Меню Рубрики

Тест на активность инфекции туберкулеза

Воздушно-капельное поражение возбудителем, известным как палочка Коха или микобактерия, органов дыхательной системы и является причиной легочной формы туберкулеза. Заражению ежегодно подвергаются более 1 млн. детей и около 9 млн. взрослого населения планеты, а по данным Всемирной организации здравоохранения из 10 человек 3 уже являются его носителями. Именно поэтому так важно проходить ежегодное тщательное обследование на туберкулез каждому, независимо от возраста, социального положения и половой принадлежности. Современные методы диагностики туберкулеза легких позволяют вовремя определить форму, степень тяжести и спрогнозировать последствия заболевания, назначить полноценное интенсивное лечение. И не стоит думать, что поставленный диагноз туберкулез — это приговор. Ранее выявление туберкулеза и возможности, которыми обладает на сегодняшний день медицина, способствуют выздоровлению более 70% всех обратившихся пациентов.

Современная палочка Коха и ее многочисленные штаммы, которых насчитывается более 74, очень отличается от ранее открытой микобактерии. Способность вирулентной бациллы проникать в здоровые клетки носителя и оставаться в организме человека незамеченной, жизнеспособность и устойчивость к кислым средам и дезинфицирующим средствам очень усложняют задачу врачам и сотрудникам лаборатории.

Диагностика туберкулеза легких требует все новых возможностей, чтобы провести полноценное исследование. Это касается и людей, которые входят в особую группу риска и имеют предрасположенность к возникновению туберкулеза: ВИЧ-инфицированные пациенты или с поставленным диагнозом СПИД, с зависимостью от алкогольной, наркотической и никотиновой продукции, при наличии сахарного диабета, бронхиальной астмы и наследственного фактора. Нуждаются в медицинском контроле и новорожденные дети от инфицированной матери, несовершеннолетние и подростки до 17 лет, люди пенсионного и преклонного возраста.

Существует еще одна категория потенциальных переносчиков заболевания — инфицированные заключенные. А ведь «тюремный» туберкулез, возбудителями которого являются в основном устойчивые новые штаммы вируса Коха, и его диагностика с последующим лечением смогут предупредить распространение заболевания и опасность заражения окружающих после того, как человек покинет места лишения свободы.

Опасность, которую представляет собой латентная форма туберкулеза, состоит в том, что на ранней стадии выявление заболевания не всегда возможно по причине отсутствия выраженных симптомов. В остальных случаях, болезнь активно прогрессирует. Как диагностировать туберкулез, и на какие признаки стоит обратить внимание:

  1. сухой продолжительный кашель или с выделением мокроты, хрипы;
  2. постоянная температура тела 37°C;
  3. бледный цвет лица и уставший вид;
  4. снижение аппетита и потеря веса;
  5. одышка и боль в боку;
  6. обильное выделение пота.

У женщин способами определения туберкулеза легких являются нарушения менструального цикла и частые головные боли, со стороны мочевыделительной системы возможен цистит или кровянистые выделения в моче.

Люди старшего поколения способны объективно оценивать свое состояние здоровья и следить за ним, обращаться за помощью к специалистам. Несовершеннолетние дети еще не понимают всю опасность инфекционных болезней, поэтому в дошкольных и образовательных учреждениях постоянно проводятся мероприятия по профилактике и предупреждению туберкулеза.

Клинический осмотр — основной первичный вид обследования. Врач педиатр или фтизиатр обязан выслушать жалобы маленького пациента и внимательно ознакомиться с его медицинской картой для определения врожденных патологий дыхательной системы, хронических болезней щитовидной железы. Важную роль играет целостность и цвет кожных покровов, нормальный показатель температуры — 36,6°C — 36,7°C и отсутствие хрипов, одышки при прослушивании стетоскопом.

Если общее состояние оценивается врачом, как удовлетворительное, дальнейшие методы ранней диагностики туберкулеза у ребенка предусматривают обязательное проведение пробы Манту и вакцинация БЦЖ один раз в год. Родители не доверяют составу прививки и отказываются от введения ребенку туберкулина. В этом случае они обязаны предоставить в ближайшее время результаты анализа на туберкулез, который был сделан вместо Манту.

Частые простуды или обострения хронических заболеваний, инфекции и воспалительные процессы, которые спровоцированы переохлаждением, тяжелой физической работой или низким иммунитетом, могут стать причиной туберкулеза у старшего поколения. Реакция Манту — недостаточно эффективное исследование для взрослых. Используется вакцинация уже после лечения туберкулезной инфекции или при наличии ярко выраженных признаков заболевания. Существуют диагностические методы обследования, как распознать туберкулез у взрослых.

Чаще всего на ежегодном медицинском осмотре врачи назначают флюорографию или рентгенографию легких. Обзорный метод визуализации грудной клетки, дает представление о состоянии органов дыхания в виде черно-белого снимка, на основании которого может быть обнаружен очаг туберкулеза. Подозрение рентгенолога или выявленные патологии дыхательной системы потребует дополнительного обследования.

С целью предупреждения распространения заболеваемости среди младшего поколения применяется подкожная инъекция или проба Манту, которая проводится каждый год. Ребёнок получает вещество туберкулин или штамм возбудителя туберкулеза, созданный в искусственных лабораторных условиях. Ослабленная микобактерия должна вызвать реакцию со стороны иммунной системы на месте укола. Оценивают результат проведенной пробы Манту через 72 часа:

  1. отрицательный — до 1 мм
  2. сомнительный — 2-5 мм;
  3. положительный — более 6 мм;
  4. слабоположительный — 5-9 мм;
  5. средний уровень интенсивности — 10-14 мм;
  6. выраженный — до 16 мм;
  7. гиперергические. У детей и подростков — более 17 мм, у взрослых — более 21 мм.

Кроме этого существуют и ложные показатели. Учитывают и предыдущие данные. Даже отрицательный результат не является гарантией отсутствия палочки Коха в организме. Но даже при таких недостатках, проба Манту — самая распространенная профилактика и диагностика туберкулеза у детей и подростков на ранних стадиях. Недопустима вакцинация при аллергии и бронхиальной астме, воспалительном процессе и заболеваниях органов пищеварения, сахарном диабете.

Заменить традиционные методы профилактики и раннего выявления туберкулеза можно с помощью иммуноферментного анализа крови, который часто используется вместо пробы Манту. Принцип проведения данного исследования состоит в иммунной реакции организма, антител, к антигенам IgG и IgM возбудителя, микобактерии. В процессе анализа в среду с предполагаемыми туберкулезными палочками M. Tuberculosis помещают содержащие окрашивающее вещество защитные клетки, которые взаимодействуют с источником инфекции и передают вирусу часть фермента.

«Диаскинтест». Пробная попытка заменить уже существующую туберкулиновую пробу. Основное действующее вещество не ослабленный штамм микобактерии человеческого и бычьего типа, как в туберкулине, а белок с антигеном возбудителя туберкулеза, присущего исключительно человеку. «Диаскинтекст» ограничивает количество ложных положительных результатов и определяет только активный вирус. В начале заболевания дает отрицательные результаты.

Метод диагностики ПЦР. Для лабораторного изучения лучше использовать мокроту. Под воздействие высокой температуры выделяют чужеродное ДНК. Для того, чтобы определить микобактерии или их штаммы, сравнивают образец с уже полученными ранее. Диагностированный туберкулез можно получить уже через 5 часов после сдачи исходного материала. Процедуру часто применяют для детей с противопоказаниями для проведения туберкулинодиагностики или для подтверждения диагноза.

Назначается на ежегодном медицинском обследовании у представителей старшего поколения. Не допускаются к процедуре дети из-за высокой дозы радиации для еще недостаточно окрепшего иммунитета. Лучевая диагностика предназначена для скрининга органов грудной клетки, поиска очагов туберкулеза и профилактики других патологий.

Рентгенография и флюорография органов грудной клетки. С помощью специального экрана рентгеновские лучи проходят через тело обследуемого человека, обрабатывается теневое изображение и переносится на пленку. Проявление занимает несколько минут. Цифровая флюорография выводит на монитор уже готовую картинку, которая распечатывается в черно-белом формате на принтере или сохраняется в электронном виде. На снимке флюорографии виден очаговый, инфильтративный и хронический запущенный туберкулез в виде очагов поражения.

Компьютерная и магнитно-резонансная томография легких. Методы более информативного характера для точного выявления туберкулеза, которые дают возможность с точностью определить размеры очагов поражения и жидкостные скопления, патологии. Чувствительность в 100 раз превышает флюорографию и рентген.

Изучение состава и количественных показателей жидкой соединительной ткани, которая, так или иначе, сталкивается с бациллой M. Tuberculosis, важно для ранней диагностики заболевания. При туберкулезе у пациента наблюдается умеренная анемия, уровень гемоглобина у мужчин ниже 130, у женщин менее 120. В период обострения легочной формы изменяется зернистость лейкоцитов и их количество увеличивается от 20% до 50%, число эозинофилов, молодых иммунных клеток, уменьшается.

Но основной показатель активности туберкулеза — это скорость оседания эритроцитов или СОЭ. Эта проба показывает способность эритроцитов, плотность которых больше плазмы, оседать под действием гравитации. В здоровом организме норма у женщин не должна превышать 15 мм/час, у мужчин — 10 мм/час. Повышение СОЭ от 20 мм/ч и до 80 мм/ч указывает на большое количество иммуноглобулинов и низкий уровень альбумина в крови, что означает активизацию защитных сил организма под действием чужеродных клеток.

Используют часто и лейкограмму, которая основана на изменении белкового состава крови во время острого воспалительного процесса. Учитываются показатели таких лейкоцитов, как нейтрофилы, эозинофилы, базофилы, моноциты и лимфоциты. Обследование на заболевание туберкулез легких выделяет три фазы поражения иммунной системы организма:

  • нейтрофильная. Активная защитная реакция. Количество нейтрофилов увеличивается, уровень моноцитов и лимфоцитов снижается, эозинофилы отсутствуют;
  • моноцитарная. Попытка преодолеть туберкулезную инфекцию. Число нейтрофилов низкое, прослеживаются единичные эозинофилы, лимфоциты увеличиваются;
  • восстановления. Наблюдается после выздоровления пациента. Количество лимфоцитов и эозинофилов увеличено, но их показатели приходят в норму.

В сравнении с ИФА и ПЦР анализами, обнаружен сам возбудитель туберкулеза не будет, но изменения состава крови будет достаточно, чтобы заподозрить наличие в организме воспалительного процесса и продолжить обследование, направленное на поиски источника.

Особенностью клеточной стенки туберкулезной палочки является отсутствие реакции на хлорсодержащие средства и кислые среды. Поэтому проведение диагностических мер в лабораторных условиях часто выполнить невозможно. Заменяет микроскопические методы исследования мазка в таких случаях бактериоскопия или окрашивание мокроты.

Микроскопия мазка или материала, содержащего КУБ, осуществляется по Граму и способом окрашивания, известного, как метод Циля-Нильсена. Вирус Коха сначала подвергается воздействию красного вещества карбол-фуксина, который проникает в мембрану клетки, а потом сверху обрабатывается раствором метиленовым синим. Положительным результатом наличия туберкулезной палочки станет присутствие в мазке на синем фоне красных микобактерий. В современной медицине чаще используется аурамин-родамин. После ультрафиолетового спектра бациллы приобретают желтый оттенок.

Используется, как дополнительный способ забора мокроты и метод выявления в ней возбудителя туберкулеза, когда у больного не получается собрать материал самостоятельно или количество выделений недостаточно для проведения обследования. Запрещено назначать людям пенсионного возраста, при заболеваниях сердечно-сосудистой системы и бронхиальной астме, детям до 15 лет.

Процедура предусматривает местную анестезию дыхательных путей и введение в гортань с помощью специального шприца подогретого физиологического раствора для повышения уровня секреции. После проведенных манипуляций мокрота у пациента интенсивно выделяется естественным путем и собирается медицинскими работниками в пробирку для последующего посева и выращивания микобактерий.

Для определения патологического процесса, протекающего в легких, и получения исходного образца, назначается инвазивная диагностика туберкулеза у взрослых. Она направлена на изучение причин кашля с кровью, внутреннего легочного кровотечения, явной дыхательной недостаточности, взятие материала слизистых, бронхиального секрета или мокроты, получения образца пораженного участка.

Обязательным условием пункционной биопсии является четкий контроль над выполняемыми действиями через ультразвуковой аппарат или с помощью рентгеновских лучей. Суть процедуры состоит в местном обезболивании области грудной клетки и введения иглы Сильвермена для захвата и отделения фрагмента легочной ткани. После проведения биопсии определяется степень и форма поражения дыхательной системы. В запущенных случаях прибегают к открытому хирургическому вмешательству под общим наркозом.

Чтобы изучить и оценить степень поражения легочной системы, включая трахеи, бронхи и слизистые оболочки, в медицинской практике все чаще отдают предпочтение эндоскопической диагностике туберкулеза. К показаниям для проведения процедуры относится длительный кашель, который наблюдается у человека более 1 месяца, выделения мокроты с кровью, выявленные ранее патологии в легких.

Во время обследования необходима местная анестезия и мышечные релаксанты, чтобы обеспечить свободный вход в дыхательные пути гибкого тубуса со светопроводным устройством. Взятие материала слизистой или секрета из трахеи и бронхов способствует изучению цитологического состава мокроты на наличие инородных клеток туберкулезной палочки.

источник

Раньше, когда заходила речь об анализе на туберкулез, было проще: поголовно проводилась проба Манту и население не задумывалось об иных вариантах. По мере развития медицины, а также интернет-СМИ, информированность граждан значительно выросла. И сегодня на слуху названия самых разных тестов и проб на выявление микобактерий, но мало кто в состоянии внятно объяснить, чем же они отличаются друг от друга. MedAboutMe разбирает особенности разных проб и тестов на туберкулез.

История диагностики туберкулеза начинается в 1890 г., когда Роберт Кох получил туберкулин: вырастил в пробирке культуру туберкулезных бактерий, убил ее нагреванием и тщательно профильтровал. Современная версия туберкулина дополнительно очищена от компонентов культуральной среды и в конечном итоге состоит из белков микобатерий (туберкулопротеины), полисахаридов, липидов и нуклеиновой кислоты, то есть включает в себя не целые микроорганизмы, а их отдельные компоненты, совершенно не опасные в инфекционном смысле.

Важно понимать: туберкулопротеины — это гаптены, низкомолекулярные белки, которые не иммуногенны. То есть, они не способны спровоцировать реакцию сенсибилизации и выработки антител к туберкулину. А значит, не могут стать причиной аллергии — даже у людей, имеющих к ней склонность. Но в организме, уже сенсибилизированном к туберкулезной палочке (то есть, имевшем с ней контакт в виде вакцины БЦЖ или живых микобактерий), туберкулин провоцирует иммунологический ответ. В этом и заключается смысл проведения пробы — в оценке масштабов этого ответа.

Нередко встречаются сообщения об аллергии на туберкулин. О чем идет речь? В состав туберкулина, помимо белков, входят и другие вещества. А в составе туберкулинового препарата, который вводится человеку, имеются различные химические компоненты. И они, не являясь собственно аллергенами, могут провоцировать развитие аллергической реакции косвенным путем. На практике такие случаи встречаются крайне редко.

А вот покраснение или опухание места укола является так называемой местной кожной реакцией, которая имеет диагностическое значение. При развитии общей реакции организма — повышение температуры, ухудшение самочувствия — речь идет уже о гиперэргической реакции организма, что говорит о необходимости проведения дополнительных обследований.

Введение туберкулина лежит в основе тестов Пирке, Манту и Коха — они входят в группу методов туберкулинодиагностики, применяемых в России. Методом массовой диагностики является проба Манту (потому что дешевая и достаточно информативная на первом этапе обследования). Но если возникает необходимость индивидуального обследования, то возможно использование проб Пирке и Коха, а также их различных вариаций.

За исключением новорожденных младенцев, остальным людям перед вакцинацией БЦЖ обязательно проводится туберкулиновая проба. Если реакция положительная — вакцинация не проводится. В народе ошибочно считается, что это потому, что «уже есть иммунитет». На самом деле — из-за повышенного риска осложнений в виде воспаления и образования рубцов.

Проба Коха была предложена первооткрывателем туберкулезной палочки и человеком, впервые получившим туберкулин — Робертом Кохом.

Схема проведения: туберкулин вводится подкожно. На место введения подозрительного соединения немедленно направляются «бойцы» иммунной системы: макрофаги и Т-лимфоциты. При этом вырабатываются вещества, запускающие развитие местного воспаления. Через 2-3 суток врач оценивает три типа реакций: общую (всего организма), местную (на месте инъекции) и очаговую (в очаге поражения микобактериями, если таковой имеется). Для этого проводится анализ крови и мокроты, измеряется температура.

Австрийский врач Клеменс Пирке разработал новую схему введения туберкулина в 1907 г.

Схема проведения: внутреннюю поверхность предплечья обрабатывают раствором карболовой кислоты (вместо спирта, который может привести к осаждению белков), и на кожу капают туберкулин. После этого проводят скарификацию, то есть наносят легкую царапину длиной 5 мм. Проба является накожной, важно, чтобы при этом не было крови, которая затрудняет всасывание туберкулина. Через 48-72 часа оценивается размер области гиперемии (покраснения).

Эта проба существует также в таком варианте, как градуированная проба Гринчара и Карпиловского (ГКП), когда одновременно проверяется реакция на растворы с разной концентрацией туберкулина, нанесенные на кожу.

Проба Манту была разработана в 1908 г. немцем Феликсом Менделем и французом Шарлем Манту, чье имя она и получила. Это, по сути, более продвинутая версия пробы Пирке.

Схема проведения: туберкулин вводится внутрь кожи все там же, на предплечье. Место укола краснеет, может образовываться инфильтрат. Через 3 суток определяется размер инфильтрата, а если его нет, то диаметр покрасневшего участка. Врач учитывает наличие и диаметр инфильтрата, а также его изменение относительно результатов предыдущих обследований.

Если человек был вакцинирован БЦЖ, то возможна ложноположительная реакция на пробу Манту. Но масштабы реакции все равно позволяют отличить вакцинированного человека от больного туберкулезом.

Положительные туберкулиновые пробы указывают на контакт организма с микобактериями вообще. Поэтому они также дают положительную реакцию у людей, вакцинированных БЦЖ. Тут стоит уточнить один момент. Вакцина БЦЖ готовится на основе штамма живой, но ослабленной бактерии, вызывающей туберкулез у коров — Mycobacterium bovis BCG. Несмотря на видовые нюансы, антитела, которые организм учится вырабатывать к бычьему туберкулезу, эффективно защищают его и от человеческой разновидности — Mycobacterium tuberculosis.

Одним из существенных достижений в области диагностики туберкулеза последних лет является открытие белков, которые есть у человеческой микобактерии, но нет у микобактерий, вызывающих бычий туберкулез. Эти белки ESAT-6 и CFP-10 являются для организма человека антигенами и поэтому на их основе были разработаны принципиально новые тесты. Если человек уже встречался с микобактериями, то клетки его крови бурно реагируют на введение данных белков. По силе реакции проводится оценка «степени знакомства» организма с туберкулезной палочкой, причем именно человеческой.

В список распространенных на территории России тестов на основе антигенов ESAT-6 и CFP-10 входят: Диаскинтест, Тубинферон и Квантиферон. Несомненное преимущество Диаскинтеста и Квантиферона заключается в том, что на них никак не влияет, был человек вакцинирован БЦЖ или нет.

Кроме того, в составе тестов нет даже разобранных на запчасти микобактерий — только белки и вспомогательные компоненты. Но, в отличие от туберкулина, на эти белки в принципе может возникнуть аллергия. Вероятность этого крайне низка, но если у человека, которому надо пройти тест, имеется к ней склонность, обследование проводят на фоне десенсибилизирующей терапии на протяжении 5 дней до этого и 2 дней после.

Это отечественная разработка, пользующаяся сегодня повышенной популярностью среди населения, особенно среди родителей, которым не нравятся туберкулиновые пробы. Интерес к этой группе тестов объясняется просто: в представлении граждан пара отдельных белков безобиднее разобранной на детали микобактерии.

Схема проведения: как и в случае пробы Манту, препарат вводится внутрикожно. Результат оценивается через 72 часа.

Тоже российский тест, но не столь широко распространенный, как Диаскинтест. Тубинферон интересен тем, что сочетает в себе тест на основе антигенов и туберкулиновую пробу. В его состав, помимо белков ESAT-6 и CFP-10, входит еще и очищенный туберкулин.

Основное преимущество Тубинферона в том, что он, благодаря туберкулину, позволяет заодно оценить масштабы поствакцинальной реакции. Данное свойство важно, когда требуется определить, идет ли речь о туберкулезе или генерализованной БЦЖ-инфекции, например, у ребенка, зараженного ВИЧ. Но для массовой диагностики этот параметр не важен.

Схема проведения — как и в случае Диаскинтеста.

Тест QuantiFERON, QFT (производитель Cellestis, Австралия) отличается от всех вышеописанных методов диагностики тем, что он не требует введения препарата в организм человека. Проба крови добавляется в пробирку с белками-антигенами. Если Т-лимфоциты, находящиеся в крови, распознают белки, как уже известные им (то есть, организм ранее встречался с микобактериями), то они начинают активно вырабатывать гамма-интерферон. По его количеству и определяется степень «знакомства» с инфекцией.

Спор о том, какой тест наиболее эффективен, идет среди ученых, врачей и особенно среди родителей давно. Однако до сих пор однозначного ответа на этот вопрос нет.

Диаскинтест и Квантиферон считаются более чувствительным, чем туберкулиновые тесты. При этом проба Манту эффективнее Диаскинтеста у детей, не вакцинированных БЦЖ.

С другой стороны, даже тесты, демонстрирующие равную эффективность, могут в разных ситуациях давать неодинаковый результат. Например, согласно данным исследования, проведенного российскими учеными из Санкт-Петербургского государственного педиатрического медицинского университета в 2014 году, при выявлении латентной (скрытой, спящей) туберкулезной инфекции Тубинферон оказывается более чувствительным, чем Диаскинтест и Квантиферон. Но при уже имеющемся туберкулезе ситуация будет обратная: на первое место по чувствительности выходит Квантиферон, за которым следуют Диаскинтест и Тубинферон.

Важно также понимать, что у массовой и индивидуальной диагностики — разные цели и задачи. И может так случиться, что по результатам пробы Манту человек будет направлен на дополнительное обследование при помощи другого теста на туберкулез. Так, бывает, что после пробы Манту следует уточняющее обследование при помощи Диаскинтеста. А в некоторых ситуациях их ставят одновременно на разные руки.

Итак, идеального теста на туберкулез нет. Каждый из них в чем-то лучше других, а в чем-то им уступает. Поэтому самым правильным решением будет следовать рекомендациям врачей: применение метода массовой диагностики (проба Манту) и, при необходимости, дополнительное, уточняющее обследование при помощи теста, который порекомендует врач, или других диагностических методов.

источник

Туберкулез является одним из самых распространенных инфекционных заболеваний органов дыхания, которое трудно диагностируется, но именно выявление патологии на ранней стадии поможет предупредить дальнейшее развитие недуга и его тяжелых осложнений. Традиционные методики обнаружения микобактерий – проба Манту, Пирке и рентгенологическое обследование – не всегда возможны и требуют времени, поэтому сегодня их часто заменят новыми – Диаскинтестом и тестом Т-SPOT на туберкулез.

Последние представляют собой ту же внутрикожную пробу, однако имеют более точные результаты диагностирования, являются альтернативными технологиями для выявления палочек Коха у детей, беременных и лиц старшего возраста. Данный материал подробно рассматривает все виды тестов.

Наиболее прогрессивными методами диагностирования в настоящее время считаются Диаскинтест, иммуноферментный квантифероновый тест, ПЦР – метод полимеразной цепной реакции и Т-СПОТ.

Новые технологии отличаются скоростью обследования, точностью результатов, но, тем не менее, пациенты относятся к ним с некоторым опасением. Чтобы отсечь сомнения в эффективности новых фтизиатрических обследований, ниже приводятся характеристики наиболее распространенных способов диагностики.

С целью выявления туберкулеза используются следующие методы:

    Самой распространенной методикой является проба Манту. Выполняется подкожным ведением вытяжки из разрушенных бактерий, которая провоцирует реакцию организма. Через трое суток после вакцинации необходимо измерить линейкой размер покраснения, возникшего вследствие укола. Увеличенный размер воспалившейся папулы говорит о большой вероятности развития недуга.

  • Проба Пирке является накожным вариантом теста Манту. В данном случае пациенту делается небольшой разрез на предплечье, куда затем наносится концентрированный раствор микобактерий. Контроль разрастания покраснения также проводится линейкой.
  • Т-спот определяет количество поверхностных белковых комплексов Т-лимфоцитов, которые распознают чужеродное вещество, в данном случае палочки Коха.
  • Экспресс-анализ проводится на основе капли крови. Тест можно проводить в домашних условиях, приобретя в аптеке необходимый медицинский набор. Точность анализа достигает 80%.
  • Разумеется, каждый метод диагностики имеет не только свои преимущества, но и недостатки. Поэтому однозначного предпочтения быть не может.

    Рассматривая каждую методику можно сделать следующие выводы:

      Наиболее точным считается Диаскинтест. Он исключает ненадежные – ложноположительные результаты после уже введенной вакцины против туберкулеза. Однако побочных действий в виде головной боли, повышения температуры тела, общей слабости не избежать. Противопоказаниями являются личная непереносимость, аллергия, неврологические и некоторые хронические заболевания.

  • Точность метода полимеразной цепной реакции практически ничем не отличается от предыдущего. Используется при наличии противопоказаний к проведению Диаскинтеста и Манту. Его результаты также не искажаются проведенными ранее вакцинациями.
  • T-SPOT.TB наделен аналогичными качествами вышеприведенных методик. Может служить к ним дополнением в случае обнаружения ложноположительных результатов других подкожных и накожных проб диагностики. Основным преимуществом его является безопасность и точность. Вполне подойдет маленьким детям, лицам преклонного возраста и страдающим недугами аутоиммунной системы.
  • Данная проба разрешена Министерством здравоохранения России и рекомендована для выявления и диагностики микобактерий у детей как самая передовая и безопасная методика. Позволяет определить не только явную форму болезни, но и скрытую. Тест-спот на туберкулез у детей был создан как альтернатива реакции Манту для выявления патологии в раннем детском возрасте, дополнение при получении ненадежных результатов при других видах диагностики.

    Данное фтизиатрическое обследование характеризуется высокой клинической эффективностью, а именно:

    • не восприимчив к ранее проведенным вакцинациям и патогенным микроорганизмам, что повышает точность исследования,
    • имеет низкий уровень ненадежных результатов, чувствительность достигает 95%;
    • не существует ограничений для проведения обследований у младенцев, детей всех возрастных групп, беременных, лиц старшего возраста, проходящих внепочечное очищение крови.

    Не последнюю роль играет и отсутствие необходимости повторения теста. Обследование потребует для проведения теста у детей 2-4 мл крови, взрослых – 6.

    Данная диагностика определяет количество Т-лимфоцитов, вырабатывающих гликопротеиды, которые сигнализируют организму о появлении чужеродных возбудителей. В лимфоидной ткани активизируется процесс деления защитных клеток, вызывая тем сам повышение иммунитета. Тест способствует быстрому обнаружению скрытой формы туберкулеза, при которой латентная фаза может перейти в открытую вследствие снижения иммунитета.

    Одними из плюсов Т-СПОТа является быстрый результат диагностики и отсутствие реакции на предыдущие вакцинации, что не представляется возможным в пробе Манту. В отличие от последней пробы, а также Диаскинтеста, T-spot — иммунологический, происходит без введения под кожу возбудителей инфекции, что характеризуется практическим отсутствием противопоказаний.

    Диагностика подходит для всех возрастных групп, включая грудных детей, беременных, лиц с аллергическими заболеваниями, но с предварительной консультацией с лечащим врачом.

    Болезнетворные бактерии упоминаемой патологии представлены туберкулезными бациллами. Основной признак микобактерий выражен их патогенностью, т. е. способностью делиться в ткани живого организма, вызывая при этом туберкулез.

    Диаскинтест является дополнительной методикой для обнаружения присутствия или отсутствия микобактерий туберкулеза в организме. Компоненты диагностики содержат специальные белки, провоцирующие иммунный ответ организма. Положительным свойством является реакция только на бациллы, вызывающие заражение туберкулезом.

    Процесс выполняется путем введения 0,1 мл средства, содержащего туберкулезные аллергены без присутствия возбудителей инфекции. Ответом служит образовавшийся на коже бугорок размером до 1 см.

    Реакция организма после введения вакцины говорит о присутствии или отсутствии данной патологии:

    • отрицательным является отклик при отсутствии явного покраснения и опухлости;
    • сомнительной называется проба с приливом крови, но без опухоли;
    • положительной – наличие воспалившегося бугорка с примесью крови, лимфы.

    Результат проведенного анализа оценивается только через трое суток путем замера образовавшегося вздутия. Его размер и степень покраснения свидетельствуют о присутствии инфекции либо наличии патологии в активной фазе.

    Диаскинтест не имеет противопоказаний, поэтому рекомендуется для выявления заболеваний у детей младшего возраста, беременных, кормящих грудью матерей, лиц преклонного возраста. Перед проведением анализа необходимо посетить кабинет врача.

    Экспресс-анализ также явлется точным дополнительным методом, если основные процедуры показывают некоторое расхождение. Подобную диагностику следует проводить только при целостном кожном покрове, отсутствии неврологических заболеваний, выраженных судорогами, потерей сознания, иных нежелательных реакций организма.

    Экспресс-проба позволяет обнаружить присутствие специальных веществ – антител, которые образуются после попадания в организм чужеродных бактерий.

    Медицинский набор теста содержит следующие компоненты:

    1. Тест-полоски на туберкулез.
    2. Тестовый прибор.
    3. Скарификатор.
    4. Прединъекционная одноразовая салфетка.
    5. Одноразовая пипетка для крови.
    6. Руководство пользователя.

    Приобретать медицинский набор следует только в аптеке, при этом обратив внимание на герметичность упаковки. Прибор позволяет выявить не только заболевание, но и степень его развития.

    Диагностика в домашних условиях проводится по следующему алгоритму:

    1. Тщательно вымыть руки с мылом и горячей водой.
    2. Проколоть скарификатором палец.
    3. Первую каплю крови стереть салфеткой.
    4. Следующие капли — собрать пипеткой.
    5. Поместить отобранный образец в окошко «S» прибора.
    6. Через 15 минут обратить внимание на количество полосок.

    Важно! Для получения достоверных выводов следует строго придерживаться приведенной инструкции. Прибор позволяет выявить присутствие антител, вырабатывающихся после попадания в организм туберкулезных палочек.

    Тест показателен двумя результатами:

    • появление одной полоски говорит об отрицательном результате – отсутствии антител;
    • две полоски – результат положительный.

    Разумеется, положительный результат не должен быть причиной для паники, ведь даже самая точная диагностика не дает 100% результата. Однако появление двух полосок должно сопровождаться последующим визитом к врачу.

    Выявление заболевания туберкулезом является ответственным мероприятием, для которого предусмотрено несколько методик. Наряду с устоявшимися туберкулиновыми пробами существуют и иммунологические — T-spot, иммуноферментный квантифероновый тест, Диаскинтест. Последние обладают не только точностью обследования и безопасностью, но и отсутствием противопоказаний.

    источник

    Определение состояния основных систем иммунитета, их клеточных структур, а также оценка степени развития специфических иммунологических реакций могут помогать в решении ряда задач в клинике туберкулеза. Анализ результатов иммунологического обследования позволяет оценить активность течения туберкулезного процесса и, что особенно важно, минимальную активность в случаях выявления ограниченных специфических поражений. С помощью иммунологических тестов удается определить характер течения заболевания, направление его динамики в сторону прогрессирования или ликвидации поражений, в известной мере — прогноз возникновения обострений и рецидивов. Наблюдение в динамике позволяет осуществлять контроль эффективности проводимого лечения — как традиционного химиотерапевтического, так и с применением ряда патогенетических средств.

    Уточнение иммунологического статуса больного может иметь значение и перед началом оперативного вмешательства, а также с целью назначения различных иммуностимулирующих препаратов в комплексном лечении больных туберкулезом Кроме того, учет иммунологических сведений может способствовать дифференциальной диагностике туберкулеза с другими заболеваниями легких, в основном подтверждая или не подтверждая диагноз туберкулеза, а по возможности конкретизируя диагноз другого легочного заболевания.

    Иммунологические методы исследования используются также при попытках дифференцирования поствакцинальной и инфекционной аллергии; с их помощью осуществляется диагностика лекарственной непереносимости, возникающей в процессе химиотерапии, т. е. выявление лекарственного средства вызывающего подобные реакции.

    В большинстве случаев при самых различных заболеваниях (включая и туберкулез) для оценки состояния иммунитета Сольных используется принципиально одинаковый набор иммунологических методов, включающий в себя тесты оценки состояния Т- и В-систем лимфоцитов, а также некоторых их субпопуляции (особенно регуляторных). Подобная оценка предусматривает количественную характеристику тех или иных им-мунокомпетентных клеток, а также определение их функциональной активности.

    В комплекс иммунологического обследования, как правило, входят также методы оценки сенсибилизированных к соответствующим антигенам Т- и В-лимфоцитов или их продуктов — медиаторов и антител.

    Ценную информацию могут предоставить исследования по обнаружению антигенов микобактерий или других микроорганизмов в таком наиболее доступном материале, как периферическая кровь. Однако эти методы пока не нашли широкого распространения, несмотря на отдельные положительные сообщения, и только в последнее время появились новые возможности по выявлению специфических антигенов в иммунных комплексах.

    Кроме того, важное значение имеет определение факторов неспецифической реактивности, к которым относятся, например, различные компоненты системы комплемента и ряд других факторов. Широко используются также реакции определения функции фагоцитов: полинуклеаров и макрофагов, особенно альвеолярных, при легочных заболеваниях, а также различных сывороточных белков, гормонов и т. д. — с помощью иммунологических методов с применением антисывороток к этим веществам.

    Как показали многочисленные исследования, при ряде заболеваний легких, особенно хронически протекающих, развиваются частичные, иногда преходящие иммунологические нарушения, которые могут влиять на течение болезни и эффективность лечения. При этом нарушения бывают связаны с какой-либо функцией иммунокомпетентных клеток или с той или иной субпопуляцией. Например, снижение реакции на один из митогенов при ее сохранении на другой или при нормальных количественных характеристиках лимфоцитов, нарушение деятельности какой-нибудь из субпопуляций лимфоцитов-хелперов или супрессоров при нормальной функции другой субпопуляции. В других случаях определение числа Т- и В-лимфоцитов необходимо для суждения об изменении тех же субпопуляций.

    Оценка специфического иммунитета — наиболее признанный подход в использовании иммунологических методов в клинике. В этом направлении разработано большое количество клеточных и серологических реакций, применяемых для решения различных клинических задач с иммунологических позиций.

    Развитие клинической иммунологии в последние годы связано с усовершенствованием методов исследования и появлением принципиально новых, позволяющих на качественно ином уровне определять популяции и субпопуляции иммунокомпетентных клеток (в частности, с помощью моноклональных антител), производить выделение и очистку специфических антигенов, определять антигены в биологических жидкостях. Все эти методы стали достаточно широко, но не в одинаковой степени применяться и при легочной патологии.

    Основным и наиболее часто используемым материалом для исследования является кровь больного и клетки крови. Вместе с тем технические принципы постановки реакций являются в основном общими и при использовании других субстратов, содержащих иммунокомпетентные клетки или их продукты, исключая, конечно, методы их выделения. Следовательно, эти стандартные методики с той или иной долей необходимых изменений можно без очень больших трудностей перенести на исследование другого материала.

    Тесты количественной и функциональной оценки Т-лимфоцитов и их субпопуляций. Розеткообразование с бараньими эритроцитами. Установлено, что розетки с бараньими эритроцитами образуют Т-лимфоциты. Для постановки данного теста из периферической крови выделяют лейкоцитарную массу путем отстаивания гепаринизированной или дефибринированной крови (спонтанное отстаивание или с добавлением желатина) и затем осаждают лейкоциты центрифугированием либо из цельной крови выделяют лимфоциты центрифугированием в градиенте фикол/гепак (уротраст, изопак, верографин). Затем лимфоциты соединяют с бараньими эритроцитами и через определенный срок инкубации готовят мазки, которые фиксируют глутаровым альдегидом и окрашивают азурэозином (либо просматривают в камере Горяева нативные препараты); в препаратах подсчитывают процент лимфоцитов, образовавших розетки с эритроцитами (не менее 3 эритроцитов, прикрепившихся к одному лимфоциту). Рекомендуется также пересчет количества розеткообразующих клеток в абсолютных показателях (так как число лимфоцитов в крови при различной патологии, естественно, имеет большие колебания). В норме в периферической крови обнаруживается 50—70% розеткообразующих Т-клеток.

    В последние годы для определения и подсчета Т-лимфоцитов используют моноклональные антитела (ОКТ или других серий) против маркеров Т-лимфоцитов. Реакция состоит из этапов добавления моноклональных антител к взвеси лимфоцитов, антисыворотки против иммуноглобулинов, включающей, например, радиоактивную или флюоресцирующую метку с последую-щен ее регистрацией.

    Реакция стимуляции Т-лимфоцитов митогенами. Установлено, что ряд митогенов, в первую очередь таких как фитогемагглютинин (ФГА) и конканавалин А (кон А), вызывают бласттрансформацию и митозы Т-лимфоцитов [Ling М., 1975]. Для постановки этого теста (с ФГА) лейкоциты или лимфоциты выделяют описанным выше способом и затем культивируют в присутствии митогена в течение 72 ч. По окончании культивирования готовят мазки, которые окрашивают азур-эозином или другим методом и подсчитывают (в процентах) число бласт-клеток (молодых клеточных форм) и (или) митозы. В норме в культурах с ФГА обнаруживается 60—95% бласт-клеток.

    Другим способом оценки активации лимфоцитов под действием митогенов является подсчет включения Н3-тимидина (или других меченых предшественников нуклеиновых кислот или аминокислот) в ДНК. Для этого Н3-тимидин добавляют в культуру лимфоцитов за 2—12 ч до конца культивирования. После окончания инкубации клеточную массу отмывают, лизируют NaOH, гиамином или растворителем NCS (для выхода включенной радиоактивности в жидкость), помещают в сцинтилля-ционную жидкость и подсчитывают число импульсов в опыте (культура с ФГА) и в контроле (без ФГА) в жидкостном сцинтилляционном счетчике (например, отечественный счетчик СБС, БЕТА-2).

    Определение субпопуляций Т-лимфоцитов производят различными способами. Существуют способы определения субпопуляций Т-лимфоцитов по степени связывания с бараньими эритроцитами: активное, авидное, стабильное, аффинное розеткообразование, гигантские розетки и т. д., по чувствительности к теофиллину и др. Наиболее признанным и распространенным методом определения регуляторных субпопуляций лимфоцитов является подсчет количества Т-хелперов/ индукторов и Т-супрессоров/цитотоксических лимфоцитов по наличию на их поверхности рецепторов для Fc-фрагментов иммуноглобулинов IgM и IgG соответственно (Тμ и Тγ-лимфоциты).

    Для постановки данного теста используют эритроциты быка, покрытые кроличьими антителами (против них) классов IgM (для определения Т-хелперов) и IgG (для определения Т-супрессоров). Реакция состоит из нескольких этапов. Вначале выделяют лимфоциты на градиенте фикол/верографин, освобождаются от макрофагоподобных примесей инкубацией клеток на пластиковых чашках Петри. Неприлипшие лимфоциты смешивают с бараньими эритроцитами, обработанными нейроами-нидазой, после инкубации вновь отделяют на новом градиенте Т-лимфоциты, образовавшие розетки с эритроцитами (в осадке при центрифугировании), от В-лимфоцитов (в интерфазе) — этот этап можно повторить для лучшей очистки. Розетки разделяют хлоридом аммония или дистиллированной водой и освобожденные Т-лимфоциты используют в реакции розеткообра-зования с эритроцитами быка с IgG-антителами для определения Тглимфоцитов (супрессоров) и после 12-часовой инкубации в термостате в культуральной среде, содержащей 15—20% телячьей эмбриональной сыворотки и некоторых добавок, для восстановления IgM-рецепторов используют в реакции розетко-образования с эритроцитами быка, покрытыми IgM-антителами, для определения Тμ-лимфоцитов (хелперов).

    Для функциональной оценки субпопуляций Т-хелперов и Т-супрессоров можно разделить эти клетки (после постановки реакций розеткообразования) центрифугированием в том же градиенте фикол/верографин, как это описано выше при выделении чистой взвеси Т-лимфоцитов.

    К настоящему времени получены моноклональные антитела (например, ОКТ4 и ОКТ8 или других серий) для определения Т-хелперов или Т-супрессоров, принципы которого описаны выше.

    Определение супрессорной активности лимфоцитов (мононуклеаров). Супрессивная активность мононуклеаров может быть определена при активации кон А, используемого в относительно высокой концентрации или в так называемом спонтанном варианте. В первом случае испытывают действие на реакцию стимуляции тест-лимфоцитов в культуре с ФГА выделенных из крови больного лимфоцитов (описанным выше способом в градиенте фикол/верографин) и инкубированных в течение 24 ч в культуральной среде в присутствии кон А, а затем остановленных в пролиферативной реакции митомицином С. Во втором случае испытывают действие свежевыделенных лимфоцитов больного, обработанных митомицином С, предварительно не инкубированных.

    Тест-лимфоцитами могут служить аутолимфоциты свеже-выделенные из крови исследуемого, либо лимфоциты’донора Их смешивают в равных количествах с лимфоцитами супрессивное действие которых испытывается, и определяют их активность в стимуляции бласттрансформации или синтеза ДНК в стандартной реакции с ФГА. Контролями служат: 1) реакция тест-лимфоцитов в чистой популяции в присутствии с ФГА. 2) то же без ФГА; 3) тест-лимфоциты с ФГА + лимфоциты больного, инкубированные в культуральной среде тот же период времени, но в отсутствие кон. А. Этот этап инкубации занимает соответственно 72 ч. О величине активированного или спонтанного супрессивного действия судят по степени снижения (подавления) реакции стимуляции тест-лимфоцитов в культуре с ФГА. Показателем супрессии служит индекс, вычисляемый разными способами.

    Для оценки специфического клеточного противотуберкулезного иммунитета чаще используют реакцию стимуляции лимфоцитов туберкулином (PPD) и реакцию торможения миграции леикоцитов с тем же антигеном.

    Реакция стимуляции лимфоцитов с PPD служит для определения степени сенсибилизации к микобактериальным антигенам реакция обусловлена взаимодействием Т-клеток с PPD). Методика постановки реакции при морфологическом учете бласттрансформации или при оценке степени синтеза ДНК не отличается от методики реакции с ФГА (срок культивирования 96 ч, доза PPD варьирует от 10 до 200 мкг). У здоровых людей с отрицательной пробой показатели реакции обычно не превышают 1% (при морфологическом учете).

    Реакция торможения миграции с PPD служит для тех же целей, что реакция бласттрансформации. Для ее постановки лейкоциты получают, центрифугируя плазму, выделенную из крови одним из описанных выше методов (см. постановку реакции бласттрансформации с ФГА). Осадок лейкоцитов набирают в стеклянные капилляры диаметром 1 мм, центрифугируют в них и помещают в культуральные камеры, содержащие питательную среду (контроль) и PPD (опыт). Результат реакции оценивают через 24 ч по соотношению площадей, занимаемых мигрирующими клетками в опыте и в контроле. PPD применяют в концентрации 100—200 мкг/мл. У здоровых людей индексы реакции обычно варьируют от 0,8 до 1,2 (в зависимости от дозы антигена и наличия сенсибилизации клеток). Применяют также иные варианты метода, например миграцию лейкоцитов в агарозе.

    Тесты оценки количества и реактивности В-клеток. Комплементарные розетки. Установлено, что в присутствии комплекса эритроциты — антисыворотка и комплемент розетки с эритроцитами (например, человека) образуют В-лимфоциты. Для постановки данного теста лимфоциты выделяют теми же способами, которые описаны выше. Затем тест-эритроциты человека [лучше группы 0(1)] инкубируют с антиэритроцитной сывороткой (получаемой от кроликов, иммунизированных эритроцитами человека). Следующим этапом служит инкубация эритроцитов, нагруженных антиэритроцит-ными антителами, с комплементом (источник комплемента — донорская человеческая сыворотка), после этого готовят систему эритроциты — антитела к ним и комплемент, соединяют с исследуемыми лимфоцитами, фиксируют их глутаровым альдегидом, делают мазки.

    Последний этап — окраска и подсчет розеткообразующих лимфоцитов — тот же, что и при определении Т-розеток. В норме в периферической крови обнаруживают 10—20% комплементарных розеток.

    Существуют и другие способы определения и подсчета В-лимфоцитов, основанные на выявлении поверхностных маркеров этих клеток, например, по наличию иммуноглобулиновых рецепторов с использованием системы эритроциты + антитела в методе розеткообразования. В-лимфоциты также могут образовывать розетки с эритроцитами мышей; в норме обнаруживается примерно 15—20% таких В-лимфоцитов. В последние годы появилась возможность определять количество В-клеток с помощью моноклональных антител, полученных против их маркеров, аналогично определению других популяций и субпопуляций иммунокомпетентных клеток.

    Определение иммуноглобулинов сыворотки крови методом иммунодиффузии. Содержание иммуноглобулинов в периферической крови отражает функцию В-клеток, поскольку иммуноглобулины являются продуктами клеток этой популяции. Для постановки данного теста исследуемые сыворотки помещают в лунки в агаровом геле, содержащем антииммуноглобулиновые сыворотки (анти-IgG, -IgM, -IgA). Результат реакции оценивают, измеряя диаметр колец преципитации, после чего вычерчивают график зависимости квадратов радиусов колец преципитации от концентрации исследуемого иммуноглобулина в стандартной сыворотке. Вычислив квадрат радиуса кольца преципитации исследуемой сыворотки и антисыворотки и отложив это значение на графике, можно узнать количество иммуноглобулина в каждой исследуемой сыворотке. Необходимо помнить, что нормальное количество иммуноглобулинов различных классов у здоровых людей варьирует в зависимости от возраста.

    Реакция стимуляции В-лимфоцитов липополисахаридом. Известно, что существует ряд митогенов, которые вызывают трансформацию В-клеток (например, липо-полисахарид Е. coli и др.). Для постановки этого теста лейкоциты и лимфоциты получают описанным выше способом, затем их инкубируют в течение 72—96 ч с ЛИС и готовят мазки, в которых подсчитывают число бласт-клеток. Можно также учитывать активность В-лимфоцитов по степени включения Н3-тими-дина, как это описано для постановки РБТ с ФГА.

    Специфический гуморальный иммунитет можно оценить по количеству антител к антигенам микобактерий, выявляемых в сыворотке больных с помощью различных сывороточных тестов.

    Реакция агрегатгемагглютинации. Данная реакция является высокочувствительным вариантом пассивной (непрямой) гемагглютинации. Для ее постановки эритроциты обрабатывают глутаровым альдегидом, затем нагружают туберкулином (ППД) (в модификации реакции гемагглютинации Миддлбрука — Дюбо туберкулином нагружают нативные, а в модификации Бойдена — обработанные танином эритроциты) ; затем эритроциты соединяют с сывороткой, в которой выявляют противотуберкулиновые антитела. Диагностическим титром, по данным разных авторов, считается уровень 1:8—1:16.

    Реакция потребления комплемента (РПК) является модификацией реакции связывания комплемента; в отличие от последней в ней используют комплемент, имеющийся в собственной сыворотке, в связи с чем сыворотки не подвергают температурной инактивации. Это выгодно отличает данную реакцию от ее прототипа, поскольку температурная обработка нередко снижает титр антител.

    РПК ставят в два этапа, первый из которых состоит из взаимодействия антител, имеющихся в сыворотке больного, антигена (например, туберкулина) и присоединения к комплексу антиген — антитело комплемента, содержащегося в исследуемой сыворотке. Второй этап включает в себя добавление гемолитической системы (бараньи эритроциты+антисыворотка против бараньих эритроцитов), с помощью которой регистрируют степень потребления комплемента при первом этапе реакции. Следовательно, чем выше титр специфических антител, тем больше связалось комплемента комплексом антиген — антитело, меньше его осталось в сывортке и тем в меньшей степени произошел гемолиз бараньих эритроцитов, а следовательно, слабее окраска надосадочной жидкости (интенсивность окраски регистрируется на ФЭК). Титр антител выражают в условных единицах (экстинкциях), соответствующих показаниям прибора (ФЭК); он равен разнице интенсивности окраски в контроле (где к сыворотке добавлен вместо антигена изотонический раствор натрия хлора и, следовательно, отмечается наиболее полный гемолиз) и в опыте. Диагностическим титром считается показатель 0,07.

    Определение иммунных розеткообразую-щих лимфоцитов. Эта методика служит для количественного подсчета числа специфически сенсибилизированных к антигенам микобактерий В-лимфоцитов. Лимфоциты для постановки данного теста выделяют обычным способом. Эритроциты человека [лучше группы 0(1)] обрабатывают танином и PPD. Как и в описанных выше других модификациях теста розетко-образования, эритроциты соединяют с лимфоцитами и подсчитывают число розеток в окрашенных препаратах. У здоровых людей обнаруживается 1—3% таких розеток.

    Туберкулинпровокационные тесты. Информативность различных иммунологических методов в значительной степени повышается, если постановку тестов специфического гуморального (например, РАГА) и (или) клеточного иммунитета (например, РБТ и РТМ) сочетать с подкожным введением туберкулина (провокацией). Иммунологические реакции ставят до и после (через 48 ч) подкожного введения туберкулина (в среднем 20 ТЕ детям и 50—100 ТЕ взрослым).

    А. Е. Рабухин с соавт. (1980), С. М. Лобанова (1982) сообщили об успешном применении иммуноглобулино-туберкулино-вой пробы, заключающейся в определении количества иммуноглобулинов G, А, М до подкожной провокации туберкулином, через 48 ч после нее и повторно через 7 дней. Известно также использование определения иммунных розеткообразующих лимфоцитов в сочетании с подкожной провокацией туберкулином.

    Применение иммунологических методов для решения клинических задач диагностики туберкулеза. Интерпретация результатов иммунологического обследования больных туберкулезом приносит наибольшую пользу, если она осуществляется в сопоставлении с клинической характеристикой; именно в этом случае подобное обследование приобретает особую ценность, позволяет производить дифференциальную диагностику, судить о степени активности заболевания, прогнозировать его течение, а при динамическом наблюдении — контролировать эффективность проводимого лечения. Это — наиболее важные клинические задачи, при решении которых определение состояния иммунитета, особенно специфического, может принести существенную пользу.

    При активном туберкулезе показатели специфических имму-.логических тестов обычно бывают положительными.

    Важно подчеркнуть, что показатели иммунологических тестов могут сильно варьировать в различные фазы течения активного туберкулеза. Одни из тестов более выражены при вспышке туберкулеза, другие — при рассасывании инфильтративных поражений. Их показатели зависят от степени активности, направленности динамики поражений в сторону прогресси-рования или инволюции, от темпов такой динамики. Так, результаты, полученные при использовании реакций бласттранс-формации и торможения миграции с PPD, показали, что первая наиболее выражена при благоприятном течении процесса с быстрым рассасыванием специфических поражений (показатели более 10% бласт-клеток), а вторая — при прогрессировании процесса (индексы ниже 0,4—0,5), и наоборот. Наиболее высокие титры противотуберкулезных антител (1:256—1:1024) встречаются при выраженной активности процесса и начавшейся положительной динамике. В эти же сроки можно отметить и самый высокий процент обнаружения иммунных розеткообразующих лимфоцитов (5—10%). Следовательно, показатели иммунологических тестов должны служить при этом как бы исходным материалом для решения клинических задач с учетом кли-нико-рентгенологических данных. Естественно, что наиболее достоверные суждения о состоянии и изменении специфической реактивности дают повторные иммунологические исследования. Показатели тестов оценки потенциальной активности Т-лимфоцитов чаще мало отличаются от таковых у здоровых людей, однако при обострении заболевания как уровень бластообразования к ФГА, так и число Т-розетко-образующих лимфоцитов оказывались сниженными (45—60 и 35—50% соответственно).

    В активной фазе туберкулеза несколько повышенными были также уровень содержания В-розеткообразующих лимфоцитов (15—25%) и число некоторых классов иммуноглобулинов (чаще IgA и IgG). Наибольшие трудности возникают при установлении минимальной (скрытой) активности туберкулеза, которая имеет место, например, при первичном выявлении ограниченных изменений в легких либо на поздних этапах химиотерапии или у диспансерного контингента лиц при переводе в группы учета с неактивным туберкулезом либо снятии с учета, появлении симптомов интоксикации неясного генеза.

    Выявление скрытой активности. Необходимо отметить, что при наличии минимальной активности туберкулеза показатели иммунитета в основном нормализуются и приближаются по своим значениям к таким, которые характерны для лиц с неактивными изменениями или для здоровых людей. В этот период течения туберкулеза обычно не отмечается нарушений общих механизмов клеточного и гуморального иммунитета по количественным и функциональным характеристикам, показатели специфических тестов могут быть незначительно более выраженными (РБТ и уровень противотуберкулезных, антител) по сравнению с неактивным туберкулезом или отрицательными (РТМ). Однако эти изменения становятся заметными в основном при выведении средних арифметических значений в группах больных с наличием минимальной активности и с реактивным туберкулезом. В каждом конкретном случае стандартное и однократное иммунологическое обследование, как правило, не помогает выявлению такой активности.

    Между тем эта важная и вполне конкретная клиническая задача требует вполне определенного решения, поскольку почти во всех случаях подозрения на наличие минимальной активности обычно предпринимают пробное лечение химиопрепарата-ми в течение 1 1/2—6 мес и тщательное клинико-рентгенологическое обследование в динамике. Только после этого окончательно решают вопрос об активности процесса.

    Однако так называемые туберкулино-провокационные иммунологические тесты дают возможность установить минимальную активность в более короткие сроки. Обычно для этих целей применяют специфические клеточные иммунологические реакции в сочетании с подкожным введением туберкулина. Изменение через 48 ч после введения туберкулина показателей РБТ с PPD в сторону снижения не менее чем на 20% от первоначального уровня и уменьшение индекса РТС с PPD не менее чем на 0,1 и ниже 0,8 свидетельствуют о такой активности.

    В комплексе с указанными иммунологическими тестами в сочетании с подкожной туберкулиновой провокацией могут быть использованы сведения об изменении показателей и других специфических реакций, например, таких как РПГА или определение «иммунных» (к ППД) розеткообразующих лимфоцитов. Есть сообщения о применении иммуноглобулино-тубер-кулинопровокационного теста для диагностики активности туберкулеза легких, в котором учитывают изменения уровня иммуноглобулинов, особенно IgA и IgG, через 2 сут после провокации и через 1 нед. Постепенное нарастание их количества говорит об отсутствии активности заболевания, а резкое повышение (через 48 ч) с последующим снижением (через 7 дней) характерно для наличия активности процесса.

    Оценка эффективности лечения. Пользуясь исходными параметрами, характерными для различных фаз течения туберкулеза и степени его активности, и особенно определяя различные показатели иммунитета в динамике, можно судить об эффективности применяемого лечения, поскольку в его процессе происходит закономерная смена этих фаз. При положительной динамике процесса показатели специфического бла-стообразования закономерно увеличиваются, уровень реакции торможения миграции снижается, а уровень противотуберкулезных антител в большинстве случаев повышается в ближайшие сроки от начала химиотерапии, а в последующем имеет тенденцию к снижению.

    Определение иммунологического статуса больных туберкулезом перед лечением может способствовать оценке течения туберкулеза в процессе лечения. Обычно нарушения параметров иммунитета, особенно специфического, находятся в соответствии с протяженностью инфильтрации, распространенностью поражений, массивностью бактериовыделения. При этом чем менее выражены нарушения в системе клеточного иммунитета, чем выше показатели специфического бластообразования и индексы реакции торможения миграции лейкоцитов при невысоком специфическом антителообразовании, тем благоприятнее протекает заболевание, быстрее по срокам наступает прекращение бактериовыделения, рассасывание инфильтрации, закрытие полостей распада.

    При успешной химиотерапии нарушения характеристик различных систем иммунокомпетентных клеток, как правило, быстро ликвидируются, а показатели специфических иммунологических тестов претерпевают описанные выше изменения соответствующие благоприятному течению туберкулеза. Наблюдение в динамике позволяет контролировать эффективность лечения быстрое и эффективное восстановление показателей иммунитета совпадает по срокам с быстро наступающей положительной динамикои (а иногда и предшествует ей). Сохранение нарушении иммунитета, как правило, наблюдается при торпидном затяжном характере течения туберкулеза и неэффективной химиотерапии. Так, если в процессе лечения не восстаналиваются до нормы количество и функциональная активность Т-лимфоцитов, то среди этой группы больных возможны обострения заболевания. Стойкое сохранение подобных дефектов после окончания основного курса лечения должно настораживать клинициста в отношении появления рецидивов.

    Целый ряд опубликованных данных указывает на то, что иммунологическое обследование больных туберкулезом является необходимым при использовании различных патогенетических способов лечения. Имеются сведения о том, что исходный иммунологический фон может иметь значение при прогнозировании возможных осложнений после оперативных вмешательств по поводу туберкулеза. И, наконец, безусловно необходимо иммунологическое обследование .для определения показаний к назначению различных иммуно-модуляторов, например, левамизола, диуцифона, тималина, так-тивина и др. в комплексном лечении туберкулеза легких, а также в процессе этого лечения с целью контроля эффективности подобной терапии.

    источник