Если у человека появляются симптомы такого опасного и трудноизлечимого заболевания, как туберкулез, необходимо срочно обратиться в диспансер для проведения диагностических исследований организма. Не менее важно регулярно обследоваться в тубдиспансере тем людям, которые контактировали или постоянно ухаживают за больным с открытой формой туберкулеза. Кроме того, после посещения страны, где уровень заболеваемости и заражением микобактериями очень высок, следует сразу же сдать соответствующие анализы на выявление возбудителя в организме.
В настоящее время диагностировать туберкулез легких или других органов можно различными способами. Но самый первый тест – это туберкулиновая проба Манту, которая за пару дней позволяет определить, инфицирован ли человек микобактериями или нет. Также с недавних пор начали использовать другие виды тестирования: Диаскинтест и Квантифероновое исследование в Инвитро. Рассмотрим, как они проводятся и в чем их преимущества перед пробой Манту.
В отличие от туберкулиновой пробы, которая реагирует на прививку БЦЖ и живую инфекцию микобактерий, вещество Диаскин показывает исключительное заражение, а не аллергическую реакцию на проведенную вакцинацию. Поэтому Диаскинтест необходимо проводить в тех случаях, когда после Манту нужно отделить поствакцинальную аллергию от наличия истинного возбудителя туберкулеза.
Диаскин является новым аллергендиагностическим препаратом, который улучшает качество исследования организма туберкулезной инфекции. В средстве содержатся антитела, которые присутствуют в болезнетворных штаммах микобактерий, но отсутствуют в вакцине БЦЖ. Благодаря этому аллергическая реакция Диаскинтеста возникает только при наличии истинной инфекции. Но в препарате не содержится возбудителей туберкулеза, поэтому заразится заболеванием после аллергопробы невозможно.
Если сравнивать пробу Манту и Диаскинтест, то в первом случае выявить микобактерии получается лишь в 50-70% случаев. А вторая аллергопроба более точная, так как находит возбудителя туберкулеза в 90%. Нельзя сказать, что препарат Диаскин заменит туберкулиновую пробу, поскольку с его помощью невозможно определить, необходима ли пациенту ревакцинация БЦЖ или нет.
Диаскинтест назначают в следующих ситуациях:
- Когда нужно диагностировать туберкулез и выявить уровень активности воспалительного процесса;
- Отличить заражение микобактериями от симптомов других заболеваний, с похожими проявлениями;
- Дифференцировать аллергическую реакцию на БЦЖ от воспаления на истинного возбудителя;
- Наблюдать за процессом лечения и его эффективностью.
Диаскинтест на туберкулез обязательно проводится в тех случаях, когда у детей или взрослых пациентов присутствует вираж пробы Манту. Но он противопоказан пациентам с такими заболеваниями:
- Острые воспаления или обострения хронических болезней (исключением являются симптомы, которые похожи на развитие туберкулеза);
- Соматические расстройства;
- Кожные заболевания;
- Аллергия;
- Эпилептические припадки.
После того как острые воспалительные процессы проходят, тогда Диаскинтест проводить не противопоказано.
Вводят Диаскин таким же образом, как и пробу Манту. Но оба теста не совмещают в один период. То есть, если туберкулиновую реакцию проводят по календарю, то Диаскинтест переносят на следующий месяц после прививки. Когда Манту вводят в одно предплечье, для инъекции Диаскина обязательно используют другое.
Результат Диаскинтеста оценивают через три сутки. Если на месте введения препарата отсутствует покраснение и инфильтрат, то тест отрицательный. Как только на коже образуется папула любого размера и присутствует гиперемия, проба положительная. Реакция на Диаскинтест будет отсутствовать у здоровых пациентов, вылечившихся от туберкулеза и инфицированных неактивной микобактерией.
Диаскинтест является хорошей туберкулезной пробой, но один он не может быть полностью информативным. С его помощью удается выделить большую часть больных с легочной формой заболевания человечьей палочкой Коха. Но при других видах микобактерий проба не сможет выявить возбудителя туберкулеза.
Важно отметить, что сила реакции организма на Диаскин не может говорить о выраженности или уровне активности палочки, поскольку кожная аллергия больше отмечает ответ иммунной системы на введенные антитела.
Кроме того, Диаскинтест обычно не диагностирует вторичное инфицирование туберкулеза, которое, как правило, вызвано бычьим штаммом микобактерий. Поэтому даже при резкой реакции пробы Манту ребенка или взрослого человека уже направляют на лечение от туберкулеза, даже если у него отсутствует кашель. Хоть в этом случае Диаскинтест может быть отрицательным, первая туберкулиновая реакция требует особого внимания.
В настоящее время выделяют три клинических формы туберкулеза:
В зависимости от вида поражения каждый тест будет реагировать по-своему.
При введении инъекции Манту все три формы туберкулеза вызовут положительную реакцию организма пациента. Если проводить Диаскинтест, то при легочном заболевании он обычно положительный, а при двух других формах – отрицателен. Из этого можно сделать вывод, что Манту укажет на микобактерии, поражающие любые органы человека, даже если они находятся в неактивном состоянии. А Диаскин выявит истинную человеческую палочку туберкулеза среди больных легочными формами. Диаскинтест не заменяет пробу Манту, он может стать лишь ее дополнением.
За последние годы очень часто вместе с пробой Манту рекомендовано использовать тест для выявления больных, зараженных туберкулезной инфекцией разных видов. Квантифероновый тест проводится вне организма, поэтому является полностью безопасным для людей с ослабленным иммунитетом.
Анализ крови определяет наличие гамма-интерферона, который продуцируется только у заболевших туберкулезом. Чтобы провести исследование, у пациента берут венозную кровь. Перед сдачей анализов человек не должен принимать пищу в течение восьми часов. Забранный образец помещают в три пробирки, чтобы исключить ложные результаты исследования.
Если сравнивать Квантифероновый тест с Манту или Диаскинтестом, то он более чувствителен и помогает точно выявить наличие туберкулезной инфекции. Но при этом, он также не реагирует на вакцину БЦЖ и дает отрицательный результат.
К преимуществам определения гамма-интерферонов относят:
- Высокую чувствительность теста;
- Безопасность, отсутствие побочных действий;
- Не реагирование на БЦЖ;
- Нет противопоказаний;
- Объективность оценки результатов теста.
К недостаткам Квантиферонового исследования можно отнести то, что оно не позволяет определить, есть ли в организме человека латентная форма туберкулеза или активное воспаление.
Важно отметить, что тест в Инвитро дает возможность заменить туберкулинодиагностику. Но в настоящее время точность Квантиферонового результата доказана лишь в лабораторных исследованиях, но не проверена на практике.
Инвитро определяются гамма-интерфероны, которые вырабатываются в организме Т-лимфоцитами лишь после встречи с туберкулезным возбудителем. Специфические белки выделяются при контакте, как с человеческим видом микобактерий, так и с бычьим. После того как иммунные клетки распознают туберкулезную палочку, они вырабатывают антитела, определяющиеся при исследовании венозной крови. Таким образом, Квантифероновый тест выявляет даже микобактериозы. Поэтому при положительном результате диагностики следует отличить наличие возбудителя туберкулеза от микобактериозов.
Проведенные обследования разных пациентов дали понять, что третья часть всего населения инфицирована микобактериями. Но только у 6% людей может развиться туберкулез. Чаще всего его провоцируют внешние неблагоприятные факторы или ослабленный иммунитет.
В группу риска входят люди:
- Контактирующие с пациентами с открытой формой туберкулеза (родственники, медработники);
- ВИЧ-инфицированные;
- Болеющие диабетом;
- Освобожденные из исправительных колоний.
Квантифероновый тест в Инвитро рекомендован тем лицам, которым противопоказано делать Манту или Диаскинтест. Например, если у человека отмечаются острые или рецидивирующие заболевания, то вводить туберкулиновое вещество категорически запрещено. Также в период карантина детям не делают кожные пробы. У некоторых людей есть аллергия на туберкулин, поэтому им не подходит данный вид исследования на инфицирование туберкулезом.
Чтобы сравнить преимущества Квантиферонового теста с пробой Манту или Диаскинтестом, необходимо ознакомиться с некоторыми особенностями диагностики.
| Квантифероновый тест | Манту, Диаскинтест |
| Для исследования не нужно вводить инъекцию под кожу, потому что используется венозная кровь пациента. | Проба требует подкожной инъекции, поэтому не разрешена при ослабленном иммунитете человека. |
| Не отмечается побочных реакций, так как нет контакта с организмом. | Бывают негативные воздействия, особенно, если у больного наблюдается непереносимость введенного вещества. |
| Не бывает противопоказаний, поскольку тест проводится в Инвитро. | При обострениях заболеваний или тяжелых хронических патологиях производить исследования туберкулиновой пробой запрещено. |
| Нет реакции на вакцинацию БЦЖ. | У Манту аллергическая реакция возникает не только на инфекцию, но и на антитела после прививок БЦЖ. У Диаскинтеста ложноположительных ответов на поствакцинацию не бывает. |
источник
T-SPOT.TB – иммунодиагностика туберкулезной инфекции, тест высвобождения гамма-интерферона (T-SPOT.TB – Interferon-Gamma Release Assays, IGRA)
Исследование крови, допустимое в качестве альтернативы кожному тесту (проба Манту) для выявления туберкулезной инфекции.
Туберкулез – инфекционное хроническое заболевание, вызываемое микобактериями туберкулеза (Mycobacterium tuberculosis complex). Варианты развития ситуации после проникновения возбудителя туберкулеза в организм человека следующие:
- полная элиминация (удаление) микобактерий туберкулеза из организма;
- развитие первичного туберкулеза (при быстром росте и размножении бактерий);
- «латентная инфекция» (микобактерии персистируют в организме в неактивном состоянии, обуславливая стойкий иммунный ответ на антигены возбудителя при отсутствии клинических проявлений активной формы заболевания). Это состояние у многих инфицированных может сохраняться на протяжении всей жизни. Такие лица не распространяют инфекцию, но у части пациентов латентная инфекция в течение жизни может перейти в клинически манифестированное заболевание. Риск прогрессии латентной инфекции в активное заболевание увеличивается при ослаблении иммунной системы.
Активная туберкулезная инфекция диагностируется по комплексу клинических симптомов, медицинской истории пациента, данным рентгенологических исследований и результатам прямых методов лабораторного выявления Mycobacterium tuberculosis в мокроте или мазках (микробиологические культуральные методы, выявление ДНК возбудителя с применением ПЦР).
Диагностика латентной инфекции затруднена отсутствием клинических и рентгенологических признаков заболевания, а также отсутствием возбудителя в пробах доступного биоматериала. Однако ее выявление важно для определения лиц, нуждающихся в контроле и превентивной терапии.
В настоящее время существуют два подхода к выявлению вероятной латентной инфекции:
- in vivo: внутрикожные тесты с очищенным или рекомбинантным туберкулезным аллергеном (проба Манту, Диаскинтест);
- in vitro: оценка ответа иммунных клеток обследуемого на антигены микобактерий туберкулеза по высвобождению гамма-интерферона (IGRA-тесты).
Оба подхода основаны на оценке характера иммунной реакции человека на антигены возбудителя, т. е. не являются методами прямого выявления инфекционного агента.
В связи с достаточно высокой распространенностью туберкулеза в нашей стране, Министерство здравоохранения РФ рекомендует ежегодно проводить скрининговое обследование детей в возрасте от 1-го года до 17-ти лет на наличие туберкулезной инфекции (в том числе при поступлении в детские сады и школы). Профилактическое скрининговое обследование обычно проводят с использованием внутрикожных проб. При наличии определенных противопоказаний или информированном отказе родителей от применения внутрикожных проб ребенку допускается назначение альтернативных методов обследования. Они включают исследование крови, основанное на выявлении высвобождения гамма-интерферона специфически сенсибилизированными лимфоцитами. На данный момент имеются два коммерческих диагностических теста этого направления: 1) QuantiFERON®-TB Gold; и 2) T-SPOT.TB (зарегистрирован в России).
Тест T-SPOT.TB допускается к использованию клиническими рекомендациями МЗ РФ и Российского общества фтизиатров по выявлению и диагностике туберкулеза у детей (2017). В соответствии с рекомендациями, при проведении скринингового обследования детей отрицательный результат T-SPOT.TB при отсутствии клинических симптомов заболевания (респираторного и интоксикационного характера, других локальных патологических проявлений) позволяет врачу-фтизиатру выдать справку об отсутствии у ребенка в настоящий момент активного туберкулеза.
К достоинствам этого метода можно отнести то, что подбор специфических антигенов исключает ложноположительные реакции, связанные с предшествующей вакцинацией БЦЖ (такие антигены отсутствуют на линиях Bacillus Calmette-Guerin, BCG) и перекрестными реакциями с большинством нетуберкулезных микобактерий окружающей среды (за исключением M. kansasii, M. szulgai и M. marinum). Напротив, лица, инфицированные микобактериями туберкулезного комплекса (M. tuberculosis, M. bovis, M. africanum, M. microti, M. canetti) обычно имеют в крови Т-клетки, распознающие эти и другие антигены таких бактерий.
T-SPOT.TB тест не позволяет различать латентную инфекцию и активное заболевание.
Следует учитывать, что чувствительность и специфичность подобных методов в целях скрининга туберкулезной инфекции не достигают 100%. Поэтому такие тесты следует применять с учетом общей оценки индивидуального риска в комплексе со стандартными методами диагностики.
Материал для исследования: цельная кровь (с литий гепарином) – 2 пробирки, 4 мл.
источник
КВАНТИФЕРОНОВЫЙ ТЕСТ (QuantiFERON®-ТВ Gold) – современный лабораторный тест для выявления туберкулезной инфекции, альтернатива классическому кожному тесту с туберкулином. В настоящий момент в различных странах разработано и выпущено большое число национальных рекомендаций по применению данного теста.
Квантифероновый тест основан на определении INF-γ (гамма-интерферона), высвобождаемого сенсибилизированными Т-клетками, стимулированными in vitro специфическими протеинами (ESAT-6, CFP-10, TB7.7 (p4)) микобактерий туберкулеза, входящих в комплекс Mycobacterium tuberculosis complex (M. tuberculosis, M. bovis, M. canettii, M. caprae, M. pinnipedii, M. mungi, M. microti, M. africanum и др.). Эти протеины отсутствуют в вакцинных штаммах M. bovis BCG и в большинстве нетуберкулезных микобактерий, за исключением M. kansasii, M. szulagai, M. marinum.
В исследуемой крови пациента (из пробирки с ТВ-антигеном) определяется содержание INFγ, результат анализируется в совокупности с данными, полученными из 2-х других пробирок (выполняющих роль контрольных).
Примерно 1/3 часть населения мира инфицирована МБТ, и только у 5-10% инфицированных лиц развивается заболевание. При наличии неблагоприятных факторов латентная туберкулезаня инфекция (ЛТИ – состояние, когда микобактерии туберкулеза (МБТ) присутствуют в организме человека, но при этом отсутствуют клинические и рентгенологические признаки туберкулеза) может перейти в активную форму с развитием внелегочного туберкулеза (например, туберкулез почек).
К группе высокого риска инфицирования МБТ относятся лица, имевшие контакт с больным туберкулезом, или имеющие высокую вероятность контакта (работники противотуберкулезных диспансеров, приютов, исправительных учреждений и др.), а также лица с сопутствующими заболеваниями (ВИЧ-инфекцией, сахарным диабетом и др.).
Используемые для диагностики ЛТИ кожные тесты – проба Манту и Диаскинтест®, имеют ряд противопоказаний и ограничений к применению.
Противопоказания к проведению пробы Манту и Диаскинтеста:
- Индивидуальная непереносимость туберкулина;
- Острые и хронические инфекционные заболевания и соматические заболевания в период обострения;
- Кожные заболевания и аллергические состояния в период обострения;
- Период карантина в детских коллективах.
У пациентов с индивидуальной гиперчувствительностью к туберкулину может наблюдаться ложноположительная реакция.
Сравнение тестов для диагностики туберкулезной инфекции
| Параметр | Проба Манту | Диаскинтест® | Квантифероновый тест |
|---|---|---|---|
| Метод исследования | Кожный тест | Кожный тест | Исследование крови |
| Побочные реакции | Возможны | Возможны | Нет |
| Противопоказания | Есть | Есть | Нет |
| Специфичность | Низкая | Высокая | Высокая |
| Ложноположительные результаты после вакцинации БЦЖ | Да | Нет | Нет |
| Зависимость от сроков проведения профилактических прививок | Да (не ранее чем через месяц) | Да (не ранее чем через месяц) | Нет |
| Интерпретация результатов | Субъективна | Субъективна | Объективна |
Преимущества КВАНТИФЕРОНОВОГО ТЕСТА:
- отсутствие противопоказаний и ограничений по времени проведения;
- отсутствие ложноположительных результатов в случае вакцинации БЦЖ;
- безопасность процедуры и отсутствие побочных реакций;
- интерпретация результатов этого теста менее субъективна, чем интерпретация результатов кожных туберкулиновых тестов;
- высокая специфичность (99,1%) и высокая чувствительность (89,0%).
Показания к назначению КВАНТИФЕРОНОВОГО ТЕСТА:
- Выявление ЛТИ в группах высокого риска: работники специализированных противотуберкулезных и других учреждений, где есть высокий риск контакта с возбудителем или больным туберкулезом, пациенты с сопутствующими заболеваниями и др.;
- Наличие известных контактов с больным туберкулезом (бактериовыделителем);
- Наличие положительной реакции пробы Манту для исключения поствакцинальной реакции;
- Наличие противопоказаний к проведению кожных туберкулиновых проб (пробы Манту и Диаскинтеста®);
- Дифференциальная диагностика инфекций, вызванных МБТ;
- Обследование иммигрантов.
Пример результата исследования и интерпретация:
| Параметр | Результат | Критерии оценки результатов |
|---|---|---|
| Содержание гамма-интерферона в контрольной пробирке (NIL) | 0,05 | До 8,00 |
| Содержание гамма-интерферона в пробирке с ТВ-антигеном (ТВ Ag) | 0,09 | Менее 0,35 (или свыше 0,35, но до 25% контрольного значения NIL) |
| Содержание гамма-интерферона в пробирке с митогеном (Mitogen) | 9,56 | От 0,50 |
| Квантифероновый тест (диагностика туберкулеза) | Отрицательный | Отрицательный |
Интерпретация результата исследования
Квантифероновый тест – современный лабораторный метод диагностики туберкулеза. Методика рекомендована национальными ведомствами здравоохранения в качестве альтернативы кожным пробам в странах с низкой заболеваемостью туберкулезом (европейские страны, США, Австралия).
Квантифероновый тест на туберкулез выявляет ту же реакцию иммунных клеток, что и Диаскинтест . Но с двумя отличиями:
Любой диагностический метод имеет два основных критерия:
Квантифероновый тест на туберкулез обладает рядом преимуществ:
Сделать квантифероновый тест на туберкулез в Москве сегодня не проблема. Существуют лаборатории в двух солидных институтах, которые проводят соответствующий анализ:
ООО «Инвитро» имеет офисы в каждом областном центре. Квантифероновый текст в Инвитро не проводится. В их арсенале есть другая известная методика – полимеразная цепная реакция на микобактерию туберкулеза. Однако считается, что в отношении туберкулеза этот анализ не информативен.