Тест на туберкулез ифа пцр

Своевременная диагностика туберкулеза производится с задействованием множества различных способов и методов. Это заболевание вносит изменения во весь организм, и потому для него характерны некоторые отклонения в составе различных материалов для исследования, в том числе и в крови. Анализы на туберкулез, выполняемые по крови, наиболее информативные и эффективные в связи с тем, что помогают установить не только наличие либо отсутствие заболевания, но и выяснить, какой возбудитель его вызвал. В данном материале будет рассказано о том, что такое ИФА на туберкулез и для чего он проводится.

ИФА расшифровывается как иммуноферментный анализ, он проводится по венозной крови. Этот метод лабораторных исследований считается одним из наиболее точных среди применяемых для диагностики туберкулеза. Это универсальное и максимально информативное исследование, которое может применяться при любых заболеваниях, вызываемых конкретными возбудителями, вне зависимости от того, грибки это, бактерии или вирусы. Связано это с принципом, на котором основано исследование.

Известно, что при попадании в организм того или иного возбудителя – грибка, бактерии или вируса – иммунитет расценивает его как чужеродный организм, с которым необходимо бороться. Для этого в организме в течение нескольких дней, а иногда и недель, вырабатываются антитела для борьбы с возбудителем. Естественно, что они поступают и в кровь. Иммуноферментный анализ крови проводится для того, чтобы определить, имеются ли в крови такие специфические иммунные антитела, ведь если имеются они, значит, имеется и возбудитель, для борьбы с которым они возникли.

Как раз на этом свойстве иммунитета и основан принцип действия прививок. Под кожу вводится минимальное количество возбудителя и формируется иммунитет.

Как уже было сказано выше – туберкулез является инфекционным заболеванием, а значит, у него имеется определенный возбудитель. Этот возбудитель ничем не отличается от других аналогичных и при попадании в организм он вызывает ответную реакцию иммунитета. То есть соответствующие специфические антитела начинают активно вырабатываться. Обычно, при заражении большим количеством возбудителя, уже через несколько недель в крови антител концентрируется достаточно для того, чтобы определить их методом ИФА.

Однако, в случае, если пациент контактировал с зараженным разово или заболевание протекает в скрытой неострой форме, заражение произошло небольшим количеством возбудителя, то антитела могут нарабатываться в малом количестве и медленно. В этом случае поставить диагноз методом ИФА может быть сложно. Обычно, дополнительно назначаются и другие исследования в этом случае.

В целом же данный метод информативный и эффективный. К тому же он очень точен при диагностировании отрытых форм туберкулеза.

Отличительной чертой исследования методом ИФА на туберкулез является то, что такой способ вовсе не имеет противопоказаний (на сегодняшний день их не выявлено). В частности, такой анализ можно проводить тем пациентам, у которых есть противопоказания к проведению кожных проб, и реакцию Манту им осуществить нельзя.

Относительным противопоказанием может быть перенесение в период предполагаемой сдачи воспалительного или инфекционного заболевания других органов и систем. Это связано с тем, что наличие в крови большого количества антител другого типа может затруднить диагностику и, потенциально, сделать ее менее точной. Но, в зависимости от метода проведения анализа, иногда удается избежать и этого.

Таким образом, вопрос о противопоказаниях к проведению процедуры должен решаться в индивидуальном порядке с лечащим врачом.

Данный метод имеет множество разнообразных преимуществ. Основные из них таковы:

1. Высокая точность и информативность метода;
2. Возможность проводить его при наличии противопоказаний к другим анализам и способам диагностики;
3. Отсутствие ошибочно положительного результата (хотя ошибочно отрицательный может быть, хотя и крайне редко);
4. Более объективная оценка результатов, чем при осмотре и измерении кожных проб, вроде Манту;
5. Не имеет осложнений, побочных действий;
6. Не имеет противопоказаний – может проводиться после вирусной инфекции или после вакцинации;
7. Никак не связан с аллергическими реакциями, то есть, результат у аллергика и не аллергика будет одинаково точным и эффективным (в отличие от кожных проб).

Время получения результата почти такое же, как при проведении кожных проб, а в некоторых случаях и еще быстрее.

Несмотря на все свои преимущества, анализ ИФА имеет и ряд недостатков. Наиболее значимые из них таковы:

1. Достаточно высокая стоимость исследования и относительная сложность его проведения в лабораторных условиях;
2. Существует возможность получения ложноотрицательного результата, при полной невозможности ложноположительного;
3. Ложноположительный результат возможен лишь в одном случае – когда есть инфицирование другими микотическими бактериями нетуберкулезного характера;
4. Это исследование, из-за своей высокой сложности, проводится не во всех медицинских учреждениях, и даже не во всех городах.

Некоторые недостатки, перечисленные выше, характерны для любого теста для диагностики туберкулеза. В частности, ложноположительный результат при заражении другими микотическими бактериями нетуберкулезного характера, характерен также для пробы Манту и Диаскинтеста.

Перед тем, как сдать кровь на анализ ИФА на туберкулез, пациентку необходимо пройти небольшую подготовку. Четкое следование рекомендациям по подготовке приведет к тому, что результат исследования станет более точным и объективным. Итак, перед исследованием такого типа рекомендуется:

• Не есть в течение 12 часов – тест проводится натощак;
• Не курить перед исследованием так долго, как возможно, и категорически запрещено курить в течение получаса перед сдачей;
• В течение суток накануне теста не желательно пить много воды;
• В некоторых случаях нужно отменить прием некоторых лекарственных препаратов хотя бы за неделю до исследования, но это решается с врачом индивидуально в каждом конкретном случае.

Проводить исследование нужно в утреннее время, лучше до 12 часов.

Как проводится такой тест на туберкулез? Для проведения исследования используется венозная кровь. То есть, она забирается из вены правой или левой руки. В зависимости от методики, которой работает данная лаборатория, может забираться тот или иной объем пробы, в одну пробирку или в несколько. После этого пациент может уходить, а кровь отправляется в лабораторию, где она исследуется под микроскопом. В ходе лабораторного исследования рассматривается, как проба реагирует на внесение возбудителя, а также с помощью микроскопа разыскиваются уже известные антитела к возбудителю.

Что же может показать данный тест? Результатов может быть только два – положительный или отрицательный. Положительный результат означает, что антитела к возбудителю туберкулеза в крови обнаружены были, то есть в организме присутствует возбудитель туберкулеза, человек болен. При отрицательном результате антител в крови обнаружить не удалось, а значит, возбудителя в организме нет, и человек не инфицирован.

В крайне редких случаях может иметь место сомнительный результат, когда антитела единичны, но все же присутствуют. Это может говорить о самом начале и болезни и том, что иммунная система только начала еще вырабатывать антитела. Кроме того, как было написано выше, всегда есть вероятность ложноположительного или ложноотрицательного результаты.

Такое исследование обязательно необходимо проводить в случае, если его назначил врач. Однако оценивать его результат можно только в комплексе с другими методами диагностики. В частности, при прохождении медицинской комиссии перед поступлением ребенка в детский сад или школу, при прохождении исследования для получения медицинской книжки, результаты данного теста не считаются гарантией отсутствия туберкулеза. С медицинско-юридической точки зрения гарантией отсутствия в организме туберкулеза является отрицательная проба Манту и отсутствие изменений на флюорографии пациента.

Исследование достаточно дорогостоящие и цена его может отличаться в зависимости от класса и уровня медицинского учреждения, а также от города и региона в котором оно расположено. Для облегчения ориентации в ценовой политике лабораторий ниже приведена таблица со стоимостью данного исследования в различных городах.

Такая разница в ценах может отличаться также составом оказываемых услуг. Например, в некоторых лабораториях отдельно указывают стоимость процедур забора и исследования пробы крови.

Это довольно информативный, хотя и способный давать ложный результат, метод. Он незаменим тем пациентам, которые имеют противопоказания к проведению стандартных проб. Однако ставить диагноз по одному только результату данного исследования нельзя.

источник

Здравствуйте, очень нужна Ваша помощь
Моя мама 67 лет
ФЛГ
Очагово-инфильтративные образования с2, с6 верхней доли правого оегкого
КТМСКТ грудной клетки выполнена по стандартной программе, толщиной слоя 1 мм, без внутреннего констрастирования.
В С2 с переходом на С6 правого легкого визуализируется образование с четкими неровными бугристыми контурами, размером 66*35*70. В толще образования множественые кистовидные полости. Диффузно по всем полям легочной ткани визуализируются очаги и фокусы (депозиты)
Пневматизация легочной паренхимы удовлетворительная. Легочный рисунок не изменен.
Ход и проходимость трахеи и главных бронхов не нарушены.
Внутригрудные лимфатические узлы не увеличены, немногочисленные, обычной формы и структуры.
Сердце без особенностей. Обчызвествления в стенке аорты, корневых артериях.
Жидкости в плевральной полости не определяется.
Костных дестуктивных и травматических изменений в зоне сканирования не выявлено. Дистрофические изменения грудного отдела позвоночника.
Заключение КТ: КТ картина полостного образования верхней доли правого легкого наиболее характерно для высокодифференцирированной аденокарциомы (БАР)
Депозитарные изменения обоих легких.
19.04.16 Консультация онколога.
Направлена на бронхоскопию
20.04.16 ФБС
Заключение Двусторонний катаральный эндобронхит. Посттуберкулизация рубца бронхов обоих легких.
04.05.16 ФБС
Заключение Двусторонний катаральный эндобронзит.Посттуберкулезные рубцы бронхов обоих легких. Выполнена ЧББЛ.
Цитологическое исследование смывов при ФБС: отдельные клетки бронхиального эпителия.
Микроскопия ФСБ смывов МБТ не выявлены
Посев на специфическую флору смывов: нормальная микрофлора ВДП
Исследование биопата методом РТ ПЦР: ДНКm.tub Complex не обнаружены
Микроскопия биопата МБ не выявлена.
11.05.16 Повторная ЧББЛ
Гистологическое исследование материала : биопатыпредставлены фрагментами ткани легкого с пневмофиброзом, фрагментами стенок бронхов, участком кавернозного некроза, частично окруженнго клетками грануляционной ткани, при окраске по методу Циля-Нильсона МБТ не выявлено.
Заключение: Морфологическая картина туберкулезного воспаления. МБТ-

28.04.16 Анализ мокроты микроскопия люмин-ая на МБТ: МБ не выявлены, методом ПЦР : ДНК m.tub Complex не обнаружены.

Проба манту отриц. Диаскин тест отриц.
Анализ на грибок отриц.

Фтизиатор ставит диагноз кавернозный туберкулез.
Правда очень удивляется, что МБТ -.
Во время обследования предположительный диагноз был :Переферический рак верхней доли правого легкого. T3N0M0 (поставлен онкологом после долгого изучения снимков+ наличие кровохарканья)

Подскажите может ли быть tb при всех отрицательных анализах (проба манту, диаскинтест, мокрота мбт, фбс на мбт)?

Здравствуйте! С 1994 года положительный HBsAg. Сейчас
Все аналиы сданы в лаборатории СИНЭВО
ПЦР HBV
количественный 1,6х10*4 МЕ/мл ( 2,7х10*4 копий ДНК/мл) Нормы данной тест
системы-(Аналитическая чуствительность тест-системы для опредиления HBV в
плазме крови – 50 Ме/мл (85 копий ДНК/мл).
Линейный диапазон: 150 – 1.0х10*8 МЕ/мл (255 — 1.7х10*8 копий ДНК/мл).

B (HBV), HBeAg — 0.079 индекс Меньше 1.0 – негативный результат
Больше или равно 1.0 – позитивный результат

Вирус гепатита B (HBV), HBeAg, антитела сумарние —
0.004 индекс 1.0 — негативный результат
(здесь я понять не могу Почему позитивный меньше 1, ведь их наоборот мало?)

Вирус гепатита B (HBV), HBcorAg, антитела IgM —
0.044 индекс 1.0 — позитивный результат

Вирус гепатита D (HDV), антитела сумарные — не обнаружены

. АЛТ-16, АСТ-16, ГГТ-12,ЛФ-42, белок общ.-69.1, альбумины-48.8, билирубин был
повышен до 33 за счёт непрямого-28.4.После пробы Жильбера общ.-13.6 (пр.-4.1,
непр.-9.5).
УЗИ печени в норме.
И как быть с ПВТ? Гепатолог советует тенохоп. Ещё в анамнезе туберкулез лёгких. ПВТ боюсь. Посоветуйте пожалуйста! Спасибо.
Люда Романюк

источник

Туберкулез уже давно вышел за рамки медицинской и стал настоящей социальной проблемой.

Какой бы ни был социальный статус или материальное состояние человека (ведь зачастую туберкулез ассоциируется именно с нищетой), страховки от этого заболевания ему не даст никто.

Как известно, передается туберкулез воздушно-капельным путем.

Попадая в организм, микробактерии M. Tuberculosis, являющиеся в 92 % случаев возбудителями заболевания у человека, оседают в нижних отделах легких, однако это не означает автоматическое инфицирование и болезнь.

Активно размножатся микробы начинают при сильном ослаблении иммунитета. Именно тогда и начинается развитие этого серьёзного заболевания.

Инфекцией могут быть поражены не только легкие, но и кости, органы мочеполовой, нервной и лимфатической систем, кожа, суставы и даже глаза.

Эффективность лечения этого недуга напрямую зависит от срока, на котором была диагностирована болезнь.

Есть несколько различных методик диагностики туберкулеза, однако мы остановимся только на одной из них – методе иммуноферментного анализа, который более известен, как ИФА.

Иммуноферментный анализ крови на туберкулёз является одним из наиболее распространённых методов диагностики заболевания, протекающего во внелегочной форме.

Именно на последних словах стоит сделать особенное ударение, поскольку довольно часто результаты других обследований на туберкулез являются ложноотрицательными из-за того, что болезнь не локализуется в легких, а поражает другие органы и системы.

Этот анализ на туберкулез помогает выявить следы инфекции в организме, однако его результаты не являются достаточными показаниями для того, чтобы диагностировать у пациента туберкулез в активной форме.

Для полного подтверждения диагноза, кроме ИФА на туберкулез, необходимо пройти другие обследования, такие, как ПЦР или микроскопия бактериальных культур.

ИФА позволяет выявить в крови человека антитела, которые вырабатываются в ответ на инфицирование организма микробактериями M. Tuberculosis.

Антигены для M. Tuberculosis являются специфическими, поэтому вероятность ложного результата в связи с инфицированием организма другими возбудителями практически нулевая.

Одним из главных показаний, по которым врач может направить больного на сдачу иммуноферментного анализа на туберкулез, является присутствие у человека симптомов данного заболевания на фоне отрицательных результатов ПЦР, рентгенологического исследования и микроскопии.

Если на протяжении длительного периода у пациента наблюдается повышение температуры тела, кашель, головные боли, слабость, сильная потеря веса, утомляемость, это может стать тревожным звоночком и поводом пройти дополнительное обследование.

Кроме того, анализ крови на туберкулез необходим в таких случаях:

• При длительном контакте пациента с болеющими туберкулезом людьми, а также пациентам, которые по долгу своей службы обязаны контактировать людьми, входящими в группу риска (лица, употребляющие наркотики или пребывающие в местах лишения свободы, бездомные).
• При безуспешном лечении таких заболеваний мочеполовой системы, как цистит, пиелонефрирт, хронический простатит, воспаление эндометрия (если лечение не дает результатов, это может указывать, что поражена туберкулезом именно мочеполовая система).
• При анемии или лейкоцитозе.
• Для диагностики заболевания у лиц, которые страдают от иммунодефицита (ВИЧ-инфицированные, онкобольные).
• ИФА на туберкулез может быть назначен уже в процессе лечения болезни, чтобы посмотреть на эффективность лечения. Однако в этом случае увеличение антител на фоне приёма лекарственных препаратов считается нормальным явлением.

Направляют на ИФА и детей, которые, в силу неокрепшего иммунитета, более подвержены заболеванию.

Можно сдавать анализ на туберкулез вместо Манту, особенно когда у ребенка имеются аллергические заболевания, способные вызвать ложную реакцию после проведения вышеуказанной пробы.

Также широко известно, что реакция при проведении Манту может оказаться ложной, если у ребенка есть какие-либо хронические заболевания.

В некоторых случаях врач может направить на анализ крови после положительного результата Манту. Тогда анализ используется для подтверждения диагноза.

Одним из главных преимуществ данного вида скрининга для детей является его удобность, ведь даже при заболевании, протекающем в легких, сделать микроскопическое исследование посева мокроты у детей довольно проблематично.

Как и любое другое обследование, анализ крови на туберкулез имеет свои особенности, которые необходимо учитывать при его прохождении.

Прежде всего, отметим, что анализ покажет правильный результат после того, как в организме будет выработано достаточное количество антител.

То есть на ранних сроках заболевания ИФА на туберкулез может быть ложноотрицательным, и при сохранении симптомов, указывающих на туберкулез, его необходимо повторить через 2-7 недель, когда в крови будет выработано достаточно антител.

Вместе с тем, возможность того, что анализ оказался ложноположительным, исключена из-за отсутствия взаимовлияния с другими видами микробактерий.

ИФА на туберкулез используется как дополнительное обследование для диагностики заболевания, и результаты анализа не могут стать основанием для постановления диагноза.

Тест является нечувствительным к БЦЖ-вакцинации.

Для проведения ИФА на туберкулез берется кровь с вены.

Перед сдачей анализа стоит помнить о нескольких несложных правилах, необходимых для того, чтобы результаты теста были верными:

1. Перед сдачей анализа нужно исключить употребление антибиотиков, поскольку они могут искажать результат.
2. После употребления пищи должно пройти минимум 5 часов, а ещё лучше – чтобы анализ проводился утром на голодный желудок.
3. За несколько дней до проведения диагностики необходимо отказаться от алкоголя и жирной пищи. Курить перед сдачей анализа так же нежелательно.

Обычно узнать результат анализа на туберкулез можно уже через несколько часов после их сдачи. Если, по результатам анализа, коэффициент позитивности составляет 0 – 0,79, это говорит об отсутствии активной формы этого серьезного заболевания.

Положительный результат ИФА свидетельствует не только о том, что организм поражен активной формой туберкулеза разной локации.

Антитела в сыворотке крови могут остаться после лечения туберкулеза, а также свидетельствовать о тубинфицированности (наличии микробактерий в организме на фоне отсутствия симптомов заболевания).

Анализ крови является достаточно надежным методом диагностики сложного инфекционного заболевания.

Чувствительность тест-системы варьируется от 61 % (при туберкулезе лимфатической системы) до 100 % (при туберкулезном экссудативном плеврите).

С помощью данного скрининга можно обнаружить наличие инфекции, которая локализуется в любом внелегочном органе или системе.

источник

Иммуноферментный анализ (ифа на туберкулез) — альтернатива пробе Манту и Диаскентесту, то есть еще одно лабораторное исследование на выявление палочки Коха (возбудителя туберкулеза) в организме. В России данный метод используется всего несколько лет и практически не востребован. Не исключено, что родители просто не знают об имеющейся альтернативе. Для квантиферонового теста используется кровь, а сама процедура основана на взаимодействии антител и антигенов.

Именно эта категория населения подвергается обязательной диагностике ежегодно. Основной метод — реакция Манту. Его суть состоит во введении подкожно туберкулина и анализе через трое суток итога. Норма — след от инъекции не должен быть более 0,5 см. В противном случае речь идет об инфицировании.

Существуют и другие способы диагностики:

1. Посев мокроты. Анализ отличается точностью, но в то же время долгим сроком выполнения (до двух месяцев). Мокрота собирается в чистый контейнер натощак до чистки зубов. После специалисты создают благоприятную среду для развития бактерий туберкулеза. Если отмечается их активный рост, то хозяин пробы заражен. Иногда приходится трижды сдавать мокроту.
2. Введение бронхоскопа (иногда в сочетании с биопсией) в дыхательные органы. Проводится под местным обезболиванием.
3. Анализ плазмы (ПЦР). Полимеразная цепная реакция позволяет обнаружит сами клетки бактерий, что делает его максимально точным. Позволяет определить объем бактерий и их локацию, тип и форму туберкулеза. Срок — максимум двое суток.
4. Анализ плазмы (АИФ). Кровь сдается единожды, результат обычно готов через двое суток. Минус процедуры в том, что специалистами рекомендуется использовать его только в очагах со слабым риском заражения. Определяет наличие антител в организме. То есть больше остальных схож с Манту. Назначается вместо туберкулин-диагностики или в дополнение, если возникают сомнения в достоверности показателей.
5. Рентген. Назначается дополнительно при сомнительной или плюсовой реакции Манту. Также назначается часто болеющим детям, особенно страдающим хроническими болезнями дыхательной системы. Процедура выявляет полости в легких и показывает их общее состояние.
6. Сбор анамнеза со слов родителей и ребенка. Список вопросов должен дать фтизиатру (педиатру) развернутое представление о ситуации: контактировал ли ребенок с зараженным человеком, болел ли сам, инфицирован ли кто-то из родных и близкого окружения, стоял или стоит ли ребенок на учете в диспансере, какова чувствительность к туберкулину, имеются ли хронические либо острые заболевания, каковы условия проживания. Это необходимо для подбора оптимального диагностического комплекса.

Согласно закону, родители могут отказаться от введения туберкулина в организм их ребенка. И большинство активно пользуется этим правом под страхом возможных осложнений и неадекватной реакции иммунитета на Манту. Однако при этом для допуска дитя в образовательную организацию необходимо получить письменное заключение о его здоровье от фтизиатра. В этом случае и может помочь анализ ифа на туберкулез.

источник

Квантифероновый тест – современный лабораторный метод диагностики туберкулеза. Методика рекомендована национальными ведомствами здравоохранения в качестве альтернативы кожным пробам в странах с низкой заболеваемостью туберкулезом (европейские страны, США, Австралия).В России тест начали использовать несколько лет назад. Однако у нас он мало востребован. Квантифероновый тест — что это такое, и почему он не популярен в России — мы расскажем в этой статье.

Квантифероновый тест на туберкулез выявляет ту же реакцию иммунных клеток, что и Диаскинтест. Но с двумя отличиями:

Он делает это не на коже, а в пробирке;

используют не 2, а 3 антигена туберкулезной палочки.

Эти белки-антигены отсутствуют в вакцине БЦЖ. По этой причине анализ не дает положительной реакции у привитых детей, чем он и отличается в лучшую сторону от Манту.О чем же говорит положительный квантифероновый тест:

На наличие в организме туберкулезной палочки при так называемой латентной стадии, когда болезнь не проявляет себя никакими симптомами; на присутствие туберкулезного возбудителя в стадии активного туберкулезного процесса.

Таким образом, квантифероновый тест назначается для выяснения: инфицирован человек туберкулезом или нет.При этом тест не отвечает на вопрос является ли инфицирование первичным, латентной стадией заболевания, активным процессом или уже пролеченной формой.

Чувствительность и специфичность квантиферонового теста

Любой диагностический метод имеет два основных критерия:

Чувствительность показывает, может ли тестовая методика дать отрицательный результат при наличии заболевания. Этот показатель измеряется в процентах для каждой категории больных (первично инфицированные, с латентной формой и др.) отдельно. Затем его усредняют и считают, что чем выше процент, тем более чувствителен метод.То есть 100% чувствительность говорит о том, что методика никогда не показывает ошибочный отрицательный результат.Специфичность, наоборот, ограничивает параметр чувствительности, который при значениях, приближенных к 100%, может давать ошибочную положительную реакцию. Например, Манту, помимо туберкулезной палочки, дает положительный ответ у вакцинированных лиц.То есть высокая специфичность метода свидетельствует о том, что он никогда не показывает ошибочный положительный результат. Проблема в том, что в России практически 100% взрослого населения является инфицированным туберкулезной палочной. При таком положении вещей делать квантифероновый тест взрослым не имеет смысла, т.к. в соответствии с усредненной чувствительностью метода он покажет наличие туберкулеза в той или иной его фазе у 84% людей. При этом примерно у 98% из этих людей заболевание никогда не перейдет в активную форму.У детей этот тест за счет своей высокой специфичности достаточно эффективен. В то же время чувствительность метода не высока. То есть, используя только его, можно «пропустить» туберкулез примерно в 16% случаев. По этой причине российским детям сначала ставят высокочувствительную пробу Манту и далее при необходимости уточнения диагноза проводят квантифероновый тест.Тест показан детям с сильной реакцией на Манту или с виражом Манту.

Преимущества

Высокая специфичность, т.е. метод никогда не показывает ошибочный положительный результат;

лабораторный характер исследования, т.е. результаты более объективны, чем визуальная оценка кожных проб;

может быть проведен любому человеку, в т. ч. людям с противопоказаниями к кожным пробам, с гиперчувствительностью к туберкулину;

отсутствие побочных реакций; нет ограничений по применению – возможно в период острых вирусных инфекций, сразу после вакцинации.к оглавлению

У квантиферонового теста на туберкулез есть и недостатки:

Может показывать ложноотрицательный результат из-за средней чувствительности метода;

может показывать ложноположительный результат при инфицировании нетуберкулезными микобактериями (присуще пробе Манту и Диаскинтесту также);

тест делается не в каждом городе;

это достаточно дорогой анализ – в различных регионах он стоит от 1500 до 4500 руб.

ЗаключениеКвантифероновый тест является лабораторным аналогом Диаскинтеста.Он обладает примерно той же достоверностью, но не требует внутрикожного введения препарата.Этот анализ ориентирован на детей, у которых есть подозрение на туберкулез.

Антитела к возбудителю туберкулеза (M. tuberculosis) – это специфические иммуноглобулины, вырабатываемые иммунной системой в ответ на инфицирование возбудителем туберкулеза.

Иммуноферментный анализ (ИФА).

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Как правильно подготовиться к исследованию?

Не курить в течение 30 минут до сдачи крови.

Общая информация об исследовании

Туберкулез – это инфекционное заболевание, возбудителями которого являются аэробные микобактерии (M. tuberculosis, M. bovis, M. africanus, M. microti), распространенные в почве, воде и у животных. Mycobacterium tuberculosis – это вид микобактерий, который вызывает туберкулез у человека в 92 % случаев.M. tuberculosis передается воздушно-капельным путем от больных туберкулезом в активной форме. У 90 % людей после первичного инфицирования микобактерии оседают в нижних отделах легких и не приводят к развитию заболевания, так как вырабатывается иммунный ответ, не допускающий увеличения количества бактерий. Однако в случае сильного ослабления иммунной системы туберкулезные палочки начинают активно размножаться и туберкулез переходит из латентной формы в активную. Возможно поражение легких, костей, суставов, мочеполовых органов, лимфатической системы, кожи, глаз и нервной системы.Микроскопическое исследование посева мокроты по-прежнему считается «золотым стандартом» в диагностике туберкулеза. Однако данный метод имеет как свои достоинства (высокая специфичность), так и недостатки (низкая чувствительность, т. к. необходима определенная концентрация бактерий в образце). Эффективность метода ниже в отношении специфических категорий лиц (ВИЧ-инфицированных, людей старше 60 лет и детей, у которых к тому же существуют сложности со сбором мокроты). Кроме того, данное исследование занимает продолжительное время, т. к. для роста бактерий требуется 6-8 недель. Наряду с бактериологическим методом широко распространено рентгенологическое исследование. Оба метода применимы только к легочным формам туберкулеза. С другой стороны, при помощи метода туберкулиновой пробы практически невозможно дифференцировать латентную и активную формы туберкулеза.

Дифференциальная скрининговая диагностика активного туберкулеза возможна при помощи определения специфических антител к М. tuberculosis методом иммуноферментного анализа.На активной стадии туберкулеза начинается интенсивная выработка IgG и IgM антител к специфическим антигенам, которые могут быть выявлены в сыворотке крови уже через месяц с начала активизации микобактерий. Высокая специфичность теста достигается использованием специфических для M. tuberculosis антигенов, что исключает ложноположительные результаты у вакцинированных и инфицированных другими микобактериями лиц. Чувствительность данной тест-системы составляет от 61 % (туберкулез лимфатических узлов) до 100 % (туберкулезный экссудативный плеврит) в зависимости от локализации инфекции; специфичность – 95 %.Для чего используется исследование?

Для выявления активного туберкулеза, в особенности внелегочных форм.

Для мониторинга эффективности лечения туберкулеза.Для выявления инфицированных лиц.

Для подтверждения диагноза (наряду с использованием дополнительных диагностических исследований).

Когда назначается исследование?

Когда известно, что пациент имел длительный контакт с больными туберкулезом или что его работа связана с постоянным контактом с людьми из групп риска (бездомными, инъекционными наркопотребителями, лицами, находившимися в местах лишения свободы).При соответствующих симптомах: слабости, быстрой утомляемости, субфебрильной температуре тела, ночной потливости, персистирующем кашле в течение 2-3 недель, боли в грудной клетке (легочном туберкулезе), хронических болях в спине, суставах, брюшной области с невыясненной этиологией.

При длительном безрезультатном лечении хронического простатита, цистита, пиелонефритов и при воспалении эндометрия (туберкулезе мочеполовых органов).

Что означают результаты?

Результат: отрицательно.Коэффициент позитивности: 0 — 0,79.Отрицательный результатОтсутствие активной формы заболевания.

Активная форма туберкулеза различной локализации.

Антитела, оставшиеся после перенесенного заболевания.

Тубинфицированность – присутствие микобактерий в организме (если нет клинических проявлений заболевания).

Что может влиять на результат?

Эффективное лечение туберкулеза сопровождается резким увеличением количества антител, уровень которых приходит в норму по истечении некоторого времени.

Важные замечания

Этот тест особенно важен, когда при отрицательном результате рентгенологического исследования, микроскопии и методе ПЦР есть симптомы неясного происхождения, схожие с проявлениями туберкулеза внелегочных форм.Положительный результат – недостаточное основание для постановки диагноза «активный туберкулез», так как данный анализ должен сопровождаться другими диагностическими тестами (микроскопией бактериальных культур, ПЦР) в соответствии с клинической картиной и предполагаемыми очагами локализации инфекции для более углубленного обследования.На ранней стадии инфекции тест может дать отрицательный результат из-за того, что еще не выработалось достаточное количество антител. В таких случаях при симптомах инфекции рекомендуется повторить исследование через 2-7 недель или провести другие виды тестирования.Тест нечувствителен к БЦЖ-вакцинации, так как в нем задействованы антигены, специфичные для M. Tuberculosis и нехарактерные для M. Bovis.Возможность ложноположительных результатов данного анализа исключена в связи с отсутствием взаимовлияния с другими видами микобактерий.Тест рассчитан на выявление только активной формы туберкулеза вне зависимости от его локализации.Данное исследование подходит для пациентов с иммунодефицитами различного происхождения (ВИЧ, онкологией), так как тест-система позволяет обнаружить иммуноглобулины всех трех классов (G, M, A).

источник

Туберкулез — опасное заболевание, которое успешно лечится при своевременной диагностике.

Одно из наиболее информативных исследований, позволяющих выявить недуг на ранней стадии, носит название метод ПЦР (полимеразной цепной реакции).

Анализ ПЦР — не только самое информативное, но и одно из самых доступных исследований, которое позволяет выявить туберкулез на ранних стадиях.

Все живые микроорганизмы, включая вирусы и бактерии, содержат в своей структуре молекулы РНК и ДНК. Выделив эти кислоты, можно с большой достоверностью сказать, какие чужеродные агенты присутствуют в крови человека, и поставить точный диагноз.

Суть метода ПЦР заключается в особой обработке образцов биологических жидкостей, в результате чего можно определить, к какому виду относятся присутствующие в нем микроорганизмы.

Методика ПЦР применяется у людей с тяжелыми поражениями легких в тех случаях и респираторными проявлениями (сильный кашель, кровохаркание), когда точно диагностировать болезнь по клиническим симптомам невозможно.

Рекомендуется пройти исследование и после непосредственного контакта с носителем заболевания. В число преимуществ, которыми он обладает, входят:

• скорость выполнения — для получения результата не нужно выращивать культуру возбудителя или проводить другие сложные процедуры;
• высокая информативность — при диагностике туберкулеза точность анализа достигает 90% и выше;
• высокая чувствительность и специфичность — для выявления возбудителей болезни в материале может содержаться всего одна клетка вируса;
• универсальность — для анализа подходят практически любые биологические жидкости: мокрота, кровь, смывы бронхов.

Для сравнения: точность микроскопии мазков мокроты, которая используется для выявления туберкулеза, составляет всего 40-50%, а при низком количестве возбудителей снижается до 10% и меньше. Культуральные исследования мокроты более информативны, но для получения результатов требуется от 2 до 8 недель.

Можно использовать ПЦР на туберкулез вместо Манту, если у человека имеются какие-либо противопоказания к пробе.

К недостаткам методики относится риск получения ложноотрицательного результата. Иными словами, отсутствие в мокроте, крови или моче специфического ДНК еще не говорит об отсутствии туберкулеза у больного.

Важно. При диагностике туберкулеза у детей чувствительность анализа ПЦР ниже, чем у взрослых, и составляет около 25-83%.

Фото 1. Делать ПЦР вместо Манту ребенку, это хороший вариант, если он аллергик или часто болеет.

Процедура проведения анализа ПЦР проводится посредством специального прибора под названием амплификатор, и состоит из четырех этапов. Для проведения исследования необходимы участки ДНК, с которых начинается синтез молекул, нуклеотиды (основы молекул ДНК), а также полимераза, или фермент, ускоряющий проведение процедуры.

1. Забор биологического материала (мокрота, кровь, смывы бронхов).
2. Прогревание образца до температуры около 98% для разрушения первичной структуры цепочки ДНК.
3. Отжиг, или снижение температуры на несколько градусов, чтобы связать праймер с нитью ДНК.
4. Синтез молекул, необходимых для получения результата.

После проведения 25-30 подобных циклов образуется определенное количество копий ДНК вирусов, по которым легко определить возбудителя заболевания.

Внимание: анализ ПЦР не отличает «мертвые» микроорганизмы от «живых», поэтому результат может быть положительным в течение определенного времени после проведенного лечения.

Если сдается анализ крови ПЦР на туберкулез, то нет необходимости в специальной подготовке, но больным рекомендуется придерживаться общих правил: воздержаться от приема пищи не менее чем на 8 часов, исключить алкоголь и прием медикаментозных препаратов, не курить в течение часа перед забором материала.

Мокроту собирают в утреннее время после чистки зубов и тщательного полоскания полости рта.

Если экссудат выделяется плохо, накануне вечером следует принять отхаркивающий препарат или сделать ингаляцию. Диагностическую ценность имеет мокрота со слизью, гноем, белыми или желтоватыми вкраплениями.

Если взять мокроту на анализ невозможно, для выявления возбудителей заболевания используются смывы из бронхов. Такой анализ не требует подготовки, а забор материала выполняется следующим образом. С помощью гортанного шприца больному вливают в трахею раствор хлорида натрия, который вызывает сильный кашель — выкашлянная жидкость используется для исследования.

Внимание. Результат анализа искажают антибиотики, гепарин и другие препараты, использующиеся для местного лечения, поэтому исследование рекомендуется проводить через 10-14 дней после приема.

источник

Туберкулез является одним из самых распространенных заболеваний в мире. В среднем, от туберкулеза каждый час умирает 1 человек. Ведущие лаборатории мира занимаются разработкой не только современных методов лечения, но и качественных способов раннего обнаружения Mycobacterium tuberculosis.

Наибольшую эффективность показал анализ крови на содержание иммуноглобулина AMG к туберкулезу. Благодаря ему стало возможным выявление заболевания еще до появления развернутой клинической картины.

В настоящее время, помимо микроскопического исследования биологических жидкостей, важным этапом диагностики является лабораторная диагностика. Одним из наиболее быстрых, дешевых и эффективных методов является иммуноферментный анализ крови или ИФА. С его помощью возможно определение суммарных антител к микобактерии в раннем периоде заболевания.

Анализ на иммуноглобулин AMG подразумевает, что в качестве диагностических маркеров будут оценивать содержание суммарных антител Ig A, Ig M, Ig G к микобактерии туберкулеза. Количество и соотношение данных иммунных комплексов способно указать не только на наличие самого заболевания, но и на характер, продолжительность течения и зону поражения.

Так, антитела к Ig A, говорят о том, что в патологический процесс были вовлечены органы дыхательной системы. Чаще всего поражается альвеолярный аппарат легких. Роль данного иммуноглобулина заключается в обеспечении защиты альвеол от пагубного влияния туберкулезной палочки, что достигается путем препятствия прохождению микроорганизма через слизистые оболочки.

Несмотря на то, что данный тип не обладает свойством нейтрализовать патогенного агента, но он запускает каскад иммунных реакций, с помощью которых происходит формирование полноценного иммунного ответа. Определение Ig A проводится с помощью исследования слюны.

Ig класса М являются одними из наиболее значимых в диагностике заболевания, так как являются маркерами первичного или острого периода заболевания. Данный тип антител циркулирует в крови и способен усиливать фагоцитарную активность лимфоцитов. Получив сигнал о возможном проникновении бактерии от Ig A, Т-хелперы запускают каскад реакций, который называется первичный иммунный ответ.

Первым его звеном являются антитела к Ig M. Благодаря высокой активности этих иммуноглобулинов, организму удается за очень короткий промежуток времени включить гуморальные системы ответа и усилить как миграцию лимфоцитов к очагу поражения, так и ускорить синтез необходимых в данный момент иммуноглобулинов других классов.

Наибольшее количество составляют Ig G. Данный класс приходит на смену Ig M, что говорит о длительном течении заболевания, а также сформированном иммунитете к тому или иному возбудителю. Их функции подобны иммуноглобулинам М, однако благодаря гораздо меньшим размерам, Ig G способны проникать через различные биологические барьеры в организме.

Это способствует тому, что при повторном контакте с патогеном, иммунный ответ будет сформирован гораздо быстрее, вследствие чего ускорится процесс выздоровления. По мере выздоровления, Ig класса М будут заменяться G-классом, благодаря чему врач может судить об этапе заболевания, а также качестве проводимой терапии.

Сложность диагностики туберкулеза заключается в том, что его клиническая картина подобна множеству других заболеваний дыхательной системы. Около 70% людей не подозревают о том, что поражены микобактерий, поэтому латентный период может длиться месяцы или годы.

Еще 10% являются носителями палочки Коха. У таких людей заболевание может никогда не развиться, однако они представляют наибольшую опасность для общества.

Для туберкулеза характерно сочетание нескольких основных симптомов:

• лихорадка;
• обильное потоотделение, особенно в ночное время;
• вялость, апатия, быстрая утомляемость;
• продуктивный кашель в течение трех и более недель;
• быстрая потеря веса без видимых причин.

Первые признаки туберкулеза

Если у пациента наблюдаются подобные проявления болезни, ему необходимо немедленно обратиться к врачу. Определение суммарных антител к туберкулезу входит в первую линию диагностики заболевания, наравне с реакцией Манту и рентгеном легких. Зачастую клиническая картина заболевания может быть стертой, поэтому аллергопроба может давать ложный результат.

На сегодняшний день медиками применяются следующие методы лабораторной диагностики туберкулеза – ИФА, ПЦР, проба Манту. Рассмотрим их подробнее.

Данное исследование является методом экспресс-диагностики туберкулеза. С помощью ИФА удается получить результат в кратчайшие сроки, а также при необходимости исследовать одновременно кровь на другие заболевания.

ПЦР один из наиболее точных методов лабораторной диагностики. С помощью современных математических алгоритмов удается создать генетическую модель возбудителя. Благодаря этому можно максимально точно установить вид бактерии или вируса, даже в пределах одного семейства. Анализ обладает наибольшей чувствительностью, однако, в рутинной практике используется реже, нежели ИФА и Манту.

Главными минусами ПЦР является длительность проведения и высокая стоимость. Так как для проведения анализа требуются специальные реагенты, а также специальное оборудование, метод распространен только в крупных городах.

Широко известная реакция Манту используется для выявления иммунитета к туберкулезу. Проба проводится при внутрикожном введении небольшой дозы туберкулина. По состоянию выраженности аллергической реакции судят о состоятельности иммунной системы противостоять действию микобактерии.

Данный метод применяется только в качестве скрининга и не может быть основанием для подтверждения диагноза. Однако “положительный” результат дает повод для проведения дополнительного исследования.

При проведении теста ИФА диагностическое значение имеет преобладание определенного класса антител над другими. Для диагностики туберкулеза используют три основных класса:

Проба Манту уже давно используется в диагностике туберкулеза. Исследование зарекомендовало себя как эталон исследования функции иммунной системы при воздействии на нее туберкулина. К плюсам метода относится его простота, низкая цена и удобство проведения. Именно по этой причине его применяют в детских учреждениях.

Туберкулиновая проба имеет низкую специфичность, из-за чего конечный результат может изменяться под воздействием различных факторов. Так, ложноположительный результат может возникнуть при сопутствующих бактериальных заболеваниях, аллергических реакциях, механическом повреждении инъекционного участка.

Исследование крови обладает высокой специфичностью. Применение его возможно в условиях как стационара, так и поликлинического приема. Благодаря доступности ИФА стало возможным выявлять носителей заболевания и начать своевременное лечение. О качестве проводимой терапии судят по результатам исследования крови.

Зачастую при туберкулезе идет сильное поражение легочной ткани, поэтому клиническая симптоматика способна сохраняться даже после исчезновения возбудителя из организма.

Разработка современных методов исследования приведет к созданию более качественных вакцин, медикаментов и тестов. Определение суммарных антител к иммуноглобулинам AMG является одним из самых важных открытий конца ХХ века. Своевременная и точная диагностика помогает снизить количество возникновения новых случаев заболеваемости и установить контроль над данной патологией.

источник

Определение ДНК возбудителей туберкулеза, комплекса микобактерий: M. tuberculosis, M. bovis, M. bovis BCG, M. microti, M. africanum в сыворотке крови методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с детекцией в режиме «реального времени».

Туберкулёз (от лат. tuberculum — бугорок) – распространённое, социально зависимое заболевание человека. Болеют им и животные. Возбудитель туберкулёза открыт Р. Кохом в 1882 г. Это кислотоустойчивые аэробные бактерии (74 вида) рода Мycobacterium, широко распространённые в почве, воде и у животных. У человека чаще всего возбудителем является Mycobacterium tuberculosis. Второй по частоте является Mycobacterium bovis. Оба вида очень устойчивы ко многим факторам внешней среды, а в организме очень долго остаются жизнеспособными и могут вызвать заболевание через многие годы после заражения. Очень важно, что микобактерии туберкулёза могут образовывать так называемые L-формы. Сохраняясь в организме, они создают противотуберкулёзный иммунитет.

Длительное время туберкулёз может протекать скрыто и обнаруживаться случайно, хотя нередко уже проявляются такие симптомы, как слабость, быстрая утомляемость, субфебрильная температура, ночная потливость, а в крови – анемия и лейкопения. В настоящее время, несмотря на все достижения антимикробной терапии, туберкулёз угрожает будущему нации. Поэтому все методы диагностики, особенно его латентных форм являются крайне важными.

Существует много методов лабораторной диагностики туберкулёза: микроскопия мазка (чаще всего для этого используют мокроту), классический культуральный метод, ИФА. Всем им присущи достоинства, но и определённые недостатки, в частности, обнаружение микобактерий только в случае их достаточного количества.

В последние годы для диагностики используют полимеразную цепную реакцию (ПЦР). Её высокая чувствительность позволяет обнаружить в исследуемом материале единичные клетки и даже их фрагменты ДНК. Метод исключает перекрёстные реакции и специфичность достигает 100%. ПЦР позволяет дифференцировать ограниченные и диссеминированные формы туберкулёза, особенно у детей даже при отрицательных результатах микробиологических исследований.

• определяемый фрагмент — специфичные участки ДНК микобактерий;
• специфичность определения — 100%;
• чувствительность определения- 100 копий ДНК микобактерий в образце.

1. Макаревич А.Э. Заболевания органов дыхания – М. Высшая школа, 2000. – 368 с.
2. Jacobs D. et al. Laboratory test handbook/ Lexi-Comp./2002 — pр. 828 — 829.

• Лихорадка, характеризующаяся ежедневным двойным повышением и понижением температуры тела. На фоне туберкулиновой гиперчувствительности или туберкулиновой анергии.
• Острые воспалительные заболевания верхних и нижних дыхательных путей с длительным контактом с туберкулёзным больным в анамнезе.
• Ненормальная реакция на туберкулиновую пробу (гиперчувствительность или анергия) на фоне обострения какого-либо системного заболевания.
• Подозрение на системную волчанку.

Интерпретация результатов исследований содержит информацию для лечащего врача и не является диагнозом. Информацию из этого раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. Точный диагноз ставит врач, используя как результаты данного обследования, так и нужную информацию из других источников: анамнеза, результатов других обследований и т.д.

Тест качественный. Результат выдаётся в терминах «обнаружено» или «не обнаружено».

• «обнаружено»: в анализируемом образце обнаружены специфичные для микобактерий фрагменты ДНК, инфицирование микобактериями;
• «не обнаружено»: в анализируемом образце не обнаружены специфичные для микобактерий фрагменты ДНК или концентрация возбудителя в образце ниже границы чувствительности теста.

Обращаем внимание, что сроки выполнения ПЦР-исследований могут быть увеличены при проведении подтверждающих тестов.

источник