется при проведении симультанной пробы. При повторных исследованиях парааллергические реакции часто выпадают.

4.2. Для аллергических исследований у млекопитающих применяют ПЦД-тубсркулин для млекопитающих, у птиц — П1 1Д-тубсркулин для птиц .

Каждый флакон с туберкулином н растворителем перед применением просматривают. При обнаружении и ни* каких либо примесей, нарушении целостности стекла или укупорки, «пеун*шип iitoiiiiitrii их выбраковывают. Препарат используют только к день нскрышм ||пмннк»и

4.3. Для внутрикожного введения туберкулина используют безыголь-ные инъекторы или шприцы вместимостью 1-2 мл с бегунком и иглами для внутрикожных инъекций. Обезьянам, пушным зверям, кошкам и птицам туберкулин вводят только шприцем с иглой. Для нанесения туберкулина на конъюнктиву применяют глазные пипетки.

Шприцы, иглы и глазные пипетки стерилизуют кипячением без добавления дезинфицирующих веществ. Безыгольные инъекторы стерилизуют в соответствии с наставлением по их применению.

4.4. Тубсркулинизации подвергают:

крупный рогатый скот, яков, лошадей и других представителей непарнокопытных, буйволов, свиней, овец, коз, собак, волков и других представителей хищных, кошек, обезьян, сумчатых — с двухмесячного возраста;

верблюдов, дельфинов, слонов, носорогов, бегемотов — с года;

маралов, оленей, антилоп, пушных зверей и птиц — с 6-месячного возраста.

Коров (нетелей), буйволиц, ячих, верблюдиц исследуют независимо от периода беременности; коз, овец, свиней, кобылиц, ослиц, сух, зебувидных и пушных зверей — нс ранее 1-го месяца после родов.

Нс разрешается исследовать туберкулинами животных в течение трех недель после вакцинации против инфекционных болезней и обработок против гельминтов.

4.5. Очищенный ППД — туберкулин для млекопитающих в стандартном растворе, приготовленном на биопредприятии, применяют для тубсркулинизации млекопитающих животных.

Сухой очищенный ПЛД-тубсркулин для птиц непосредственно перед применением растворяют в растворителе микэбакгериальных аллергенов, рассылаемом биопредприятием вместе с аллергеном.

4.6. Тубсркулины применяют при исследовании на туберкулез млекопитающим (кроме обезьян, кошек и пушных зверей: норок, песцов, лисиц) в

объеме 0,2 мл, обезьянам, кошкам, пушным зверям и птицам — 0,1 мл.

4.6.1. Для исследования обезьян стандартный раствор ШЩ-туберкулина для млекопитающих разводят в 10 раз (1 объем туберкулина в 9 объемах растворителя) стерильным физиологическим раствором pH 7,(Ж),5 или растворителем микобактсриальных аллергенов.

4.6.2. При исследовании птиц содержимое одного флакона с ПГЩ-губеркулином для птиц растворяют в одном флаконе растворителя объемом 20 мл.

4.7. Туберкул и низанию животных разрешается проводить ветеринарным врачам или ветеринарным фельдшерам под контролем ветврача. Исследование проводят под контролем специалистов государственной ветеринарной службы.

4.8. Внутрикожный метод туберкулинизации 4.8.1. Туберкулин вводят:

крупному рогатому скоту (кроме быков), буйволам, зебуБИдным, якам, оленям, маралам, антилопам — в середине шеи (в этой области нс разрешается вводить другие биологические препараты и лекарственные вещества); быкам, слонам, носорогам, бегемотам — в подхвостовую складку; верблюдам — в кожу брюшной стенки или области паха на уровне горизонтальной линии седалищного бугра;

свиньям — с наружной поверхности уха в 2-3 см от его основания; поросятам в возрасте 2-3 месяцев туберкулин допускается вводить в кожу поясничной области, отступая от позвоночника на 5-8 см, используя для этого только безыгольный инъектор;

овцам и козам — в нижнее веко под кожу, отступив от его края на 1,5-2

собакам, волкам и другим представителям хищных — в области внутренней поверхности бедра или локтеиой складки.

обезьянам, сумчатым, пушным зверям (норкам, песцам, лисицам)

источник